| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 1 引言 | 第11-14页 |
| ·基因治疗及基因载体的介绍 | 第11页 |
| ·PLGA纳米微球在基因递送中的应用研究 | 第11-13页 |
| ·白喉毒素在肿瘤治疗中的应用 | 第13页 |
| ·本课题的研究目的与内容 | 第13-14页 |
| 2 实验材料、仪器与试剂配制 | 第14-18页 |
| ·实验材料 | 第14页 |
| ·实验仪器 | 第14-15页 |
| ·试剂配制 | 第15-18页 |
| ·细菌培养所用试剂配制 | 第15-16页 |
| ·质粒大提试剂配制 | 第16页 |
| ·细胞培养所用试剂配制 | 第16-17页 |
| ·其他试剂配制 | 第17-18页 |
| 3 实验方法 | 第18-32页 |
| ·PLGA纳米微球的制备及其性质测定 | 第18-22页 |
| ·乳化溶剂挥发法制备PLGA纳米微球 | 第18-19页 |
| ·测定PLGA纳米微球表面形态 | 第19页 |
| ·测定PLGA/EGFP纳米微球包封率 | 第19-20页 |
| ·测定PLGA/EGFP纳米微球体外释放曲线 | 第20页 |
| ·微球中包载质粒的结构测定 | 第20页 |
| ·PLGA对微球中包载质粒的酶切保护实验 | 第20页 |
| ·空白PLGA纳米微球细胞毒性测定(MTT法) | 第20-22页 |
| ·pcDNA3.1(-)/DT_(389)质粒的构建 | 第22-29页 |
| ·E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| ·表达质粒pET-30a(+)/DT_(389)-hIL13的转化、提取、鉴定 | 第23-24页 |
| ·白喉毒素DT_(389)基因片段的PCR扩增 | 第24-26页 |
| ·克隆载体pMD18-T/DT_(389)的构建 | 第26-27页 |
| ·真核表达质粒pcDNA3.1(-)/DT_(389)的构建 | 第27-29页 |
| ·PLGA/DT_(389)纳米微球的体外抑瘤活性 | 第29-32页 |
| ·无内毒素pcDNA3.1(-)/DT_(389)质粒的大量提取 | 第29-30页 |
| ·细胞复苏 | 第30页 |
| ·细胞培养 | 第30页 |
| ·细胞冻存 | 第30-31页 |
| ·PLGA/DT_(389)纳米微球体外抑瘤活性测定(MTT法) | 第31-32页 |
| 4 实验结果 | 第32-51页 |
| ·PLGA纳米微球的性质 | 第32-40页 |
| ·PLGA纳米微球的表面形态 | 第32-33页 |
| ·PLGA/EGFP纳米微球的包封率 | 第33-35页 |
| ·PLGA/EGFP纳米微球的体外释放曲线 | 第35-37页 |
| ·微球中包载质粒的结构测定 | 第37-38页 |
| ·微球对质粒的酶切保护 | 第38页 |
| ·空白PLGA纳米微球的细胞毒性 | 第38-40页 |
| ·pcDNA3.1(-)/DT_(389)质粒的构建 | 第40-41页 |
| ·PLGA/DT_(389)纳米微球的体外抑瘤活性 | 第41-51页 |
| ·改变超声时间对微球体外抑瘤活性的影响 | 第41-46页 |
| ·改变PLGA组分对微球体外抑瘤活性的影响 | 第46-51页 |
| 5 讨论 | 第51-54页 |
| ·制备工艺对PLGA纳米微球性质的影响 | 第51-52页 |
| ·PLGA纳米微球对DNA的保护作用 | 第52页 |
| ·PLGA纳米微球毒性及PLGA/DT_(389)纳米微球体外抑瘤活性 | 第52-54页 |
| 6 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 附录A | 第58-59页 |
| 作者简历 | 第59-61页 |
| 学位论文数据集 | 第61页 |
