中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
一、引言 | 第14-22页 |
二、材料和方法 | 第22-63页 |
1. 材料 | 第22-32页 |
1.1. 主要仪器 | 第22-24页 |
1.2. 主要试剂 | 第24-26页 |
1.3. 常用缓冲液及相关试剂配制 | 第26-30页 |
1.4. 主要载体、宿主菌与辅助噬菌体 | 第30-31页 |
1.5. 主要细胞系 | 第31页 |
1.6. 骆驼及其外周血样标本 | 第31-32页 |
1.7. 白血病病人样本 | 第32页 |
2. 方法 | 第32-63页 |
2.1. 骆驼免疫、外周血淋巴细胞的分离和血清的分离 | 第32-33页 |
2.2. 骆驼血清细胞抗原封闭实验 | 第33-34页 |
2.3. 骆驼外周血淋巴细胞总RNA提取 | 第34页 |
2.4. cDNA第一链的合成 | 第34-35页 |
2.5. 从cDNA第一链中扩增纳米抗体基因片段 | 第35-37页 |
2.6. 纳米抗体基因重组载体的构建 | 第37-39页 |
2.7. 纳米抗体噬菌体抗体库的构建 | 第39-42页 |
2.8. CD7特异性纳米抗体筛选 | 第42-47页 |
2.9. CD7特异性纳米抗体鉴定 | 第47-55页 |
2.10. 纳米抗体免疫毒素的基因合成及原核表达载体的构建 | 第55-58页 |
2.11. 纳米抗体免疫毒素PG001和PG002的鉴定 | 第58-59页 |
2.12. PG001和PG002免疫毒素体外杀伤活性检测 | 第59-60页 |
2.13. PG001 和 PG002 在体外对 T-ALL 和 AML 病人外周血淋巴细胞的活性检测 | 第60-61页 |
2.14. PG001 和 PG002 免疫毒素体内抗白血病活性研究 | 第61-62页 |
2.15. 统计分析 | 第62-63页 |
三、结果 | 第63-87页 |
1. 纳米抗体噬菌体库的构建与筛选 | 第63-69页 |
1.1. 纳米抗体噬菌体库的构建与鉴定 | 第63-65页 |
1.2. 293T-CD7稳转细胞株的构建 | 第65-68页 |
1.3. CD7纳米抗体的筛选 | 第68-69页 |
2. CD7纳米抗体的原核表达与分析 | 第69-73页 |
2.1. CD7纳米抗体的亚克隆、原核表达及亲和力测定 | 第69-71页 |
2.2. 纳米抗体VHH6的特异性分析 | 第71-73页 |
3. 纳米抗体免疫的毒素的构建与活性分析 | 第73-84页 |
3.1. 单价纳米抗体免疫毒素的构建与鉴定 | 第73-76页 |
3.2. 纳米抗体免疫毒素PG001的毒理效应 | 第76-79页 |
3.3. 纳米抗体免疫毒素PG002的构建与体外活性鉴定 | 第79-83页 |
3.4. PG001和PG002有效地诱导人急性白血病原代细胞凋亡 | 第83-84页 |
4. PG001和PG002在NOD/SCID小鼠体内抗CEM白血病细胞活性研究 | 第84-87页 |
四、讨论 | 第87-91页 |
五、结论 | 第91-94页 |
六、参考文献 | 第94-107页 |
综述 纳米抗体在靶向肿瘤治疗中的研究进展 | 第107-136页 |
引言 | 第107-108页 |
1. 纳米抗体的结构特征与理化性质 | 第108-111页 |
2. 纳米抗体制备 | 第111-113页 |
3. 纳米抗体作为靶向因子在肿瘤治疗中的应用 | 第113-121页 |
3.1. 纳米抗体作为癌症治疗的拮抗药研究 | 第114-117页 |
3.2. 纳米抗体作为靶向携带效应分子治疗肿瘤 | 第117-119页 |
3.3. 纳米抗体作为载体在药物递送系统中的研究 | 第119-121页 |
3.4. 双特异性纳米抗体和嵌合抗原受体修饰T细胞在肿瘤治疗中的应用 | 第121页 |
结语 | 第121-122页 |
参考文献 | 第122-136页 |
攻读学位期间本人公开发表的论文、专利 | 第136-138页 |
中英文主要缩略词表 | 第138-139页 |
致谢 | 第139-141页 |