摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-26页 |
·ΔFosB 基因的研究进展 | 第11-14页 |
·ΔFosB 基因的形成及结构 | 第11-12页 |
·ΔFosB 基因的功能 | 第12-14页 |
·RNA 干扰的研究进展 | 第14-22页 |
·RNA 干扰的发现 | 第14-15页 |
·RNA 干扰的特征 | 第15-16页 |
·RNA 干扰的作用机制 | 第16-18页 |
·RNAi 常用的实验方法 | 第18-20页 |
·siRNA 的设计方法 | 第20-22页 |
·腺病毒载体的研究进展 | 第22-25页 |
·腺病毒的结构 | 第22-23页 |
·腺病毒载体的优点 | 第23-24页 |
·腺病毒载体的发展及分类 | 第24-25页 |
·本研究的目的及意义 | 第25-26页 |
第二章 山羊ΔFosB 基因shRNA 干扰腺病毒载体的构建与鉴定 | 第26-44页 |
·材料与方法 | 第26-38页 |
·主要仪器设备 | 第26页 |
·试验材料 | 第26-27页 |
·靶向山羊ΔFosB 基因的shRNA 干扰序列的设计与合成 | 第27-28页 |
·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 重组载体的构建 | 第28-32页 |
·shRNA 有效序列的筛选 | 第32-37页 |
·pAD/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA 重组腺病毒载体的构建及鉴定 | 第37-38页 |
·结果与分析 | 第38-41页 |
·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 载体的构建 | 第38-39页 |
·shRNA 序列干扰性能的测定 | 第39-40页 |
·pAD/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA 重组腺病毒载体的构建 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-44页 |
·shRNA 序列的设计与筛选 | 第41-42页 |
·BLOCK-iTTM shRNA 腺病毒干扰系统 | 第42-44页 |
第三章 山羊ΔFosB 基因shRNA 干扰腺病毒的制备与效率检测 | 第44-60页 |
·材料与方法 | 第44-53页 |
·主要仪器设备 | 第44页 |
·试验材料 | 第44-45页 |
·腺病毒的包装与扩增 | 第45-46页 |
·腺病毒的滴度测定 | 第46-47页 |
·山羊乳腺上皮细胞的培养 | 第47-48页 |
·最佳感染浓度的测定 | 第48页 |
·AD-ΔFosB-572 腺病毒干扰效果的检测 | 第48-53页 |
·结果与分析 | 第53-57页 |
·腺病毒的包装与扩增 | 第53-54页 |
·腺病毒的滴度测定 | 第54页 |
·山羊乳腺上皮细胞的培养 | 第54-55页 |
·最佳感染浓度的测定 | 第55页 |
·AD-ΔFosB-572 腺病毒干扰效果的Western Blotting 检测 | 第55-56页 |
·AD-ΔFosB-572 腺病毒干扰效率的Real-time Quantitative PCR 检测 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-60页 |
·关于腺病毒滴度的测定 | 第57-58页 |
·关于Real-time Quantitative PCR 引物的设计 | 第58-59页 |
·关于干扰效率的分析 | 第59-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
作者简介 | 第69页 |