摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
符号说明 | 第12-13页 |
第1章 绪论 | 第13-22页 |
1.1 污染源及其危害 | 第13页 |
1.2 微生物絮凝剂的种类及来源 | 第13-15页 |
1.3 国内外研究现状 | 第15-18页 |
1.3.1 廉价培养基的使用 | 第16页 |
1.3.2 培养基组分及絮凝条件的优化 | 第16-17页 |
1.3.3 絮凝基因工程菌株的构建 | 第17-18页 |
1.3.4 复合絮凝剂的探索 | 第18页 |
1.4 微生物絮凝剂的应用 | 第18页 |
1.5 絮凝机理 | 第18-20页 |
1.6 本文主要研究内容 | 第20-22页 |
1.6.1 实验流程图 | 第21-22页 |
第2章 产絮凝剂菌株的筛选及鉴定 | 第22-32页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 材料和方法 | 第22-27页 |
2.2.1 实验材料 | 第22页 |
2.2.2 主要设备及仪器 | 第22-23页 |
2.2.3 主要药品及试剂 | 第23-25页 |
2.2.4 菌种筛选流程图 | 第25页 |
2.2.5 菌种的富集筛选纯化 | 第25页 |
2.2.6 产絮凝剂菌株的活化和培养 | 第25-26页 |
2.2.7 菌株絮凝活性的测定 | 第26页 |
2.2.8 产絮凝剂菌株C412的鉴定 | 第26-27页 |
2.3 结果与讨论 | 第27-31页 |
2.3.1 菌种分离结果 | 第27页 |
2.3.2 菌株C412的平板菌落及显微镜下特征观察 | 第27-28页 |
2.3.3 菌株C412的生理生化实验 | 第28页 |
2.3.4 菌株C412的分子生物学鉴定 | 第28-31页 |
2.3.4.1 电泳检测PCR产物 | 第29页 |
2.3.4.2 16S rDNA序列系统发育树的构建 | 第29-30页 |
2.3.4.3 GyrB序列系统发育树的构建 | 第30-31页 |
2.4 本章小结 | 第31-32页 |
第3章 微生物絮凝剂产生菌C412的发酵条件优化 | 第32-50页 |
3.1 引言 | 第32页 |
3.2 实验材料和仪器 | 第32页 |
3.3 实验方法 | 第32-35页 |
3.4 实验结果 | 第35-49页 |
3.4.1 不同碳源及氮源对菌株C412的絮凝活性和生长量的影响 | 第35页 |
3.4.2 不同氮源对菌株C412的絮凝活性和生长量的影响 | 第35-36页 |
3.4.3 可溶性淀粉浓度对菌株C412絮凝活性的影响 | 第36-37页 |
3.4.4 牛肉提取物浓度对菌株C412絮凝率和生长量的影响 | 第37-38页 |
3.4.5 硫酸铵浓度对菌株C412絮凝率和生长量的影响 | 第38页 |
3.4.6 金属离子对对菌株C412絮凝活性和生长量的影响 | 第38-39页 |
3.4.7 培养基pH对菌株C412絮凝活性和生长量的影响 | 第39-40页 |
3.4.8 Plachett-Burman(PB)设计 | 第40-41页 |
3.4.9 最陡爬坡实验设计 | 第41-42页 |
3.4.10 中心复合实验设计(CCD) | 第42-44页 |
3.4.11 因素的交互作用 | 第44-46页 |
3.4.12 模型验证和菌株C412的高浓度间歇式发酵 | 第46-49页 |
3.4.12.1 锥形瓶发酵 | 第46-48页 |
3.4.12.2 1.5L发酵罐发酵 | 第48-49页 |
3.5 本章小结 | 第49-50页 |
第4章 微生物絮凝剂的提取及其相关特性研究 | 第50-64页 |
4.1 引言 | 第50页 |
4.2 实验材料与方法 | 第50-53页 |
4.2.1 实验材料 | 第50页 |
4.2.2 实验仪器 | 第50-51页 |
4.2.3 絮凝活性物质分布 | 第51页 |
4.2.4 微生物絮凝剂的提取 | 第51页 |
4.2.5 微生物絮凝剂的化学成分分析 | 第51页 |
4.2.6 微生物絮凝剂的红外及紫外图谱分析 | 第51-52页 |
4.2.7 微生物絮凝剂分子量的测定 | 第52页 |
4.2.8 扫描电镜分析菌株C412和微生物絮凝剂表面特征 | 第52页 |
4.2.9 不同浓度及价态的金属离子的助凝效果 | 第52页 |
4.2.10 絮凝剂MBF412的耐热性和耐受pH分析 | 第52-53页 |
4.2.11 絮凝机理的初探 | 第53页 |
4.2.12 高岭土悬浊液和合成氨工厂废水的沉降 | 第53页 |
4.3 实验结果 | 第53-62页 |
4.3.1 微生物絮凝剂的分布 | 第53-54页 |
4.3.2 微生物絮凝剂的紫外光谱图及化学成分分析 | 第54-55页 |
4.3.3 微生物絮凝剂的紫外光谱分析及红外光谱图 | 第55-56页 |
4.3.4 微生物絮凝剂分子量的测定 | 第56页 |
4.3.5 扫描电镜分析菌株C412和絮凝剂MBF412 | 第56-57页 |
4.3.6 微生物絮凝剂MBF412的耐热性和耐酸碱性分析 | 第57-59页 |
4.3.7 不同种类及浓度的金属离子的助凝效果 | 第59-60页 |
4.3.8 微生物絮凝剂的絮凝机理初探 | 第60-61页 |
4.3.9 高岭土悬浮粒子和合成氨工厂废水的沉降效果图 | 第61-62页 |
4.4 本章小结 | 第62-64页 |
第5章 絮凝基因的相对表达定量分析 | 第64-73页 |
5.1 引言 | 第64-65页 |
5.2 实验材料 | 第65页 |
5.3 主要仪器和试剂 | 第65-66页 |
5.3.1 主要试剂 | 第65-66页 |
5.3.2 主要仪器 | 第66页 |
5.4 实验方法 | 第66-68页 |
5.4.1 RNA抽提操作步骤 | 第66-67页 |
5.4.2 反转录 | 第67-68页 |
5.4.2.1 消化DNA | 第67页 |
5.4.2.2 cDNA第一链合成 | 第67-68页 |
5.5 荧光定量PCR检测 | 第68页 |
5.5.1 实验样本 | 第68页 |
5.5.2 PCR反应步骤 | 第68页 |
5.5.2.1 配制反应混合液 | 第68页 |
5.5.2.2 PCR循环条件 | 第68页 |
5.5.2.3 仪器的操作 | 第68页 |
5.6 实验结果 | 第68-72页 |
5.6.1 RNA电泳检测 | 第69页 |
5.6.2 熔解及扩增曲线 | 第69-71页 |
5.6.3 不同发酵时间下四个基因的相对定量结果 | 第71-72页 |
5.7 本章小结 | 第72-73页 |
第6章 全文总结与展望 | 第73-76页 |
6.1 全文总结 | 第73-74页 |
6.2 创新点 | 第74页 |
6.3 展望 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-83页 |
附录 | 第83-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第86页 |