| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第11-34页 |
| 1.1 引言 | 第11-12页 |
| 1.2 手性含氮杂环醇的合成研究进展 | 第12-19页 |
| 1.2.1 手性哌啶醇 | 第12-14页 |
| 1.2.2 手性奎宁醇 | 第14-16页 |
| 1.2.3 手性吡咯烷醇 | 第16-19页 |
| 1.3 醇脱氢酶酶学及催化性质 | 第19-23页 |
| 1.3.1 醇脱氢酶的水相催化 | 第20-21页 |
| 1.3.2 醇脱氢酶的非水相催化 | 第21-23页 |
| 1.4 辅酶循环体系的构建 | 第23-27页 |
| 1.4.1 辅酶的体外循环再生 | 第23-26页 |
| 1.4.2 内源性辅酶再生 | 第26-27页 |
| 1.5 本论文研究背景、内容及意义 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-34页 |
| 第二章 具有不对称合成手性哌啶醇能力的微生物的筛选 | 第34-50页 |
| 2.1 引言 | 第34-35页 |
| 2.2 实验材料 | 第35-37页 |
| 2.2.1 菌种 | 第35页 |
| 2.2.2 试剂 | 第35页 |
| 2.2.3 培养基和培养条件 | 第35-36页 |
| 2.2.4 缓冲液 | 第36页 |
| 2.2.5 主要仪器 | 第36-37页 |
| 2.3 实验方法 | 第37-39页 |
| 2.3.1 菌种筛选 | 第37页 |
| 2.3.2 立体选择性的确定分析 | 第37-38页 |
| 2.3.3 N-Boc3哌啶酮的不对称还原 | 第38-39页 |
| 2.4 结果与分析 | 第39-47页 |
| 2.4.1 菌种筛选结果 | 第39-42页 |
| 2.4.2 N-Boc3哌啶酮的不对称还原 | 第42-47页 |
| 2.5 本章小结与讨论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-50页 |
| 第三章 哌啶酮还原酶重组菌的构建及其酶学性质探究 | 第50-75页 |
| 3.1 引言 | 第50-51页 |
| 3.2 实验材料 | 第51-53页 |
| 3.2.1 菌种及质粒载体 | 第51页 |
| 3.2.2 试剂与耗材 | 第51-52页 |
| 3.2.3 培养基和培养条件 | 第52页 |
| 3.2.4 缓冲液 | 第52页 |
| 3.2.5 主要仪器 | 第52-53页 |
| 3.3 实验方法 | 第53-58页 |
| 3.3.1 菌种培养 | 第53页 |
| 3.3.2 目的基因的克隆 | 第53-56页 |
| 3.3.3 ReADH重组蛋白的诱导表达 | 第56页 |
| 3.3.4 ReADH重组蛋白的分离纯化 | 第56页 |
| 3.3.5 ReADH重组蛋白的结构分析 | 第56页 |
| 3.3.6 重组酶活力的测定及蛋白浓度的测定 | 第56-57页 |
| 3.3.7 ReADH重组酶的酶学性质 | 第57-58页 |
| 3.4 结果与分析 | 第58-72页 |
| 3.4.1 目的基因克隆及分子特征 | 第58-60页 |
| 3.4.2 ReADH重组蛋白的表达及纯化 | 第60-65页 |
| 3.4.3 ReADH重组酶的酶学性质 | 第65-72页 |
| 3.5 本章讨论与小结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-75页 |
| 第四章 哌啶酮还原酶在生物催化方面的应用探索 | 第75-93页 |
| 4.1 引言 | 第75-76页 |
| 4.2 实验材料 | 第76-78页 |
| 4.2.1 菌种 | 第76页 |
| 4.2.2 试剂与耗材 | 第76页 |
| 4.2.3 培养基和培养条件 | 第76-77页 |
| 4.2.4 缓冲液 | 第77页 |
| 4.2.5 主要仪器 | 第77-78页 |
| 4.3 实验方法 | 第78-81页 |
| 4.3.1 ReADH重组蛋白的诱导表达 | 第78页 |
| 4.3.2 ReADH重组蛋白的分离纯化 | 第78页 |
| 4.3.3 单酶双底物法合成手性哌啶醇 | 第78-80页 |
| 4.3.4 重组菌整细胞催化合成手性哌啶醇 | 第80-81页 |
| 4.3.5 不对称合成手性(S)-N-Boc3哌啶醇的结果检测 | 第81页 |
| 4.4 结果与分析 | 第81-90页 |
| 4.4.1 单酶双底物法合成手性哌啶醇 | 第81-88页 |
| 4.4.2 重组菌整细胞法合成手性哌啶醇 | 第88-90页 |
| 4.4.2.1 pH对合成手性(S)-N-Boc3哌啶醇的影响 | 第88页 |
| 4.4.2.2 催化剂用量对合成手性(S)-N-Boc-3-哌啶醇的影响 | 第88-90页 |
| 4.5 本章讨论与小结 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-93页 |
| 第五章 总结与展望 | 第93-96页 |
| 5.1 结论 | 第93-94页 |
| 5.2 展望 | 第94-96页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
