| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 材料与方法 | 第15-35页 |
| 一、材料 | 第15-22页 |
| 1.细胞及细胞培养相关试剂及材料 | 第15页 |
| 2.Bmi-1shRNA的提取、逆转录及实时定量PCR相关试剂 | 第15页 |
| 3.Westernblot相关试剂 | 第15-16页 |
| 4.HE及组化染色相关试剂 | 第16页 |
| 5.动物实验相关试剂 | 第16页 |
| 6.实验常用溶液配方 | 第16-21页 |
| 7.主要仪器 | 第21-22页 |
| 8.主要生物信息学分析软件 | 第22页 |
| 二、实验方法 | 第22-35页 |
| 1.细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.细胞的复苏、传代和冻存 | 第23页 |
| 3.构建稳定 Bmi-1 表达下调的 TM40D 细胞系 | 第23-24页 |
| 4.定量PCR | 第24-26页 |
| 5.Westernblot | 第26-27页 |
| 6.细胞增殖活力测定 | 第27页 |
| 7.细胞迁移和侵袭能力测定 | 第27-28页 |
| 8.小鼠饲养和繁殖 | 第28页 |
| 9.小鼠基因型鉴定 | 第28-30页 |
| 10.实验小鼠造模与药物干预 | 第30-31页 |
| 11.小鼠骨移植肿瘤X-ray活体摄片监测 | 第31-32页 |
| 12.小鼠大体解剖观察重要脏器转移情况 | 第32页 |
| 13.Micro-CT评估骨转移灶溶骨性病变及l,25(OH)2D3对骨转移的抑制作用 | 第32页 |
| 14.TM40D细胞接种胫骨后病理学检测 | 第32-33页 |
| 15.抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAPStaining) | 第33页 |
| 16.免疫组织化学检测法 | 第33-34页 |
| 17.统计及统计学符号的标识 | 第34-35页 |
| 结果 | 第35-51页 |
| 一、活性维生素D在抑制乳腺癌细胞生长和骨转移中的作用 | 第35-43页 |
| 1.1 ,25(OH)2D3体外抑制小鼠乳腺癌细胞TM40D的增殖能力 | 第35-36页 |
| 2.1 ,25(OH)2D3体外抑制小鼠乳腺癌细胞TM40D的迁移能力 | 第36-37页 |
| 3.1 ,25(OH)2D3体外抑制小鼠乳腺癌细胞TM40D的侵袭能力 | 第37-38页 |
| 4.1 ,25(OH)2D3在抑制乳腺癌骨转移后的生长成瘤和溶骨性骨破坏中的作用 | 第38-39页 |
| 5.1 ,25(OH)2D3通过抑制乳腺癌细胞诱导破骨细胞骨吸收而降低其溶骨性骨破坏 | 第39-40页 |
| 6.1 ,25(OH)2D3体内外明显下调Bmi-1在乳癌细胞中的表达 | 第40-42页 |
| 小结 | 第42-43页 |
| 二、活性维生素D经Bmi-1介导抑制乳腺癌移植瘤生长和骨转移的作用 | 第43-51页 |
| 1.Bmi-1下调通过上调P16、P19和P53表达水平而抑制乳腺癌移植瘤生长 | 第43-44页 |
| 2.Bmi-1在介导活性维生素D缺乏引起的乳腺癌移植瘤生长加速中的作用 | 第44-46页 |
| 3.Bmi-1下调抑制小鼠乳腺癌细胞TM40D体外增殖、迁移和侵袭能力 | 第46-48页 |
| 4.Bmi-1下调体内抑制乳腺癌细胞产生的溶骨性骨破坏 | 第48-49页 |
| 5.外源性l,25(OH)2D3和Bmi-1下调均上调抑癌基因在骨转移灶内乳腺癌细胞中的表达 | 第49-50页 |
| 小结 | 第50-51页 |
| 讨论 | 第51-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 综述 | 第62-78页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
