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山羊△FosB基因干扰重组腺病毒的制备与鉴定

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 文献综述第11-26页
   ·ΔFosB 基因的研究进展第11-14页
     ·ΔFosB 基因的形成及结构第11-12页
     ·ΔFosB 基因的功能第12-14页
   ·RNA 干扰的研究进展第14-22页
     ·RNA 干扰的发现第14-15页
     ·RNA 干扰的特征第15-16页
     ·RNA 干扰的作用机制第16-18页
     ·RNAi 常用的实验方法第18-20页
     ·siRNA 的设计方法第20-22页
   ·腺病毒载体的研究进展第22-25页
     ·腺病毒的结构第22-23页
     ·腺病毒载体的优点第23-24页
     ·腺病毒载体的发展及分类第24-25页
   ·本研究的目的及意义第25-26页
第二章 山羊ΔFosB 基因shRNA 干扰腺病毒载体的构建与鉴定第26-44页
   ·材料与方法第26-38页
     ·主要仪器设备第26页
     ·试验材料第26-27页
     ·靶向山羊ΔFosB 基因的shRNA 干扰序列的设计与合成第27-28页
     ·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 重组载体的构建第28-32页
     ·shRNA 有效序列的筛选第32-37页
     ·pAD/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA 重组腺病毒载体的构建及鉴定第37-38页
   ·结果与分析第38-41页
     ·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 载体的构建第38-39页
     ·shRNA 序列干扰性能的测定第39-40页
     ·pAD/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA 重组腺病毒载体的构建第40-41页
   ·讨论第41-44页
     ·shRNA 序列的设计与筛选第41-42页
     ·BLOCK-iTTM shRNA 腺病毒干扰系统第42-44页
第三章 山羊ΔFosB 基因shRNA 干扰腺病毒的制备与效率检测第44-60页
   ·材料与方法第44-53页
     ·主要仪器设备第44页
     ·试验材料第44-45页
     ·腺病毒的包装与扩增第45-46页
     ·腺病毒的滴度测定第46-47页
     ·山羊乳腺上皮细胞的培养第47-48页
     ·最佳感染浓度的测定第48页
     ·AD-ΔFosB-572 腺病毒干扰效果的检测第48-53页
   ·结果与分析第53-57页
     ·腺病毒的包装与扩增第53-54页
     ·腺病毒的滴度测定第54页
     ·山羊乳腺上皮细胞的培养第54-55页
     ·最佳感染浓度的测定第55页
     ·AD-ΔFosB-572 腺病毒干扰效果的Western Blotting 检测第55-56页
     ·AD-ΔFosB-572 腺病毒干扰效率的Real-time Quantitative PCR 检测第56-57页
   ·讨论第57-60页
     ·关于腺病毒滴度的测定第57-58页
     ·关于Real-time Quantitative PCR 引物的设计第58-59页
     ·关于干扰效率的分析第59-60页
结论第60-61页
参考文献第61-68页
致谢第68-69页
作者简介第69页

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