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库德毕赤酵母重金属积累特性及高盐/低pH下镉抗性提高机理研究

摘要第5-8页
Abstract第8-11页
0 前言第18-39页
    0.1 重金属污染现状简介第18-19页
        0.1.1 水环境中重金属污染现状第18-19页
        0.1.2 水产品中重金属污染现状第19页
    0.2 微生物重金属脱除技术第19-22页
        0.2.1 生物吸附法第20-21页
        0.2.2 生物积累法第21-22页
    0.3 酵母菌重金属转运与抗性第22-27页
        0.3.1 酵母菌的重金属转运第22-25页
        0.3.2 重金属的毒性机理第25-26页
        0.3.3 酵母菌的重金属抗性机制第26-27页
    0.4 转录组测序技术第27-33页
        0.4.1 转录组学的研究意义与方法第27-29页
        0.4.2 转录组测序的基本流程第29-32页
        0.4.3 转录组测序的应用第32页
        0.4.4 转录组测序在酵母菌中的研究进展第32-33页
    0.5 蛋白质组学研究技术第33-35页
        0.5.1 基于2-DE的蛋白质组学研究方法第33-34页
        0.5.2 蛋白质组学的发展趋势第34-35页
        0.5.3 蛋白质组学在酵母菌中的研究进展第35页
    0.6 库德毕赤酵母研究进展第35-36页
    0.7 立题依据与研究意义第36-37页
    0.8 主要研究内容和技术路线第37-39页
        0.8.1 研究内容第37-38页
        0.8.2 技术路线第38-39页
1 Pichia kudriavzevii A16的重金属抗性和生物积累特性研究第39-62页
    1.1 材料、试剂与仪器第39-40页
        1.1.1 试验菌株第39页
        1.1.2 主要试剂第39-40页
        1.1.3 主要培养基第40页
        1.1.4 主要仪器第40页
    1.2 方法与步骤第40-42页
        1.2.1 酵母菌活化第40页
        1.2.2 生物积累时间对重金属抗性和积累的影响第40-41页
        1.2.3 初始重金属浓度对重金属抗性和积累的影响第41页
        1.2.4 初始菌体浓度对重金属抗性和积累的影响第41页
        1.2.5 其它重金属离子对重金属抗性和积累的影响第41页
        1.2.6 生物量的测定第41页
        1.2.7 重金属脱除率和单位菌体重金属积累量的测定第41-42页
        1.2.8 细胞内重金属积累量和细胞表面重金属积累量的测定第42页
        1.2.9 统计分析第42页
    1.3 结果与讨论第42-61页
        1.3.1 生物积累时间对重金属抗性和积累的影响第42-47页
        1.3.2 初始重金属浓度对重金属抗性和积累的影响第47-50页
        1.3.3 初始菌体浓度对重金属抗性和积累的影响第50-52页
        1.3.4 其它重金属离子对重金属抗性和积累的影响第52-61页
    1.4 本章小结第61-62页
2 高盐/低pH对Pichia kudriavzevii A16重金属抗性和生物积累的影响第62-76页
    2.1 材料、试剂与仪器第62-63页
        2.1.1 试验菌株第62页
        2.1.2 主要试剂第62页
        2.1.3 主要培养基第62页
        2.1.4 主要仪器第62-63页
    2.2 方法与步骤第63-64页
        2.2.1 酵母菌活化第63页
        2.2.2 高盐对镉、铜、锌抗性和积累的影响第63页
        2.2.3 低pH对镉、铜、锌抗性和积累的影响第63页
        2.2.4 高盐或低pH对镉胁迫下P.kudriavzevii A16细胞内Na~+、K~+、Ca~(2+)和Mg~(2+)含量的影响第63页
        2.2.5 生物量的测定第63页
        2.2.6 重金属脱除率和单位菌体重金属积累量的测定第63-64页
        2.2.7 细胞内重金属积累量和细胞表面重金属积累量的测定第64页
        2.2.8 统计分析第64页
    2.3 结果与讨论第64-75页
        2.3.1 高盐对镉抗性和积累的影响第64-65页
        2.3.2 高盐对铜抗性和积累的影响第65-67页
        2.3.3 高盐对锌抗性和积累的影响第67-68页
        2.3.4 低pH对镉抗性和积累的影响第68-69页
        2.3.5 低pH对铜抗性和积累的影响第69-70页
        2.3.6 低pH对锌抗性和积累的影响第70-72页
        2.3.7 高盐对镉胁迫下P.kudriavzevii A16细胞内Na~+、K~+、Ca~(2+)和Mg~(2+)含量的影响第72-74页
        2.3.8 低pH对镉胁迫下P kudriavzevii A16细胞内Na~+、K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)含量的影响第74-75页
    2.4 本章小结第75-76页
3 高盐/低pH对镉胁迫下Pichia kudriavzevii A16转录组的影响第76-109页
    3.1 材料、试剂与仪器第76-77页
        3.1.1 试验菌株第76页
        3.1.2 主要试剂第76-77页
        3.1.3 主要培养基第77页
        3.1.4 主要仪器第77页
    3.2 方法与步骤第77-83页
        3.2.1 酵母菌活化及处理第77页
        3.2.2 总RNA提取第77-78页
        3.2.3 总RNA质量检测第78-79页
        3.2.4 cDNA文库构建第79-80页
        3.2.5 cDNA文库测序第80页
        3.2.6 测序数据质量评估第80-81页
        3.2.7 转录组测序数据拼接组装第81页
        3.2.8 转录本注释分析第81-82页
        3.2.9 差异表达转录本分析第82-83页
    3.3 结果与讨论第83-107页
        3.3.1 总RNA质量分析第83-84页
        3.3.2 文库质量分析第84-85页
        3.3.3 测序数据质量第85-86页
        3.3.4 拼接转录本长度分布第86-87页
        3.3.5 转录本注释分析第87-89页
        3.3.6 高盐对镉胁迫下P kudriavzevii A16转录组的影响第89-98页
        3.3.7 低pH对镉胁迫下P.kudriavzevii A16转录组的影响第98-107页
    3.4 本章小结第107-109页
4 高盐/低pH对镉胁迫下Pichia kudriavzevii A16蛋白质组的影响第109-126页
    4.1 材料、试剂与仪器第109-110页
        4.1.1 试验菌株第109页
        4.1.2 主要试剂第109-110页
        4.1.3 主要培养基第110页
        4.1.4 主要仪器第110页
    4.2 方法与步骤第110-112页
        4.2.1 酵母菌活化及处理第110页
        4.2.2 总蛋白提取第110-111页
        4.2.3 双向电泳第111-112页
        4.2.4 差异蛋白质的质谱鉴定第112页
    4.3 结果与讨论第112-125页
        4.3.1 各组总蛋白的提取和双向电泳第112-115页
        4.3.2 高盐对镉胁迫下P.kudriavzevii A16蛋白质组的影响第115-122页
        4.3.3 低pH对镉胁迫下P.kudriavzevii A16蛋白质组的影响第122-125页
    4.4 本章小结第125-126页
5 基于抗氧化物酶基因表达的Pichia kudriavzevii A16镉抗性提高机制第126-151页
    5.1 材料、试剂与仪器第126-127页
        5.1.1 试验菌株第126-127页
        5.1.2 主要试剂第127页
        5.1.3 主要培养基第127页
        5.1.4 主要仪器第127页
    5.2 方法与步骤第127-132页
        5.2.1 酵母菌活化第127页
        5.2.2 高盐或低pH对镉诱导的氧化胁迫的影响第127-129页
        5.2.3 高盐或低pH对镉胁迫下抗氧化物酶基因表达的影响第129-131页
        5.2.4 高盐或低pH对镉胁迫下抗氧化物酶活力的影响第131页
        5.2.5 高盐或低pH对镉胁迫下其它关键基因表达的影响第131-132页
        5.2.6 统计分析第132页
    5.3 结果与讨论第132-149页
        5.3.1 高盐或低pH对镉诱导的氧化胁迫的影响第132-136页
        5.3.2 高盐或低pH对镉胁迫下抗氧化物酶基因表达的影响第136-141页
        5.3.3 高盐或低pH对镉胁迫下抗氧化物酶活力的影响第141-143页
        5.3.4 高盐或低pH对镉胁迫下其它关键基因表达的影响第143-149页
    5.4 本章小结第149-151页
全文结论第151-153页
研究展望第153-154页
论文创新点第154-155页
参考文献第155-175页
附录第175-194页
缩略词表第194-196页
个人简介第196-197页
攻读学位期间发表的学术论文第197-199页
参与的科研项目第199页
获奖情况第199-200页
致谢第200页

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