| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 中英文缩写对照 | 第8-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 非小细胞肺癌研究概况 | 第12页 |
| 1.2 WDR79蛋白概述 | 第12-15页 |
| 1.2.1 WDR79蛋白的结构 | 第12-13页 |
| 1.2.2 WDR79蛋白的分子功能 | 第13-14页 |
| 1.2.3 WDR79蛋白与相关疾病 | 第14-15页 |
| 1.3 UHRF1蛋白概述 | 第15-18页 |
| 1.3.1 UHRF1蛋白结构 | 第15-16页 |
| 1.3.2 UHRF1蛋白表达与功能 | 第16-17页 |
| 1.3.3 UHRF1蛋白与肿瘤 | 第17-18页 |
| 1.4 本课题的研究目的、内容和意义 | 第18-20页 |
| 第2章 鉴定WDR79调控的蛋白 | 第20-33页 |
| 2.1 前言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料与实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-30页 |
| 2.3.1 试剂配制 | 第21-23页 |
| 2.3.2 细胞培养 | 第23-24页 |
| 2.3.4 质粒pCMV-Tag2B-WDR79的构建 | 第24-27页 |
| 2.3.5 过表达实验 | 第27页 |
| 2.3.6 蛋白质的检测 | 第27-28页 |
| 2.3.7 特异性WDR79-shRNA慢病毒制备 | 第28-29页 |
| 2.3.8 WDR79以剂量依赖性增加UHRF1的蛋白水平 | 第29-30页 |
| 2.4 实验结果 | 第30-31页 |
| 2.4.1 抗体筛选WDR79调控蛋白 | 第30页 |
| 2.4.2 干扰WDR79蛋白表达下调UHRF1蛋白 | 第30-31页 |
| 2.4.3 过表达WDR79促进UHRF1蛋白的上调 | 第31页 |
| 2.4.4 WDR79以剂量依赖性增加UHRF1的蛋白水平 | 第31页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第31-33页 |
| 第3章 WDR79和UHRF1蛋白之间的相互作用 | 第33-41页 |
| 3.1 前言 | 第33页 |
| 3.2 实验材料与实验仪器 | 第33-35页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第34-35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-38页 |
| 3.3.1 试剂配制 | 第35-36页 |
| 3.3.2 蛋白质的检测 | 第36-37页 |
| 3.3.3 间接免疫荧光 | 第37-38页 |
| 3.3.4 免疫共沉淀 | 第38页 |
| 3.4 实验结果 | 第38-40页 |
| 3.4.1 WDR79蛋白和UHRF1蛋白在细胞内共定位 | 第38-39页 |
| 3.4.2 过表达WDR79与内源性UHRF1的相互作用 | 第39-40页 |
| 3.4.3 内源性WDR79蛋白与UHRF1蛋白在细胞内相互作用 | 第40页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第40-41页 |
| 第4章 WDR79通过泛素-蛋白酶体通路调控UHRF1 | 第41-49页 |
| 4.1 前言 | 第41页 |
| 4.2 实验材料与实验仪器 | 第41-42页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 4.2.2 实验仪器设备 | 第42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42-45页 |
| 4.3.1 蛋白酶体抑制试验 | 第42-43页 |
| 4.3.2 RT-PCR | 第43-45页 |
| 4.4 实验结果 | 第45-48页 |
| 4.4.1 WDR79在蛋白水平调控UHRF1 | 第45-46页 |
| 4.4.2 WDR79通过蛋白酶体途径调控UHRF1蛋白水平 | 第46-47页 |
| 4.4.3 干扰WDR79缩短UHRF1蛋白半衰期 | 第47页 |
| 4.4.4 干扰WDR79促进UHRF1蛋白的泛素化 | 第47-48页 |
| 4.5 小结与讨论 | 第48-49页 |
| 第5章 WDR79通过UHRF1蛋白影响非小细胞肺癌细胞增殖 | 第49-53页 |
| 5.1 前言 | 第49页 |
| 5.2 实验材料与实验仪器 | 第49-50页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第49页 |
| 5.2.2 试剂配制 | 第49-50页 |
| 5.2.3 实验仪器 | 第50页 |
| 5.3 实验方法 | 第50-51页 |
| 5.3.1 siRNA转染 | 第50页 |
| 5.3.2 MTT法检测细胞增殖 | 第50-51页 |
| 5.4 实验结果 | 第51-52页 |
| 5.4.1 检测UHRF1干扰序列有效性 | 第51页 |
| 5.4.2 WDR79影响细胞的增殖 | 第51-52页 |
| 5.5 小结与讨论 | 第52-53页 |
| 结论和展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录A 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
