摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
第1章 引言 | 第11-16页 |
第2章 实验材料 | 第16-19页 |
2.1 基本材料 | 第16页 |
2.2 主要仪器 | 第16-17页 |
2.3 主要试剂 | 第17-19页 |
第3章 实验方法 | 第19-27页 |
3.1 HBV-C/ pBudCE4.1 重组质粒的构建 | 第19-23页 |
3.1.1 HBV-C的引物设计与合成 | 第19页 |
3.1.2 HBV DNA的提取 | 第19页 |
3.1.3 PCR扩增HBV-C基因 | 第19-20页 |
3.1.4 HBV-C基因回收纯化 | 第20-21页 |
3.1.5 HBV-C、pBudCE4.1 的双酶切及产物回收 | 第21页 |
3.1.6 HBV-C基因与pBudCE4.1 质粒的连接 | 第21-22页 |
3.1.7 大肠杆菌DH5α 的转化 | 第22页 |
3.1.8 重组质粒的抽提 | 第22-23页 |
3.1.9 重组质粒的鉴定 | 第23页 |
3.2 人肝癌细胞HepG2的培养 | 第23-24页 |
3.2.1 细胞复苏 | 第23-24页 |
3.2.2 细胞传代 | 第24页 |
3.3 药物实验 | 第24-27页 |
3.3.1 中药的制备 | 第24页 |
3.3.2 细胞转染 | 第24-25页 |
3.3.3 中药对HepG2细胞培养上清液中HBe Ag的抑制实验 | 第25页 |
3.3.4 中药对HepG2细胞裂解液中HBeAg的抑制实验 | 第25页 |
3.3.5 ELISA检测HBeAg的含量 | 第25-26页 |
3.3.6 统计分析 | 第26-27页 |
第4章 结果 | 第27-39页 |
4.1 HBV-C基因PCR扩增结果 | 第27页 |
4.2 HBV-C、pBudCE4.1 双酶切产物鉴定结果 | 第27-28页 |
4.3 重组质粒HBV-C/ pBudCE4.1 的酶切鉴定结果 | 第28-29页 |
4.4 重组质粒DNA测序结果 | 第29页 |
4.5 中药对HepG2细胞培养上清液中HBeAg的表达抑制作用 | 第29-34页 |
4.6 中药对HepG2细胞裂解液中HBeAg的表达抑制作用 | 第34-39页 |
第5章 讨论 | 第39-44页 |
第6章 结论 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
附录 | 第50-54页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第54-55页 |
综述 中医药抗乙肝病毒实验研究进展 | 第55-65页 |
参考文献 | 第63-65页 |