| 中文摘要 | 第10-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| 符号说明 | 第19-21页 |
| 第一篇 文献综述 | 第21-37页 |
| 第一章 反刍动物瘤胃微生物对含氮物质的代谢研究 | 第21-28页 |
| 1. 反刍动物瘤胃内氮源物质的转化 | 第21-22页 |
| 2. 瘤胃微生物对含氮物质的利用研究 | 第22-25页 |
| 2.1 瘤胃细菌对饲料中不同含氮物质的利用 | 第23-24页 |
| 2.1.1 瘤胃细菌对蛋白的降解 | 第23页 |
| 2.1.2 不同含氮物质对瘤胃细菌的促生长作用 | 第23-24页 |
| 2.2 瘤胃原虫对不同形式含氮物质的利用 | 第24页 |
| 2.3 瘤胃真菌对不同含氮物质的利用 | 第24-25页 |
| 2.4 瘤胃微生物在蛋白降解中的协同作用 | 第25页 |
| 3 影响瘤胃微生物降解蛋白质的因素 | 第25-26页 |
| 3.1 蛋白质类型的影响 | 第25页 |
| 3.2 日粮类型的影响 | 第25-26页 |
| 3.3 其他因素的影响 | 第26页 |
| 4. 瘤胃微生物蛋白质的合成代谢及其影响因素 | 第26-28页 |
| 4.1 瘤胃微生物蛋白质合成代谢概况 | 第26页 |
| 4.2 微生物蛋白合成的影响因素 | 第26-28页 |
| 4.2.1 氮源 | 第26页 |
| 4.2.2 能量 | 第26-27页 |
| 4.2.3 温度 | 第27页 |
| 4.2.4 瘤胃液pH值和稀释率 | 第27页 |
| 4.2.5 蛋白质和碳水化合物消化的同步性 | 第27-28页 |
| 第二章 瘤胃原虫与细菌之间氮周转的研究进展 | 第28-37页 |
| 1. 瘤胃内微生物氮代谢的研究 | 第28-29页 |
| 1.1 微生物氮代谢相关指标 | 第28-29页 |
| 1.1.1 微生物蛋白合成效率 | 第28页 |
| 1.1.2 微生物氮占可利用氮的比例 | 第28-29页 |
| 2. 瘤胃微生物氮循环研究 | 第29-32页 |
| 2.1 研究方法 | 第29-31页 |
| 2.1.1 微生物蛋白合成率的研究方法 | 第29-30页 |
| 2.1.2 原虫与细菌之间吞噬关系的研究方法 | 第30-31页 |
| (1) 同位素标记法 | 第30-31页 |
| (2) 荧光标记法 | 第31页 |
| 2.2. 微生物氮循环影响因素 | 第31-32页 |
| 3. 本课题的导出 | 第32-33页 |
| 4 理论假说的提出 | 第33页 |
| 4.1 理论假说与机制 | 第33页 |
| 4.2 理论假说的机理假定 | 第33页 |
| 5. 实验论证的技术路线 | 第33-35页 |
| 5.1 DAPI荧光强度法研究瘤胃原虫对细菌的吞噬关系 | 第34-35页 |
| 5.2 瘤胃原虫与细菌之间氮周转规律与机制的研究 | 第35页 |
| 6. 研究意义及目标 | 第35-37页 |
| 第二篇 试验研究 | 第37-144页 |
| 第一章 瘤胃原虫与细菌之间氮周转方法的建立 | 第37-43页 |
| 引言 | 第37页 |
| 1 材料与方法 | 第37-38页 |
| 1.1 试验材料 | 第37页 |
| 1.2 试验动物 | 第37-38页 |
| 1.3 试验方法 | 第38页 |
| 1.3.1 瘤胃细菌与原虫的分离 | 第38页 |
| 1.3.2 DAPI荧光标记瘤胃细菌 | 第38页 |
| 1.3.3 吞噬试验 | 第38页 |
| 1.3.4 荧光强度测定 | 第38页 |
| 1.4 数据处理 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-41页 |
| 2.1 DAPI荧光标记瘤胃细菌标准曲线的建立 | 第38-39页 |
| 2.1.1 标准曲线中标记细菌浓度的设置 | 第38-39页 |
| 2.1.2 标准曲线的建立 | 第39页 |
| 2.2 不同吞噬时间点游离细菌荧光强度的变化 | 第39-40页 |
| 2.3 瘤胃原虫对细菌的吞噬率及吞噬量 | 第40-41页 |
| 2.3.1 原虫对细菌吞噬量的计算 | 第40页 |
| 2.3.2 瘤胃原虫对细菌的吞噬率及吞噬量结果 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-42页 |
| 4 小结 | 第42-43页 |
| 第二章 不同日粮精粗比对瘤胃原虫与细菌之间氮周转的影响 | 第43-68页 |
| 引言 | 第43页 |
| 1 材料与方法 | 第43-51页 |
| 1.1 试验材料 | 第43-44页 |
| 1.1.1 试验动物与饲养管理 | 第43页 |
| 1.1.2 瘤胃液的采集 | 第43页 |
| 1.1.3 体外发酵装置 | 第43-44页 |
| 1.1.4 人工唾液配方 | 第44页 |
| 1.1.4.1 缓冲试剂和常量元素溶液——A液 | 第44页 |
| 1.1.4.2 微量元素溶液——B液 | 第44页 |
| 1.1.4.3 维生素溶液——C液 | 第44页 |
| 1.1.4.4 还原剂溶液——D液 | 第44页 |
| 1.1.4.5 缓冲液制备 | 第44页 |
| 1.1.4.6 供试培养液 | 第44页 |
| 1.2 试验设计 | 第44-45页 |
| 1.3 测定指标与方法 | 第45-48页 |
| 1.3.1 常规指标测定方法 | 第45-46页 |
| 1.3.1.1 微生物的分离 | 第45页 |
| 1.3.1.2 pH值的测定 | 第45页 |
| 1.3.1.3 氨氮浓度的测定 | 第45页 |
| 1.3.1.4 微生物真蛋白的测定 | 第45-46页 |
| 1.3.1.5 可溶性蛋白的测定 | 第46页 |
| 1.3.1.6 培养液肽氮的测定 | 第46页 |
| 1.3.1.7 培养液AA-N的测定 | 第46页 |
| 1.3.1.8 微生物计数 | 第46页 |
| 1.3.2 SSCP检测 | 第46-48页 |
| 1.3.2.1 瘤胃微生物基因组DNA的提取 | 第46-47页 |
| 1.3.2.2 原虫与细菌保守区域片段的扩增 | 第47页 |
| 1.3.2.3 SSCP检测(非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳) | 第47-48页 |
| 1.3.2.4 SSCP指纹图谱分析 | 第48页 |
| 1.3.3 三种重要蛋白降解菌的定量检测 | 第48页 |
| 1.3.3.1 DNA浓度的测定 | 第48页 |
| 1.3.3.2 保守区域片段的扩增 | 第48页 |
| 1.4 计算公式 | 第48-51页 |
| 1.5 统计分析 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-61页 |
| 2.1 精粗比对发酵参数的影响 | 第51-52页 |
| 2.1.1 精粗比对培养液pH的影响 | 第51页 |
| 2.1.2 精粗比对培养液氨氮浓度的影响 | 第51-52页 |
| 2.2 精粗比对原虫与细菌之间氮素周转的影响 | 第52-58页 |
| 2.2.1 对细菌氮、原虫氮及微生物总氮周转速率的影响 | 第52-53页 |
| 2.2.2. 对原虫吞噬细菌量和吞噬速率的影响 | 第53-57页 |
| 2.2.2.4 相关性分析 | 第55-56页 |
| 2.2.2.4.1 微生物氮周转速率之间的相关性分析 | 第55页 |
| 2.2.2.4.2 微生物氮之间周转速率动态变化的相关性分析 | 第55-56页 |
| 2.2.2.5 微生物氮周转速率与底物精粗比值的回归分析 | 第56-57页 |
| 2.2.3 精粗比对培养液中主要含氮物质组分的影响 | 第57-58页 |
| 2.2.4 瘤胃内环境总氮与瘤胃内环境中各主要形式氮之间周转速率动态变化的相关性分析 | 第58页 |
| 2.3 精粗比对微生物区系的影响 | 第58-60页 |
| 2.3.1 精粗比对微生物区系比例的影响 | 第58-59页 |
| 2.3.2 PCR-SSCP分析 | 第59-60页 |
| 2.3.2.1 PCR扩增结果 | 第59页 |
| 2.3.2.2 SSCP多态性分析 | 第59-60页 |
| 2.4 三种重要蛋白降解菌的定量分析 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-67页 |
| 3.1 不同精粗比对瘤胃内环境参数的影响 | 第61-62页 |
| 3.1.1 精粗比对pH的影响 | 第62页 |
| 3.1.2 精粗比对培养液氨氮浓度的影响 | 第62页 |
| 3.2 对微生物与瘤胃内环境间含氮物质周转的影响 | 第62-66页 |
| 3.2.1 瘤胃微生态氮素微循环研究方法的探讨 | 第63-64页 |
| 3.2.2 对微生物氮素周转的影响 | 第64-65页 |
| 3.2.3 对微生物蛋白产量的影响 | 第65页 |
| 3.2.4 对微生物氮素周转的影响 | 第65-66页 |
| 3.2.5 对原虫吞噬细菌量和吞噬速率的影响 | 第66页 |
| 3.2.6 对瘤胃内环境中氮素周转的影响 | 第66页 |
| 3.3 对微生物区系及区系内类群结构的影响 | 第66-67页 |
| 4 小结 | 第67-68页 |
| 第三章 不同碳源结构NSC/SC对瘤胃原虫与细菌间氮周转的影响 | 第68-89页 |
| 引言 | 第68页 |
| 1 材料与方法 | 第68-69页 |
| 1.1 试验设计 | 第68页 |
| 1.2 测定指标与方法 | 第68-69页 |
| 1.3 增测指标 | 第69页 |
| 1.4 测定方法 | 第69页 |
| 1.4.1 VFA的测定 | 第69页 |
| 1.4.2 肽酶活性的测定 | 第69页 |
| 1.4.3 蛋白酶活性的测定 | 第69页 |
| 1.4.4 原虫细胞膜破碎方法 | 第69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-84页 |
| 2.1 不同NSC/SC日粮对培养液内瘤胃内环境参数的影响 | 第69-72页 |
| 2.1.1 不同NSC/SC日粮对培养液pH的影响 | 第69-70页 |
| 2.1.2 不同NSC/SC日粮对培养液氨氮浓度的影响 | 第70页 |
| 2.1.3 不同NSC/SC日粮对培养液挥发性脂肪酸(VFA)的影响 | 第70-72页 |
| 2.2 不同NSC/SC纯合日粮对原虫与细菌之间氮素周转的影响 | 第72-80页 |
| 2.2.1 对微生物蛋白含量的影响 | 第72-74页 |
| 2.2.2 不同NSC/SC对原虫与细菌之间氮素周转的影响 | 第74-79页 |
| 2.2.2.1 对细菌氮、原虫氮及微生物总氮周转速率的影响 | 第74-75页 |
| 2.2.2.2 对原虫与细菌之间氮素周转的影响 | 第75-77页 |
| 2.2.2.3 统计分析 | 第77-79页 |
| 2.2.2.3.1 微生物之间氮周转速率的相关性分析 | 第77页 |
| 2.2.2.3.2 微生物氮之间周转速率动态变化的相关性分析 | 第77-78页 |
| 2.2.2.3.3 氮周转速率与底物NSC/SC值的回归分析 | 第78-79页 |
| 2.2.3 对培养液中主要含氮物质组分的影响 | 第79-80页 |
| 2.2.4 瘤胃内环境总氮与瘤胃内环境中各主要形式氮之间周转速率动态变化的相关性分析 | 第80页 |
| 2.3 不同NSC/SC日粮对原虫胞内、外肽酶和蛋白酶活性的影响 | 第80-81页 |
| 2.4 不同NSC/SC日粮对微生物区系的影响 | 第81-83页 |
| 2.4.1 对微生物区系比例的影响 | 第81-82页 |
| 2.4.2 PCR-SSCP分析 | 第82-83页 |
| 2.4.2.1 PCR扩增结果 | 第82页 |
| 2.4.2.2 SSCP多态性分析 | 第82-83页 |
| 2.5 三种重要蛋白降解菌的定量分析 | 第83-84页 |
| 3 讨论 | 第84-88页 |
| 3.1 不同NSC/SC对瘤胃发酵参数的影响 | 第84-86页 |
| 3.1.1 对pH值的影响 | 第84-85页 |
| 3.1.2 对氨氮浓度的影响 | 第85页 |
| 3.1.3 对培养液中挥发性脂肪酸(VFA)浓度的影响 | 第85-86页 |
| 3.2 不同NSC/SC对微生物氮素周转的影响 | 第86-87页 |
| 3.3 不同NSC/SC对瘤胃内环境氮素周转的影响 | 第87页 |
| 3.4 不同NSC/SC对微生物活性的影响 | 第87-88页 |
| 4 小结 | 第88-89页 |
| 第四章 不同分子结构氮源对瘤胃原虫与细菌间氮周转的影响 | 第89-109页 |
| 引言 | 第89页 |
| 1 材料与方法 | 第89-90页 |
| 1.1 试验设计 | 第89页 |
| 1.2 测定指标与方法 | 第89页 |
| 1.3 统计分析 | 第89-90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-105页 |
| 2.1 不同分子结构氮源对培养液内瘤胃内环境参数的影响 | 第90-93页 |
| 2.1.1 对培养液pH的影响 | 第91页 |
| 2.1.2 对培养液氨氮浓度的影响 | 第91页 |
| 2.1.3 对培养液挥发性脂肪酸(VFA)的影响 | 第91-93页 |
| 2.2 不同分子结构氮源对原虫与细菌之间氮素周转的影响 | 第93-100页 |
| 2.2.1 对微生物蛋白含量的影响 | 第93-94页 |
| 2.2.2 对微生物氮素周转的影响 | 第94-97页 |
| 2.2.2.1 对微生物氮素周转速率的影响 | 第94-95页 |
| 2.2.2.2 对原虫与细菌之间氮素周转的影响 | 第95-96页 |
| 2.2.2.2.1 对原虫吞噬细菌量和吞噬速率的影响 | 第95页 |
| 2.2.2.2.2 对原虫与细菌之间氮素周转的影响 | 第95-96页 |
| 2.2.2.3 细菌氮、原虫氮及微生物总氮之间周转速率的相关性分析 | 第96-97页 |
| 2.2.2.4 细菌氮、原虫氮与微生物总氮随时间动态变化的相关性分析 | 第97页 |
| 2.2.3 对培养液中主要含氮物质组分的影响 | 第97-99页 |
| 2.2.4 瘤胃内环境总氮与瘤胃内环境中各主要形式氮之间周转速率动态变化的相关性分析 | 第99-100页 |
| 2.3 不同分子结构氮源对微生物活性的影响 | 第100-102页 |
| 2.3.1 对原虫胞内蛋白酶和肽酶活性的影响 | 第100页 |
| 2.3.2 对培养液主要纤维降解酶活性的影响 | 第100-102页 |
| 2.4 不同分子结构氮源对微生物区系的影响 | 第102-104页 |
| 2.4.1 对微生物区系比例的影响 | 第102-103页 |
| 2.4.2 PCR-SSCP分析 | 第103-104页 |
| 2.5 三种重要蛋白降解菌的定量分析 | 第104-105页 |
| 3 讨论 | 第105-107页 |
| 3.1 不同分子结构氮源对瘤胃发酵参数的影响 | 第105-106页 |
| 3.1.1 对pH值的影响 | 第105页 |
| 3.1.2 对氨氮浓度的影响 | 第105-106页 |
| 3.1.3 对VFA浓度的影响 | 第106页 |
| 3.2 不同分子结构氮源对微生物氮素周转的影响 | 第106-107页 |
| 3.3 不同分子结构氮源对瘤胃内环境氮周转的影响 | 第107页 |
| 3.4 不同分子结构氮源对培养液中纤维降解酶活性的影响 | 第107页 |
| 3.5 不同分子结构氮源对三种主要的蛋白降解菌的影响 | 第107页 |
| 4 小结 | 第107-109页 |
| 第五章 不同单体氨基酸对瘤胃原虫与细菌之间的氮周转的影响 | 第109-131页 |
| 引言 | 第109页 |
| 1 材料与方法 | 第109-111页 |
| 1.1 试验设计 | 第109-110页 |
| 1.2 测定指标 | 第110-111页 |
| 1.2.1 测定指标 | 第110页 |
| 1.2.2 测定方法 | 第110-111页 |
| 1.2.2.1 尿素氮测定 | 第110页 |
| 1.2.2.2 滤纸纤维素酶活性 | 第110-111页 |
| 1.2.2.3 木聚糖酶活性 | 第111页 |
| 1.2.2.4 果胶酶活性 | 第111页 |
| 1.2.2.5 淀粉酶活性 | 第111页 |
| 2 结果与分析 | 第111-126页 |
| 2.1 不同单体氨基酸对发酵参数的影响 | 第111-115页 |
| 2.1.1 不同单体氨基酸对培养液pH的影响 | 第111-112页 |
| 2.1.2 不同单体氨基酸对培养液氨氮浓度的影响 | 第112页 |
| 2.1.3 不同单体氨基酸对培养液挥发性脂肪酸(VFA)的影响 | 第112-115页 |
| 2.2 不同单体氨基酸对原虫与细菌之间氮素周转的影响 | 第115-121页 |
| 2.2.1 对微生物蛋白含量的影响 | 第115页 |
| 2.2.2 不同单体氨基酸对微生物氮素周转的影响 | 第115-119页 |
| 2.2.2.1 对细菌氮、原虫氮及微生物总氮周转速率的影响 | 第115-117页 |
| 2.2.2.2 不同单体氨基酸对原虫吞噬细菌量和吞噬速率的影响 | 第117-118页 |
| 2.2.2.2.2 不同单体氨基酸对原虫与细菌之间氮素周转的影响 | 第117-118页 |
| 2.2.2.3 细菌氮、原虫氮及微生物总氮之间周转速率的相关性分析 | 第118-119页 |
| 2.2.2.4 细菌氮、原虫氮及微生物总氮随时间动态变化的相关性分析 | 第119页 |
| 2.2.3 对培养液中主要含氮物质组分的影响 | 第119-120页 |
| 2.2.4 瘤胃内环境总氮与瘤胃内环境中各主要形式氮之间周转速率动态变化的相关性分析 | 第120-121页 |
| 2.3 不同单体氨基酸对微生物活性的影响 | 第121-123页 |
| 2.3.1 对原虫胞内蛋白酶活性的影响 | 第121页 |
| 2.3.2 对主要纤维酶活性的影响 | 第121-123页 |
| 2.4 不同单体氨基酸对微生物区系的影响 | 第123-125页 |
| 2.4.1 对微生物区系比例的影响 | 第123页 |
| 2.4.2 PCR-SSCP分析 | 第123-125页 |
| 2.4.2.1 PCR扩增结果 | 第123-124页 |
| 2.4.2.2 SSCP多态性分析 | 第124-125页 |
| 2.5 三种重要蛋白降解菌的定量分析 | 第125-126页 |
| 3 讨论 | 第126-130页 |
| 3.1 不同单体氨基酸对瘤胃瘤胃内环境发酵参数的影响 | 第126-128页 |
| 3.1.1 对pH值的影响 | 第126-127页 |
| 3.1.2 对氨氮浓度的影响 | 第127页 |
| 3.1.3 对培养液VFA浓度的影响 | 第127-128页 |
| 3.2 不同单体氨基酸对微生物氮素周转的影响 | 第128页 |
| 3.3 不同单体氨基酸对瘤胃内环境氮素周转的影响 | 第128-129页 |
| 3.4 不同单体氨基酸对微生物活性的影响 | 第129页 |
| 3.5 不同单体氨基酸对主要蛋白降解菌的影响 | 第129-130页 |
| 4 小结 | 第130-131页 |
| 第六章 不同原虫控制剂对瘤胃微生物氮周转作用的影响 | 第131-144页 |
| 引言 | 第131页 |
| 1 材料与方法 | 第131页 |
| 1.1 试验设计 | 第131页 |
| 1.2 测定指标与方法 | 第131页 |
| 2 结果与分析 | 第131-140页 |
| 2.1 不同原虫控制剂对发酵参数的影响 | 第131-133页 |
| 2.2 不同原虫控制剂对原虫与细菌之间氮素周转的影响 | 第133-138页 |
| 2.2.1 对微生物蛋白含量的影响 | 第133-134页 |
| 2.2.2 对微生物氮素周转的影响 | 第134-137页 |
| 2.2.2.1 对细菌氮、原虫氮及微生物总氮周转速率的影响 | 第134页 |
| 2.2.2.2 对原虫吞噬细菌量和吞噬速率的影响 | 第134-135页 |
| 2.2.2.3 对原虫与细菌之间氮素周转的影响 | 第135-136页 |
| 2.2.2.4 细菌氮、原虫氮及微生物总氮之间氮周转速率的相关性分析 | 第136-137页 |
| 2.2.3 对培养液中主要含氮物质组分的影响 | 第137-138页 |
| 2.2.4 瘤胃内环境总氮与瘤胃内环境中各主要形式氮之间周转速率动态变化的相关性分析 | 第138页 |
| 2.3 不同原虫控制剂对微生物区系的影响 | 第138-139页 |
| 2.3.1 对微生物区系比例的影响 | 第138-139页 |
| 2.3.2 PCR-SSCP分析 | 第139页 |
| 2.4 三种重要蛋白降解菌的定量分析 | 第139-140页 |
| 3 讨论 | 第140-142页 |
| 3.1 不同原虫控制剂对瘤胃发酵参数的影响 | 第141页 |
| 3.1.1 对pH值的影响 | 第141页 |
| 3.1.2 对培养液氨氮浓度的影响 | 第141页 |
| 3.2 不同原虫控制剂对微生物氮素周转的影响 | 第141-142页 |
| 3.3 对瘤胃内环境氮素周转的影响 | 第142页 |
| 3.4 对主要蛋白降解菌的影响 | 第142页 |
| 4 小结 | 第142-144页 |
| 全文总论与研究展望 | 第144-152页 |
| 1 全文讨论 | 第144-150页 |
| 1.1 瘤胃原虫与细菌之间氮素周转研究方法探讨 | 第144-146页 |
| 1.1.1 瘤胃原虫与细菌之间氮素周转研究方法的建立 | 第144-145页 |
| 1.1.2 吞噬试验中瘤胃微生态的模拟 | 第145-146页 |
| 1.2 瘤胃原虫与细菌之间氮素循环的规律 | 第146-148页 |
| 1.3 瘤胃内环境氮素周转与微生物氮素周转的关系 | 第148页 |
| 1.4 瘤胃微生物种群结构与微生物氮素周转的关系 | 第148-149页 |
| 1.5 瘤胃原虫与细菌之间氮素周转的影响机制 | 第149-150页 |
| 2 全文结论 | 第150页 |
| 3 研究创新点 | 第150页 |
| 4 研究展望 | 第150-152页 |
| 参考文献 | 第152-163页 |
| 致谢 | 第163-164页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第164-165页 |
