摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一部分 文献综述 | 第11-26页 |
第一章 水稻白叶枯病及其致病性的相关研究 | 第11-15页 |
1 Xoo概述 | 第11-12页 |
2 Xoo与水稻的互作 | 第12-13页 |
3 水稻抗白叶枯病基因的鉴定 | 第13-15页 |
第二章 小热激蛋白在植物抗逆中的作用 | 第15-19页 |
1 热激蛋白的发现及分类 | 第15页 |
2 小热激蛋白的研究进展 | 第15-19页 |
2.1 胁迫条件下sHSPs的表达 | 第16-17页 |
2.2 非胁迫条件下sHSPs的表达 | 第17页 |
2.3 sHSPs的分子伴侣活性 | 第17-19页 |
第三章 病程相关蛋白的研究进展 | 第19-22页 |
1 病程相关蛋白的发现与分类 | 第19-20页 |
2 病程相关蛋白的特性与功能 | 第20-22页 |
第四章 热激因子的研究进展 | 第22-24页 |
1 Hsfs的结构特点 | 第22页 |
2 植物Hsfs在热胁迫下的作用 | 第22-23页 |
3 植物Hsfs在其他非生物胁迫中的作用 | 第23-24页 |
第五章 本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
技术路线 | 第25-26页 |
第二部分 研究论文 | 第26-79页 |
第一章 OssHSP17.5基因的表达分析及其分子伴侣活性检测 | 第26-46页 |
1 前言 | 第26页 |
2 材料与试剂 | 第26-27页 |
2.1 材料与菌种 | 第26页 |
2.2 相关的生物学试剂及溶液配制 | 第26-27页 |
2.3 菌株和载体 | 第27页 |
3 实验技术 | 第27-39页 |
3.1 菌种的活化与接种 | 第27页 |
3.2 RNA的提取与一链cDNA的合成 | 第27-29页 |
3.3 实时定量PCR引物的设计与验证 | 第29-31页 |
3.4 实时荧光定量PCR | 第31-32页 |
3.5 OssHSP17.5-pSKB.4原核表达载体的构建 | 第32-34页 |
3.6 表达载体OssHSP17.5-pSKB.4的转化和鉴定 | 第34-35页 |
3.7 重组质粒OssHSP17.5-pSKB.4的诱导表达与纯化 | 第35-37页 |
3.8 SDS-PAGE检测 | 第37-39页 |
3.9 OssHSP17.5分子伴侣活性的测定 | 第39页 |
3.10 OssHSP17.5对大肠杆菌耐热性的影响 | 第39页 |
4 实验结果与分析 | 第39-45页 |
4.1 接种及非生物胁迫下OssHSP17.5的表达 | 第39-41页 |
4.2 原核表达载体的构建 | 第41-42页 |
4.3 OssHSP17.5蛋白的纯化及分子伴侣活性检测 | 第42-44页 |
4.4 OssHSP17.5对大肠杆菌的耐热性影响 | 第44-45页 |
5 讨论 | 第45-46页 |
第二章 OssHSP17.5表达载体的构建及水稻转基因 | 第46-64页 |
1 前言 | 第46页 |
2 材料与方法 | 第46-60页 |
2.1 受体水稻 | 第46页 |
2.2 试剂与菌株 | 第46-47页 |
2.3 转基因用培养基 | 第47-48页 |
2.4 超表达载体的构建 | 第48-51页 |
2.5 OssHSP17.5沉默载体的构建 | 第51-57页 |
2.6 载体转化农杆菌 | 第57页 |
2.7 水稻转基因 | 第57-59页 |
2.8 转基因苗的验证 | 第59-60页 |
3 实验结果与讨论 | 第60-64页 |
3.1 超表达载体的PCR和酶切验证 | 第60-61页 |
3.2 沉默载体的PCR和酶切验证 | 第61-62页 |
3.3 水稻转基因过程 | 第62页 |
3.4 转基因植株的验证 | 第62-64页 |
第三章 OssHSP17.5转基因植株的抗逆性分析 | 第64-72页 |
1 前言 | 第64页 |
2 材料与试剂 | 第64页 |
2.1 材料与菌株 | 第64页 |
2.2 试剂 | 第64页 |
3 实验方法 | 第64-66页 |
3.1 白叶枯菌的活化 | 第64页 |
3.2 接种白叶枯病菌 | 第64-65页 |
3.3 水稻叶片接种白叶枯病菌后病菌含量测定 | 第65页 |
3.4 病程相关蛋白的表达分析 | 第65-66页 |
4 转基因植株的抗逆性分析 | 第66页 |
4.1 水稻的培养 | 第66页 |
4.2 胁迫处理 | 第66页 |
5 结果与分析 | 第66-72页 |
5.1 抗病性 | 第66-68页 |
5.2 病程相关蛋白基因的表达 | 第68-70页 |
5.3 其他胁迫处理 | 第70-72页 |
第四章 OsHsfs在抗感病品种中的定量分析 | 第72-79页 |
1 前言 | 第72页 |
2 材料与试剂 | 第72页 |
3 实验技术 | 第72-76页 |
3.1 菌种的活化与接种 | 第72-73页 |
3.2 RNA的提取与一链的合成 | 第73页 |
3.3 定量引物的设计与验证 | 第73-75页 |
3.4 实时荧光定量PCR | 第75-76页 |
4 结果与分析 | 第76-79页 |
参考文献 | 第79-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第90-91页 |