| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第1章 引言 | 第15-18页 |
| 第2章 生物信息学分析 | 第18-23页 |
| 2.1 方法 | 第18页 |
| 2.1.1 靶向作用于OATP1B1 mRNA 3'-UTR的miRNA预测 | 第18页 |
| 2.1.2 预测结合位点自由能分析 | 第18页 |
| 2.2 结果 | 第18-21页 |
| 2.2.1 靶向作用于OATP1B1 mRNA 3'-UTR的microRNA预测结果的筛选 | 第18-20页 |
| 2.2.2 预测结合位点自由能分析 | 第20-21页 |
| 2.3 讨论 | 第21-23页 |
| 第3章 构建和评估过表达或抑制表达miR-206/miR-613 的Hep G2细胞模型 | 第23-34页 |
| 3.1 材料 | 第23-24页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第23页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第24页 |
| 3.2 方法 | 第24-30页 |
| 3.2.1 主要溶液的配制 | 第24-25页 |
| 3.2.2 Hep G2细胞的培养 | 第25页 |
| 3.2.3 瞬转miR-206/miR-613 mimic或inhibitor到Hep G2细胞对miR-206/miR-613 表达的影响 | 第25-29页 |
| 3.2.4 数据处理与统计分析 | 第29-30页 |
| 3.3 结果 | 第30-33页 |
| 3.3.1 Hep G2细胞形态学 | 第30页 |
| 3.3.2 瞬转miR-206/miR-613 mimic或inhibitor到Hep G2细胞对miR-206/miR-613 表达的影响 | 第30-33页 |
| 3.4 讨论 | 第33-34页 |
| 第4章 过表达或抑制表达miR-206/miR-613 对OATP1B1基因和蛋白表达的影响 | 第34-47页 |
| 4.1 材料 | 第34-35页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第34页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第34-35页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第35页 |
| 4.2 方法 | 第35-41页 |
| 4.2.1 Hep G2细胞的培养 | 第35-36页 |
| 4.2.2 过表达miR-206/miR-613 对Hep G2细胞OATP1B1 mRNA和蛋白表达的影响 | 第36-41页 |
| 4.2.3 抑制表达miR-206/miR-613 对Hep G2细胞OATP1B1 mRNA和蛋白表达的影响 | 第41页 |
| 4.2.4 数据处理与统计分析 | 第41页 |
| 4.3 结果 | 第41-45页 |
| 4.3.1 过表达miR-206/miR-613 对Hep G2细胞OATP1B1 mRNA和蛋白表达的影响 | 第41-44页 |
| 4.3.2 抑制表达miR-206/miR-613 对Hep G2细胞OATP1B1 mRNA和蛋白表达的影响 | 第44-45页 |
| 4.4 讨论 | 第45-47页 |
| 第5章 双荧光报告基因探究miR-206/miR-613 作用于OATP1B1的机制 | 第47-58页 |
| 5.1 材料 | 第47-48页 |
| 5.1.1 细胞株 | 第47-48页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第48页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第48页 |
| 5.2 方法 | 第48-54页 |
| 5.2.1 主要溶液的配制 | 第48页 |
| 5.2.2 Hep G2及HEK293T细胞的培养 | 第48页 |
| 5.2.3 质粒构建、扩增、提取及鉴定 | 第48-52页 |
| 5.2.4 报告基因检测 | 第52-54页 |
| 5.2.5 数据处理与统计分析 | 第54页 |
| 5.3 结果 | 第54-56页 |
| 5.3.1 质粒DNA纯度鉴定 | 第54页 |
| 5.3.2 过表达miR-206/miR-613 对报告基因荧光素酶活性的影响 | 第54-55页 |
| 5.3.3 抑制表达miR-206/miR-613 对报告基因荧光素酶活性的影响 | 第55-56页 |
| 5.4 讨论 | 第56-58页 |
| 第6章 结论与展望 | 第58-59页 |
| 6.1 结论 | 第58页 |
| 6.2 展望 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第64-65页 |
| 综述 microRNA对药物转运体和代谢酶调控的研究进展 | 第65-75页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
