中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第12-27页 |
1.1 小菜蛾研究概况 | 第12-13页 |
1.2 小菜蛾抗药性的发展 | 第13-17页 |
1.2.1 小菜蛾抗药性发展现状 | 第13页 |
1.2.2 小菜蛾抗药性机制 | 第13-16页 |
1.2.3 小菜蛾对阿维菌素抗性研究进展 | 第16-17页 |
1.3 细胞色素P450研究进展 | 第17-20页 |
1.3.1 细胞色素P450研究概述 | 第17-18页 |
1.3.2 昆虫细胞色素P450研究进展 | 第18-20页 |
1.4 RNA干扰 | 第20-25页 |
1.4.1 RNA干扰作用原理 | 第20-21页 |
1.4.2 RNA干扰技术的应用 | 第21-25页 |
1.5 研究内容和目的意义 | 第25-27页 |
1.5.1 研究内容和方法 | 第25页 |
1.5.2 技术路线 | 第25-26页 |
1.5.3 研究目的意义 | 第26-27页 |
第2章 小菜蛾的室内饲养及汰选 | 第27-31页 |
2.1 材料与方法 | 第27-28页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第27页 |
2.1.2 试验药剂 | 第27-28页 |
2.2 试验方法 | 第28-29页 |
2.2.1 小菜蛾的饲养 | 第28页 |
2.2.2 阿维菌素抗性小菜蛾的汰选 | 第28页 |
2.2.3 小菜蛾对阿维菌素的生物测定 | 第28-29页 |
2.3 结果与分析 | 第29页 |
2.4 本章小结 | 第29-31页 |
第3章 小菜蛾CYP340W1基因的全长克隆及特征分析 | 第31-42页 |
3.1 材料与方法 | 第31-32页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第31页 |
3.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第31页 |
3.1.3 主要仪器 | 第31页 |
3.1.4 培养基及常用溶液 | 第31页 |
3.1.5 测序及引物 | 第31-32页 |
3.2 试验方法 | 第32-36页 |
3.2.1 总RNA提取 | 第32页 |
3.2.2 cDNA的合成 | 第32页 |
3.2.3 小菜蛾CYP340W1基因的全长克隆 | 第32-36页 |
3.2.4 生物学信息学分析 | 第36页 |
3.3 结果与分析 | 第36-40页 |
3.3.1 小菜蛾总RNA的提取 | 第36-37页 |
3.3.2 CYP340W1基因克隆RACE结果 | 第37页 |
3.3.3 小菜蛾CYP340W1基因cDNA全长的克隆 | 第37-38页 |
3.3.4 CYP340W1全长序列分析 | 第38-39页 |
3.3.5 CYP340W1跨膜区预测结果 | 第39页 |
3.3.6 CYP340W1进化树分析 | 第39-40页 |
3.4 小结与讨论 | 第40-42页 |
第4章 小菜蛾CYP340W1基因相对表达量分析 | 第42-49页 |
4.1 材料与方法 | 第42页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第42页 |
4.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第42页 |
4.1.3 主要仪器 | 第42页 |
4.1.4 培养基及常用溶液 | 第42页 |
4.1.5 引物和测序 | 第42页 |
4.1.6 生物信息学分析 | 第42页 |
4.2 试验方法 | 第42-45页 |
4.2.1 RNA的提取 | 第42-43页 |
4.2.2 cDNA的合成 | 第43页 |
4.2.3 CYP340W1基因qRT-PCR引物筛选 | 第43页 |
4.2.4 CYP340W1基因在不同龄期的表达量分析 | 第43-44页 |
4.2.5 CYP340W1基因在不同组织的表达量分析 | 第44页 |
4.2.6 CYP340W1基因在不同种群中的相对表达量 | 第44页 |
4.2.7 阿维菌素处理后CYP340W1基因相对表达量分析 | 第44-45页 |
4.3 结果与分析 | 第45-47页 |
4.3.1 小菜蛾CYP340W1基因不同龄期和不同组织中的表达量分析 | 第45页 |
4.3.2 不同种群小菜蛾CYP340W1基因表达量分析 | 第45-46页 |
4.3.3 阿维菌素刺激下CYP340W1的相对表达量分析 | 第46-47页 |
4.4 小结与讨论 | 第47-49页 |
第5章 小菜蛾CYP340W1基因的RNA干扰 | 第49-56页 |
5.1 材料与方法 | 第49-50页 |
5.1.1 供试昆虫 | 第49页 |
5.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第49页 |
5.1.3 主要仪器 | 第49页 |
5.1.4 培养基及常用溶液 | 第49页 |
5.1.5 引物和测序 | 第49页 |
5.1.6 生物信息学分析 | 第49-50页 |
5.2 试验方法 | 第50-51页 |
5.2.1 RNA的提取 | 第50页 |
5.2.2 cDNA的合成 | 第50页 |
5.2.3 CYP340W1基因dsRNA的体外合成 | 第50页 |
5.2.4 小菜蛾ds RNA显微注射 | 第50-51页 |
5.2.5 CYP340W1基因干扰后相对表达量分析 | 第51页 |
5.2.6 CYP340W1基因干扰后小菜蛾对阿维菌素敏感性测定 | 第51页 |
5.3 结果与分析 | 第51-54页 |
5.3.1 小菜蛾RNA的提取 | 第51-52页 |
5.3.2 dsEGFP的DNA模板 | 第52页 |
5.3.3 小菜蛾CYP340W1基因的RNA干扰 | 第52-53页 |
5.3.4 小菜蛾CYP340W1沉默后对阿维菌素的敏感性 | 第53-54页 |
5.4 小结与讨论 | 第54-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
攻读学位期间发表论文 | 第77-78页 |
附录 | 第78-84页 |