| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第13-22页 |
| 1.1 植物体内蛋氨酸代谢调节 | 第13-15页 |
| 1.1.1 植物体内蛋氨酸合成 | 第13-14页 |
| 1.1.2 蛋氨酸合成过程中关键酶编码基因CGS表达的调控 | 第14-15页 |
| 1.2 大豆蛋氨酸含量提高的研究进展 | 第15-20页 |
| 1.2.1 肥料对大豆蛋氨酸含量的影响 | 第15-16页 |
| 1.2.2 常规育种方法提高大豆蛋氨酸含量 | 第16页 |
| 1.2.3 蛋氨酸等含硫氨基酸相关QTL发掘 | 第16页 |
| 1.2.4 过表达外源蛋氨酸富含蛋白编码基因提高大豆蛋氨酸含量 | 第16-18页 |
| 1.2.5 过表达外源蛋氨酸合成通路关键酶编码基因提高大豆蛋氨酸含量 | 第18-20页 |
| 1.2.6 过表达外源蛋氨酸富含蛋白编码基因和蛋氨酸合成通路关键酶编码基因的整合 | 第20页 |
| 1.2.7 其他方法对大豆蛋氨酸含量的提高 | 第20页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 硫酸根、蛋氨酸和光照对大豆GmCGS表达的影响 | 第22-38页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 转基因材料DNA提取 | 第22页 |
| 2.1.3 转基因材料PCR检测 | 第22-23页 |
| 2.1.4 不同浓度硫酸根和蛋氨酸处理 | 第23-24页 |
| 2.1.5 不同光照条件处理 | 第24-25页 |
| 2.1.6 样品RNA提取 | 第25页 |
| 2.1.7 第一链cDNA的合成 | 第25-26页 |
| 2.1.8 样品表达量检测 | 第26-27页 |
| 2.2 结果与分析 | 第27-36页 |
| 2.2.1 GmCGS序列分析 | 第27页 |
| 2.2.2 转基因材料PCR检测结果 | 第27页 |
| 2.2.3 硫酸根对GmCGS表达的影响 | 第27-31页 |
| 2.2.4 蛋氨酸对GmCGS表达的影响 | 第31-34页 |
| 2.2.5 外源AtDCGS对GmCGS表达的影响 | 第34-35页 |
| 2.2.6 光照对GmCGS表达的影响 | 第35-36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 过表达 β-Zein转基因材料的创制 | 第38-52页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-46页 |
| 3.1.1 植物材料和菌株 | 第38页 |
| 3.1.2 β-Zein植物表达载体的构建 | 第38-43页 |
| 3.1.3 农杆菌感受态EHA101制备 | 第43页 |
| 3.1.4 EHA101农杆菌电击转化 | 第43-44页 |
| 3.1.5 过表达 β-Zein大豆全株的获得与鉴定 | 第44-46页 |
| 3.2 结果与分析 | 第46-51页 |
| 3.2.1 pTF101.1-35S::β-Zein载体构建 | 第46-48页 |
| 3.2.2 pTF101.1-LB4::β-Zein载体构建 | 第48-50页 |
| 3.2.3 转基因材料的筛选鉴定 | 第50-51页 |
| 3.3 讨论 | 第51-52页 |
| 第四章 过表达 β-Zein和AtDCGS转基因材料的加代、筛选及高代品质检测 | 第52-67页 |
| 4.1 材料与方法 | 第52-56页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第52页 |
| 4.1.2 转基因材料加代及鉴定 | 第52-54页 |
| 4.1.3 转基因材料蛋白水平检测 | 第54-55页 |
| 4.1.4 转基因材料氨基酸含量检测 | 第55-56页 |
| 4.1.5 数据处理 | 第56页 |
| 4.2 结果与分析 | 第56-65页 |
| 4.2.1 除草剂抗性鉴定 | 第56-59页 |
| 4.2.2 目的基因PCR检测 | 第59-60页 |
| 4.2.3 转基因材料转录水平的检测 | 第60-62页 |
| 4.2.4 过表达 β-Zein转基因材料和野生型材料种子总蛋白差异比较 | 第62-63页 |
| 4.2.5 过表达 β-Zein转基因材料氨基酸含量测定 | 第63-65页 |
| 4.3 讨论 | 第65-67页 |
| 第五章 全文结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 附录 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简历 | 第79页 |
