| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 英文缩写及全文和中文对照表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一部分 miRNA-21在人增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞中的表达变化 | 第15-31页 |
| 材料与方法 | 第16-24页 |
| 1 样本来源 | 第16页 |
| 2 实验试剂与仪器 | 第16-19页 |
| 2.1 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.2 主要仪器设备与耗材 | 第17-19页 |
| 3 实验方法 | 第19-23页 |
| 3.1 体外培养人增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞： | 第19-20页 |
| 3.2 免疫细胞化学法鉴定 | 第20页 |
| 3.3 免疫细胞化学染色检测成纤维细胞中的TGF-β1、Smad7、PDCD4、ColⅠ、ColⅢ表达 | 第20-21页 |
| 3.4 实时荧光定量PCR检测 | 第21-23页 |
| 4 统计学方法 | 第23-24页 |
| 结果 | 第24-31页 |
| 1 形态学观察 | 第24页 |
| 2 两组细胞的鉴定 | 第24-25页 |
| 3 RNA质量检测 | 第25-26页 |
| 4 RT-qPCR基因扩增结果 | 第26-28页 |
| 4.1 miRNA-21基因扩增结果 | 第26-27页 |
| 4.2 PDCD4基因扩增结果 | 第27-28页 |
| 5 免疫细胞化学染色检测两组细胞中PDCD4、TGF－β1、Smad7、Col-I、Col-III胶原的表达 | 第28-31页 |
| 5.1 PDCD4免疫细胞化学染色结果 | 第28页 |
| 5.2 TGF-β1、Smad7免疫细胞化学染色结果 | 第28-31页 |
| 第二部分 miRNA-21转染对人增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β/Smad信号通路和胶原表达的影响 | 第31-60页 |
| 材料与方法 | 第32-48页 |
| 1 样本来源 | 第32页 |
| 2 实验试剂与仪器 | 第32-35页 |
| 2.1 主要试剂 | 第32-33页 |
| 2.2 主要仪器设备与耗材 | 第33-35页 |
| 3 实验方法 | 第35-47页 |
| 3.1 体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞 | 第35页 |
| 3.2 人miRNA-21模拟物对人增生性瘢痕成纤维细胞的瞬时转染 | 第35-37页 |
| 3.3 实时荧光定量PCR检测 | 第37-41页 |
| 3.4 蛋白质印迹法检测 | 第41-47页 |
| 4 统计学方法 | 第47-48页 |
| 结果 | 第48-60页 |
| 1 miRNA-21模拟物转染及转染效率的测定 | 第48-49页 |
| 2 RNA质量检测 | 第49-50页 |
| 3 RT-qPCR基因扩增结果 | 第50-56页 |
| 3.1 miRNA-21基因扩增结果 | 第50-51页 |
| 3.2 PDCD4基因扩增结果 | 第51-52页 |
| 3.3 TGF-β1、Smad7基因扩增结果 | 第52-54页 |
| 3.4 ColⅠ、ColⅢ基因扩增结果 | 第54-56页 |
| 4 蛋白印迹法检测结果 | 第56-60页 |
| 4.1 蛋白印迹法检测PDCD4的蛋白表达结果 | 第56-57页 |
| 4.2 蛋白印迹法检测TGF-β1、Smad7的蛋白表达结果 | 第57-58页 |
| 4.3 蛋白印迹法检测ColⅠ、ColⅢ的蛋白表达结果 | 第58-60页 |
| 第三部分 miRNA-21下调抑制人增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β/Smad和胶原表达 | 第60-89页 |
| 材料与方法 | 第61-77页 |
| 1 样本来源 | 第61页 |
| 2 实验试剂与仪器 | 第61-64页 |
| 2.1 主要试剂 | 第61-62页 |
| 2.2 主要仪器设备与耗材 | 第62-64页 |
| 3 实验方法 | 第64-76页 |
| 3.1 体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞 | 第64页 |
| 3.2 人miRNA-21抑制物对人增生性瘢痕成纤维细胞的瞬时转染 | 第64-76页 |
| 4 统计学方法 | 第76-77页 |
| 结果 | 第77-89页 |
| 1 miRNA-21抑制物转染效率 | 第77-78页 |
| 2 RNA质量检测 | 第78-79页 |
| 3 RT-qPCR基因扩增结果 | 第79-85页 |
| 3.1 miRNA-21基因扩增结果 | 第79-80页 |
| 3.2 PDCD4基因扩增结果 | 第80-81页 |
| 3.3 TGF-β1、Smad7基因扩增结果 | 第81-83页 |
| 3.4 ColⅠ、ColⅢ基因扩增结果 | 第83-85页 |
| 4 蛋白印迹法检测结果 | 第85-89页 |
| 4.1 蛋白印迹法检测PDCD4的蛋白表达结果 | 第85-86页 |
| 4.2 蛋白印迹法检测TGF-β1、Smad7的蛋白表达结果 | 第86-87页 |
| 4.3 蛋白印迹法检测ColⅠ、ColⅢ的蛋白表达结果 | 第87-89页 |
| 讨论 | 第89-94页 |
| 结论 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-103页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第103-104页 |
| 综述 | 第104-110页 |
| 参考文献 | 第108-110页 |
