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基于CD7纳米抗体的新型免疫毒素对人白血病细胞在体外和体内的活性研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
一、引言第14-22页
二、材料和方法第22-63页
    1. 材料第22-32页
        1.1. 主要仪器第22-24页
        1.2. 主要试剂第24-26页
        1.3. 常用缓冲液及相关试剂配制第26-30页
        1.4. 主要载体、宿主菌与辅助噬菌体第30-31页
        1.5. 主要细胞系第31页
        1.6. 骆驼及其外周血样标本第31-32页
        1.7. 白血病病人样本第32页
    2. 方法第32-63页
        2.1. 骆驼免疫、外周血淋巴细胞的分离和血清的分离第32-33页
        2.2. 骆驼血清细胞抗原封闭实验第33-34页
        2.3. 骆驼外周血淋巴细胞总RNA提取第34页
        2.4. cDNA第一链的合成第34-35页
        2.5. 从cDNA第一链中扩增纳米抗体基因片段第35-37页
        2.6. 纳米抗体基因重组载体的构建第37-39页
        2.7. 纳米抗体噬菌体抗体库的构建第39-42页
        2.8. CD7特异性纳米抗体筛选第42-47页
        2.9. CD7特异性纳米抗体鉴定第47-55页
        2.10. 纳米抗体免疫毒素的基因合成及原核表达载体的构建第55-58页
        2.11. 纳米抗体免疫毒素PG001和PG002的鉴定第58-59页
        2.12. PG001和PG002免疫毒素体外杀伤活性检测第59-60页
        2.13. PG001 和 PG002 在体外对 T-ALL 和 AML 病人外周血淋巴细胞的活性检测第60-61页
        2.14. PG001 和 PG002 免疫毒素体内抗白血病活性研究第61-62页
        2.15. 统计分析第62-63页
三、结果第63-87页
    1. 纳米抗体噬菌体库的构建与筛选第63-69页
        1.1. 纳米抗体噬菌体库的构建与鉴定第63-65页
        1.2. 293T-CD7稳转细胞株的构建第65-68页
        1.3. CD7纳米抗体的筛选第68-69页
    2. CD7纳米抗体的原核表达与分析第69-73页
        2.1. CD7纳米抗体的亚克隆、原核表达及亲和力测定第69-71页
        2.2. 纳米抗体VHH6的特异性分析第71-73页
    3. 纳米抗体免疫的毒素的构建与活性分析第73-84页
        3.1. 单价纳米抗体免疫毒素的构建与鉴定第73-76页
        3.2. 纳米抗体免疫毒素PG001的毒理效应第76-79页
        3.3. 纳米抗体免疫毒素PG002的构建与体外活性鉴定第79-83页
        3.4. PG001和PG002有效地诱导人急性白血病原代细胞凋亡第83-84页
    4. PG001和PG002在NOD/SCID小鼠体内抗CEM白血病细胞活性研究第84-87页
四、讨论第87-91页
五、结论第91-94页
六、参考文献第94-107页
综述 纳米抗体在靶向肿瘤治疗中的研究进展第107-136页
    引言第107-108页
    1. 纳米抗体的结构特征与理化性质第108-111页
    2. 纳米抗体制备第111-113页
    3. 纳米抗体作为靶向因子在肿瘤治疗中的应用第113-121页
        3.1. 纳米抗体作为癌症治疗的拮抗药研究第114-117页
        3.2. 纳米抗体作为靶向携带效应分子治疗肿瘤第117-119页
        3.3. 纳米抗体作为载体在药物递送系统中的研究第119-121页
        3.4. 双特异性纳米抗体和嵌合抗原受体修饰T细胞在肿瘤治疗中的应用第121页
    结语第121-122页
    参考文献第122-136页
攻读学位期间本人公开发表的论文、专利第136-138页
中英文主要缩略词表第138-139页
致谢第139-141页

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