| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 综述 | 第13-23页 |
| 1.1 Serpin分子的结构 | 第13-14页 |
| 1.2 蜱Serpin多重功能 | 第14-19页 |
| 1.2.1 Serpin在免疫上的作用 | 第14-15页 |
| 1.2.2 Serpin在炎症反应上的作用 | 第15-16页 |
| 1.2.3 Serpin在抗凝血上的作用 | 第16-18页 |
| 1.2.4 Serpin在病原体传播上的作用 | 第18页 |
| 1.2.5 在消化上的功能研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3 Serpin分子的潜在应用和展望 | 第19-23页 |
| 1.3.1 抗蜱疫苗 | 第19-20页 |
| 1.3.2 抗凝血制剂 | 第20-21页 |
| 1.3.3 药物靶点 | 第21-23页 |
| 第2章 RHS-2重组蛋白的表达及酶活抑制试验 | 第23-33页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-28页 |
| 2.3.1 RHS-2融合蛋白在原核表达系统中的表达纯化 | 第24-27页 |
| 2.3.2 rRHS-2蛋白的相关酶活抑制试验 | 第27-28页 |
| 2.4 实验结果 | 第28-31页 |
| 2.4.1 RHS-2-His原核表达系统中的表达纯化 | 第28-30页 |
| 2.4.2 rRHS-2对六种组织蛋白酶的活性抑制 | 第30-31页 |
| 2.5 讨论 | 第31-33页 |
| 第3章 RHS-2分子在肠道细胞定位和吸血过程中的动态表达研究 | 第33-45页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 实验材料 | 第33页 |
| 3.3 实验方法 | 第33-40页 |
| 3.3.1 dsRNA的合成 | 第33-35页 |
| 3.3.2 RNAi对蜱体内RHS2基因沉默效果检测 | 第35-37页 |
| 3.3.3 RHS2抗血清的制备 | 第37-38页 |
| 3.3.4 蜱中肠RHS2蛋白的WesternBlot鉴定 | 第38-39页 |
| 3.3.5 蜱中肠RHS2蛋白的分布检测 | 第39-40页 |
| 3.4 实验结果 | 第40-43页 |
| 3.4.1 RHS-2和LucifrasedsRNA的合成 | 第40页 |
| 3.4.2 抗体水平检测 | 第40-41页 |
| 3.4.3 RHS2基因沉默效果 | 第41-42页 |
| 3.4.4 蜱中肠RHS2蛋白的WesternBlot鉴定 | 第42页 |
| 3.4.5 蜱中肠RHS2蛋白的分布检测 | 第42-43页 |
| 3.5 讨论 | 第43-45页 |
| 第4章 RHS-2基因干扰及粪便蛋白组学分析 | 第45-59页 |
| 4.1 引言 | 第45页 |
| 4.2 实验材料 | 第45页 |
| 4.3 实验方法 | 第45-47页 |
| 4.3.1 蜱的饲养和粪便的收集 | 第45-46页 |
| 4.3.2 蛋白质的定量 | 第46页 |
| 4.3.3 蛋白质的SDS-PAGE | 第46页 |
| 4.3.4 蛋白质的FASP酶解 | 第46页 |
| 4.3.5 酶解产物的LC-MS/MS分析 | 第46-47页 |
| 4.3.6 Maxquant的非标记分析 | 第47页 |
| 4.3.7 Perseus的统计学和生物信息学分析 | 第47页 |
| 4.4 实验结果 | 第47-57页 |
| 4.4.1 蛋白质浓度测定 | 第47-48页 |
| 4.4.2 SDS-PAGE分析 | 第48-49页 |
| 4.4.3 肽段OD280测定 | 第49页 |
| 4.4.4 蛋白质鉴定及定量结果 | 第49页 |
| 4.4.5 蛋白质显著性分析 | 第49-57页 |
| 4.5 讨论 | 第57-59页 |
| 第5章 RHS-2基因干扰后对蜱四种内源蛋白酶转录水平的影响 | 第59-63页 |
| 5.1 引言 | 第59页 |
| 5.2 实验材料 | 第59页 |
| 5.3 实验方法 | 第59-60页 |
| 5.4 实验结果 | 第60-61页 |
| 5.5 讨论 | 第61-63页 |
| 第6章 全文总结 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 | 第71-79页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
