| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-27页 |
| 1.1 甜菜素的概述 | 第10-18页 |
| 1.1.1 植物色素与甜菜素 | 第10-14页 |
| 1.1.2 甜菜素的分类 | 第14-15页 |
| 1.1.3 甜菜素的理化性质 | 第15-17页 |
| 1.1.4 甜菜素的功能 | 第17页 |
| 1.1.5 甜菜素的应用 | 第17-18页 |
| 1.2 植物中甜菜素的生物合成途径及关键酶的功能研究 | 第18-22页 |
| 1.3 酪氨酸酶概述 | 第22-25页 |
| 1.3.1 酪氨酸酶的结构以及与甜菜素合成的关系 | 第22-23页 |
| 1.3.2 酪氨酸酶的活性 | 第23-24页 |
| 1.3.3 多酚氧化酶在细胞中的定位 | 第24-25页 |
| 1.3.4 多酚氧化酶和酪氨酸酶基因的克隆及特点 | 第25页 |
| 1.4 酪氨酸酶的应用 | 第25-26页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第27-54页 |
| 2.1 材料及仪器设备 | 第27-28页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第27页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要实验仪器及设备 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-52页 |
| 2.2.1 常用培养基及溶液的配制 | 第28-31页 |
| 2.2.2 植物材料的培养条件 | 第31页 |
| 2.2.3 DNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.2.4 RNA的提取纯化、反转录及定量Real-time PCR(qRT-PCR) | 第32-34页 |
| 2.2.5 基因全长cDNA克隆 | 第34-35页 |
| 2.2.6 载体的构建及转化 | 第35-39页 |
| 2.2.7 转基因材料的获得 | 第39-41页 |
| 2.2.8 植物瞬时转化方法 | 第41-42页 |
| 2.2.9 Southern blot | 第42-45页 |
| 2.2.10 外源蛋白表达、SDS-PAGE及Western blot | 第45-49页 |
| 2.2.11 植物酪氨酸酶体内及体外酶活检测 | 第49-51页 |
| 2.2.12 甜菜素的提取与测定 | 第51-52页 |
| 2.3 实验中用到的引物序列 | 第52-54页 |
| 第三章 结果与分析 | 第54-75页 |
| 3.1 红柄甜菜酪氨酸酶基因BvcTYR序列的验证和原核表达 | 第54-57页 |
| 3.1.1 红柄甜菜酪氨酸酶基因BvcTYR基因序列的验证 | 第54页 |
| 3.1.2 氨基酸序列比对及进化树分析 | 第54-56页 |
| 3.1.3 原核表达BvcTYR | 第56-57页 |
| 3.2 BvcTYR的亚细胞定位 | 第57-60页 |
| 3.2.1 BvcTYR与GFP共表达载体的构建 | 第58页 |
| 3.2.2 BvcTYR的亚细胞定位 | 第58-60页 |
| 3.3 红柄甜菜基因组的Southern杂交分析 | 第60-61页 |
| 3.4 红柄甜菜BvcTYR组织表达检测及酶活分析 | 第61-63页 |
| 3.4.1 转录水平分析BvcTYR的表达 | 第61页 |
| 3.4.2 红柄甜菜不同组织中酪氨酸酶单酚和双酚酶活性分析 | 第61-62页 |
| 3.4.3 红柄甜菜不同组织中甜菜素含量分析 | 第62-63页 |
| 3.5 酪氨酸酶反应产物的光谱分析及pH值对甜菜素的影响 | 第63-65页 |
| 3.5.1 酪氨酸酶反应产物的光谱分析 | 第63-64页 |
| 3.5.2 pH值影响甜菜素稳定性 | 第64-65页 |
| 3.6 BvcTYR在烟草中的异源表达 | 第65-70页 |
| 3.6.1 35S：BvcTYR超表达烟草的获得 | 第65-66页 |
| 3.6.2 35S：BvcTYR烟草的Southern杂交分析 | 第66页 |
| 3.6.3 35S：BvcTYR烟草的Western blot分析 | 第66-67页 |
| 3.6.4 35S：BvcTYR超表达烟草的酶活性分析 | 第67-70页 |
| 3.7 BvcTYR RNAi烟草的表达分析 | 第70-72页 |
| 3.7.1 干扰空载体启动子的改造 | 第70-71页 |
| 3.7.2 BvcTYR RNAi烟草的表达分析 | 第71-72页 |
| 3.8 BvcTYR的同源超表达及RNA干扰 | 第72-75页 |
| 3.8.1 35S：BvcTYR在青杆甜菜的超表达 | 第72页 |
| 3.8.2 红柄甜菜BvcTYR的RNA干扰 | 第72-75页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第75-79页 |
| 4.1 讨论 | 第75-78页 |
| 4.1.1 BvcTYR与甜菜素代谢植物PPOs相关性的探讨 | 第75页 |
| 4.1.2 BvcTYR与甜菜素合成相关的生化证据 | 第75-76页 |
| 4.1.3 BvcTYR与甜菜素合成相关的分子方面的证据 | 第76页 |
| 4.1.4 BvcTYR超表达烟草创伤诱导红色素的产生 | 第76-77页 |
| 4.1.5 探讨BvcTYR在青杆甜菜超表达 | 第77页 |
| 4.1.6 甜菜素合成酶的亚细胞定位及功能分析 | 第77-78页 |
| 4.2 结论 | 第78页 |
| 4.3 展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-92页 |
| 附录Ⅰ 化学诱导型转EPSPS小麦的获得及功能验证 | 第92-106页 |
| 第一章 引言 | 第92-95页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第95-98页 |
| 第三章 结果与分析 | 第98-104页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-106页 |
| 附录Ⅱ | 第106-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 作者简介 | 第112页 |
