| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一部分：LAPF抑制TLR触发巨噬细胞产生TNF-α及其机制研究 | 第11-30页 |
| 一、引言 | 第11-12页 |
| 二、材料和方法 | 第12-20页 |
| 1. 实验材料 | 第12-13页 |
| 1.1 实验动物 | 第12页 |
| 1.2 细胞系 | 第12页 |
| 1.3 主要试剂和抗体 | 第12-13页 |
| 1.4 载体和分子克隆 | 第13页 |
| 1.5 主要设备和软件 | 第13页 |
| 2. 实验方法 | 第13-20页 |
| 2.1 小鼠内毒素休克模型 | 第13页 |
| 2.2 LAPF条件敲除小鼠的鉴定和培育 | 第13-14页 |
| 2.3 小鼠腹腔来源巨噬细胞的分离和培养 | 第14-15页 |
| 2.4 真核表达质粒构建实验 | 第15页 |
| 2.5 真核细胞DNA质粒转染 | 第15-16页 |
| 2.6 制备全细胞裂解液、SDS-PAGE及Western blot实验 | 第16页 |
| 2.7 免疫共沉淀及质谱分析 | 第16-17页 |
| 2.8 细胞总RNA的提取及反转录PCR | 第17页 |
| 2.9 酶联免疫吸附试验ELISA | 第17-18页 |
| 2.10 荧光定量PCR | 第18-19页 |
| 2.11 实验结果的统计学分析 | 第19-20页 |
| 三、实验结果 | 第20-27页 |
| 1. 巨噬细胞特异性敲除LAPF的小鼠炎症反应增强并伴随TNF-α产量增加 | 第20-21页 |
| 2. TLR触发的LAPF缺失巨噬细胞炎症反应增强 | 第21-24页 |
| 3. LAPF结合转运蛋白TIRAP | 第24-25页 |
| 4. LAPF与Myd88相互作用 | 第25-27页 |
| 四、讨论 | 第27-29页 |
| 五、结论 | 第29页 |
| 主要特色和创新点 | 第29页 |
| 还需要解决的问题 | 第29-30页 |
| 第二部分：CDllb-Src信号促进M2型巨噬细胞产生及其机制研究 | 第30-69页 |
| 一、引言 | 第30-32页 |
| 二、材料和方法 | 第32-36页 |
| 1. 实验材料 | 第32页 |
| 1.1 实验动物 | 第32页 |
| 1.2 细胞系 | 第32页 |
| 1.3 主要试剂和抗体 | 第32页 |
| 1.4 载体和分子克隆 | 第32页 |
| 1.5 主要设备和软件 | 第32页 |
| 2. 实验方法 | 第32-36页 |
| 2.1 DSS诱导的肠炎模型 | 第32-33页 |
| 2.2 Dasatinib体内实验 | 第33页 |
| 2.3 体内分离结肠的固有层单核细胞 | 第33页 |
| 2.3 小鼠骨髓来源的巨噬细胞BMDM的诱导和培养 | 第33页 |
| 2.4 BMDM诱导为M1和M2型巨噬细胞 | 第33页 |
| 2.5 细胞浆和细胞核分离 | 第33-34页 |
| 2.6 itgam缺陷小鼠的鉴定和培育 | 第34页 |
| 2.7 真核质粒表达构建 | 第34-35页 |
| 2.8 荧光定量PCR | 第35页 |
| 2.9 实验结果的统计学分析 | 第35-36页 |
| 三、实验结果 | 第36-63页 |
| 1. CD11b-Src促进DSS诱导的肠炎中M2型巨噬细胞产生 | 第36-44页 |
| 1.1 CD11b缺陷小鼠DSS诱导肠炎更严重并伴随TNF-α产生增多和IL-10 产生减少 | 第36-38页 |
| 1.2 Src抑制剂Dasatinib体内处理的小鼠DSS诱导的肠炎更为严重并伴随M1型巨噬细胞标增加和M2型巨噬细胞减少 | 第38-44页 |
| 2. CD11b-Src促进巨噬细胞向M2型分化及其机制研究 | 第44-51页 |
| 2.1 CDllb缺陷小鼠骨髓巨噬细胞诱导的M1型巨噬细胞表型增强而M | 第44-45页 |
| 2.2 Src抑制剂增强M1型巨噬细胞表型而抑制M2型巨噬细胞表型形成 | 第45-47页 |
| 2.3 过表达Src能够抑制iNOS mRNA表达而促进Arg-1 mRNA表达 | 第47-48页 |
| 2.4 Src调控M1和M2型巨噬细胞产生的信号通路分析 | 第48-50页 |
| 2.5 过表达STAT6逆转Src抑制剂对Arg1 mRNA的抑制作用而过表达组成型活化的Akt无此效应 | 第50页 |
| 2.6 过表达Src促进IL-4介导的STAT6活化并与STAT6相互作用 | 第50-51页 |
| 3. CD11b-Src促进TLR信号刺激下巨噬细胞IL-10产生及其机制研究 | 第51-61页 |
| 3.1 TLR触发CD11b缺陷巨噬细胞产生IL-10减少 | 第51-53页 |
| 3.2 CD11b缺陷巨噬细胞TLR4信号转导改变 | 第53-54页 |
| 3.3 Src抑制剂和Akt抑制剂均能抑制TLR信号诱导的IL-10释放 | 第54-55页 |
| 3.4 Src通过促进Akt活化而促进LPS诱导的IL-10产生 | 第55-57页 |
| 3.5 CD11b缺陷巨噬细胞LPS诱导的c-Jun活化减少 | 第57-58页 |
| 3.6 Src和Akt能够通过GSK3正向调控LPS诱导的c-Jun活化 | 第58页 |
| 3.7 CD11b-Src能够促进PI3K中p85的蛋白降解 | 第58-61页 |
| 4. Src促进TLR介导的STAT6活化 | 第61-63页 |
| 四、讨论 | 第63-67页 |
| 五、结论 | 第67-68页 |
| 本课题的创新点 | 第68页 |
| 还需要解决的问题 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 缩略词表 | 第78-80页 |
| 文献综述：Src家族蛋白和天然免疫中的促炎-抗炎平衡 | 第80-94页 |
| 参考文献 | 第87-94页 |
| 攻读博士期间发表和待发表的文章 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-97页 |
