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果胶甲基酯酶在油菜素内酯调节拟南芥生长发育中的作用

中文摘要第3-6页
Abstract第6-7页
缩写词表第8-12页
第一章 引言第12-18页
    1.1 植物细胞壁的组成与功能第12页
    1.2 细胞壁果胶与果胶酶的种类和功能第12-13页
    1.3 果胶甲基酯酶PME的调控与功能第13-15页
        1.3.1 果胶甲基酯酶PME活性与PMEI的调控第13-14页
        1.3.2 PME和PMEI在植物发育中的作用第14-15页
    1.4 油菜素内酯BR对根和花发育的影响第15-16页
        1.4.1 BR在拟南芥根的生长和发育中的作用第15页
        1.4.2 BR对拟南芥花发育的影响第15-16页
    1.5 油菜素内酯BR与植物细胞壁相互作用的研究进展第16-17页
    1.6 本论文的研究目的及意义第17-18页
第二章 实验材料和方法第18-28页
    2.1 PME41和PMEI7基因开放阅读框(ORF)的克隆第18-19页
        2.1.1 野生型拟南芥RNA的提取第18页
        2.1.2 拟南芥果胶甲基酯酶基因PME41开放阅读框ORF的克隆第18-19页
        2.1.3 拟南芥果胶甲基酯酶抑制蛋白基因PMEI7的克隆第19页
    2.2 Gateway技术过表达载体的构建与转化第19-22页
        2.2.1 实验材料第20页
        2.2.2 构建入门载体与表达载体第20-21页
        2.2.3 农杆菌花浸法转化以及转基因植株的筛选第21-22页
        2.2.4 PME41-pro-GUS植株的筛选和染色第22页
    2.3 突变体与杂交植株的获得与筛选第22-23页
        2.3.1 pme41/det2双突与det2中过表达PME41和PMEI7植株的获得第22-23页
        2.3.2 杂交植株的筛选与鉴定第23页
    2.4 果胶酶甲基酯酶活性的测定第23页
        2.4.1 实验材料与取材第23页
        2.4.2 蛋白浓度的测定第23页
        2.4.3 PME活性的测定第23页
    2.5 根长的测定第23-24页
        2.5.1 实验材料与处理第23-24页
        2.5.2 根长的测定第24页
        2.5.3 根尖伸长区细胞长度的测定第24页
    2.6 不同拟南芥发育表型的观察和统计第24-26页
        2.6.1 不同发育阶段表型的观察第24页
        2.6.2 回交实验第24-25页
        2.6.3 花粉粒活性和花粉管长度的测定第25页
        2.6.4 花丝长度的测量与自交实验第25-26页
    2.7 eBL的处理第26页
    2.8 实时定量PCR(qPCR)第26-28页
        2.8.1 实验材料第26-28页
第三章 实验结果第28-49页
    3.1 PME41和PMEI7亚细胞定位第28-29页
    3.2 PME41和PMEI7转基因与鉴定第29-30页
    3.3 PME41-pro::GUS组织定位第30-31页
    3.4 转基因对根和叶果胶甲基酯酶的影响第31-32页
    3.5 PME41和PMEI7对根生长的影响第32-34页
    3.6 PME41和PMEI7对拟南芥发育的影响第34-41页
        3.6.1 杂交植株发育表型的变化第34-36页
        3.6.2 PME41和PMEI7对果实和种子影响第36-37页
        3.6.3 PME41和PMEI7对花粉活性和花粉管生长的影响第37-39页
        3.6.4 PME41和PMEI7对花丝生长的影响第39-41页
    3.7 PME41和PMEI7对BR合成相关基因DET2,CPD,DWF4表达的影响第41-43页
    3.8 PME41和PMEI7对BR调节基因表达的影响第43-44页
    3.9 BR对PME/PMEI基因表达的影响第44-45页
    3.10 bri1-5 中过表达PME41根长的变化第45-46页
    3.11 转基因植株根和下胚轴对不同浓度的外源eBL处理的响应第46-49页
第四章 讨论和结果第49-52页
参考文献第52-59页
致谢第59页

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