| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第10-26页 |
| 1.1 本文的研究背景及意义 | 第10页 |
| 1.2 microRNA概述 | 第10-19页 |
| 1.2.1 miRNA的研究背景 | 第10-11页 |
| 1.2.2 miRNA的特点 | 第11页 |
| 1.2.3 miRNA的生物合成过程及作用机制 | 第11-12页 |
| 1.2.4 miRNA与疾病 | 第12-13页 |
| 1.2.5 miRNA的检测方法 | 第13-19页 |
| 1.3 分子信标概述 | 第19-25页 |
| 1.3.1 分子信标的基本原理 | 第19-20页 |
| 1.3.2 影响分子信标性能的因素 | 第20-21页 |
| 1.3.3 分子信标研究进展与应用 | 第21-25页 |
| 1.4 本文拟开展的工作 | 第25-26页 |
| 第2章 分子信标直接检测肿瘤相关的miR-204 | 第26-40页 |
| 2.1 前言 | 第26-27页 |
| 2.2 实验部分 | 第27-33页 |
| 2.2.1 分子信标检测miRNA的实验原理 | 第27页 |
| 2.2.2 仪器与试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第28-33页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第33-39页 |
| 2.3.1 分子信标稳定性及杂交性能的影响因子 | 第33-34页 |
| 2.3.2 分子信标与靶miRNA杂交特异性考察 | 第34-35页 |
| 2.3.3 分子信标杂交标准曲线的构建 | 第35-36页 |
| 2.3.4 肿瘤细胞/织总RNA的鉴定与浓度测定 | 第36页 |
| 2.3.5 分子信标检测MCF-7细胞中miR-204表达水平 | 第36-37页 |
| 2.3.6 qRT-RCR法检测MCF-7细胞中miR-204表达水平 | 第37-38页 |
| 2.3.7 分子信标检测胶质瘤组织中miR-204表达水平 | 第38-39页 |
| 2.3.8 qRT-RCR法检测胶质瘤组织中miR-204表达水平 | 第39页 |
| 2.4 小结 | 第39-40页 |
| 第3章 分子信标结合DSN介导的miR-204高灵敏检测 | 第40-48页 |
| 3.1 前言 | 第40-41页 |
| 3.2 实验部分 | 第41-43页 |
| 3.2.1 DSN酶介导分子信标信号放大检测miRNA原理 | 第41页 |
| 3.2.2 仪器和试剂 | 第41-42页 |
| 3.2.3 实验方法 | 第42-43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-47页 |
| 3.3.1 分子信标抗酶切能力与酶促放大可行性分析 | 第43-44页 |
| 3.3.2 DSN酶浓度条件的优化 | 第44页 |
| 3.3.3 信号放大检测下限的确定与标准曲线构建 | 第44-45页 |
| 3.3.4 分子信标酶促信号放大检测肿瘤细胞中miR-204表达水平 | 第45-46页 |
| 3.3.5 分子信标酶促信号放大检测胶质瘤组织中miR-204表达水平 | 第46-47页 |
| 3.4 小结 | 第47-48页 |
| 第4章 分子信标直接检测肿瘤相关的Pre-miR-21 | 第48-62页 |
| 4.1 前言 | 第48页 |
| 4.2 实验部分 | 第48-54页 |
| 4.2.1 分子信标直接检测Pre-miRNA的实验原理 | 第48-49页 |
| 4.2.2 仪器与试剂 | 第49-50页 |
| 4.2.3 实验方法 | 第50-54页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第54-61页 |
| 4.3.1 分子信标热稳定性考察 | 第54-55页 |
| 4.3.2 分子信标检测Pre-miR-21可行性分析 | 第55页 |
| 4.3.3 分子信标/Pre-miR-21杂交实验条件的优化 | 第55-57页 |
| 4.3.4 MB/Pre-miR-21杂交标准曲线的构建 | 第57-58页 |
| 4.3.5 分子信标检测MCF-7细胞中PmiRNA-21表达水平 | 第58-59页 |
| 4.3.6 qRT-RCR法检测MCF-7细胞中Pre-miR-21表达水平 | 第59页 |
| 4.3.7 分子信标检测肿瘤组织中Pre-miR-21表达水平 | 第59-60页 |
| 4.3.8 qRT-RCR法检测肿瘤组织中Pre-miR-21表达水平 | 第60页 |
| 4.3.9 Western blotting检测Pre-miR-21调控的靶蛋白 | 第60-61页 |
| 4.4 小结 | 第61-62页 |
| 结论与展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录 攻读硕士学位期间参与发表论文和专利 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
