| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-24页 |
| 1.1 异源三聚体G蛋白信号传递系统 | 第14-15页 |
| 1.2 异源三聚体G蛋白α亚基 | 第15-18页 |
| 1.3 木霉菌的生防特性 | 第18-19页 |
| 1.3.1 诱导植物产生抗性 | 第18页 |
| 1.3.2 竞争作用 | 第18-19页 |
| 1.3.3 重寄生作用 | 第19页 |
| 1.3.4 抗生作用 | 第19页 |
| 1.4 木霉菌分生孢子的产生及影响产孢的因素 | 第19-21页 |
| 1.4.1 影响产孢的环境因素 | 第19-20页 |
| 1.4.2 木霉菌产孢相关基因 | 第20-21页 |
| 1.5 木霉菌基因功能研究技术进展 | 第21-23页 |
| 1.5.1 木霉菌遗传转化技术 | 第21-22页 |
| 1.5.2 生物信息学技术 | 第22-23页 |
| 1.6 本研究的目的意义及技术路线 | 第23-24页 |
| 1.6.1 本研究的目的意义 | 第23页 |
| 1.6.2 本研究的技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 哈茨木霉菌TH-33 THGA3基因的克隆分析 | 第24-34页 |
| 2.1 材料和方法 | 第24-29页 |
| 2.1.1 供试菌株和试剂 | 第24页 |
| 2.1.2 引物 | 第24页 |
| 2.1.3 哈茨木霉Th-33 基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.1.4 thga3基因片段的克隆 | 第25页 |
| 2.1.5 thga3基因cDNA序列克隆 | 第25页 |
| 2.1.6 thga3基因的拷贝数的验证 | 第25-29页 |
| 2.1.7 thga3基因生物信息学分析 | 第29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-32页 |
| 2.2.1 thga3基因片段的克隆 | 第29页 |
| 2.2.2 thga3基因拷贝数的验证 | 第29-30页 |
| 2.2.3 thga3基因ORF分析和Blast比对 | 第30页 |
| 2.2.4 Thga3氨基酸理化性质的分析 | 第30-31页 |
| 2.2.5 Thga3系统进化分析 | 第31-32页 |
| 2.3 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 哈茨木霉菌THGA3基因的敲除 | 第34-44页 |
| 3.1 材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 供试菌株和质体 | 第34页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第34页 |
| 3.1.3 培养基 | 第34页 |
| 3.1.4 引物 | 第34-35页 |
| 3.2 方法 | 第35-38页 |
| 3.2.1 敲除载体pkh-koΔthga3的构建（含构建策略） | 第35-37页 |
| 3.2.2 pkh-koΔthga3原生质体转化哈茨木霉菌Th-33 | 第37页 |
| 3.2.3 thga3基因敲除突变株转化子的筛选和分子验证 | 第37-38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-42页 |
| 3.3.1 pkh-koΔthga3构建与验证 | 第38-39页 |
| 3.3.2 thga3基因敲除突变株的获得 | 第39-40页 |
| 3.3.3 thga3基因敲除突变株的筛选和验证 | 第40-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 哈茨木霉THGA3基因的回复 | 第44-57页 |
| 4.1 材料 | 第44-45页 |
| 4.1.1 供试菌株和质粒 | 第44页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第44页 |
| 4.1.3 培养基 | 第44页 |
| 4.1.4 引物 | 第44-45页 |
| 4.2 方法 | 第45-49页 |
| 4.2.1 pkh-ko-G418载体改造 | 第45-46页 |
| 4.2.2 thga3基因回复载体pkh-ko-G418-thga3的构建 | 第46-48页 |
| 4.2.3 pkh-ko-G418-thga3原生质体转化敲除突变株△thga3 | 第48-49页 |
| 4.2.4 thga3基因回复突变株转化子的筛选和分子验证 | 第49页 |
| 4.3 结果与分析 | 第49-56页 |
| 4.3.1 pkh-ko-G418载体构建和验证 | 第49-51页 |
| 4.3.2 thga3基因回复载体pkh-ko-G418-thga3的构建和验证 | 第51-54页 |
| 4.3.3 thga3回复突变株转化子的筛选和分子验证 | 第54-56页 |
| 4.4 讨论 | 第56-57页 |
| 第五章 突变株基础生物学性状分析 | 第57-73页 |
| 5.1 材料 | 第57页 |
| 5.1.1 供试菌株 | 第57页 |
| 5.1.2 所用仪器和试剂 | 第57页 |
| 5.2 方法 | 第57-60页 |
| 5.2.1 生长和产孢 | 第57页 |
| 5.2.2 拮抗活性 | 第57-58页 |
| 5.2.3 对立枯丝核菌重寄生能力的测定 | 第58页 |
| 5.2.4 几丁质酶活测定方法 | 第58页 |
| 5.2.5 疏水性测定 | 第58-59页 |
| 5.2.6 qRT-PCR鉴定相关疏水蛋白基因的表达 | 第59页 |
| 5.2.7 统计分析 | 第59-60页 |
| 5.3 结果 | 第60-72页 |
| 5.3.1 形态，生长和产孢比较 | 第60-61页 |
| 5.3.2 拮抗活性 | 第61-64页 |
| 5.3.3 对立枯丝核菌重寄生性 | 第64-65页 |
| 5.3.4 几丁质酶活测定 | 第65-66页 |
| 5.3.5 疏水性测定 | 第66-67页 |
| 5.3.6 疏水蛋白的基因表达 | 第67-72页 |
| 5.4 讨论 | 第72-73页 |
| 第六章 野生型TH-33 及 ΔTHGA3的转录组测序和分析 | 第73-89页 |
| 6.1 材料 | 第73页 |
| 6.1.1 供试菌株 | 第73页 |
| 6.2 方法 | 第73-74页 |
| 6.2.1 取样时间的确定 | 第73页 |
| 6.2.2 总RNA的提取 | 第73页 |
| 6.2.3 cDNA文库的构建和测序 | 第73-74页 |
| 6.2.4 差异表达基因的分析 | 第74页 |
| 6.3 结果和分析 | 第74-87页 |
| 6.3.1 取样时间的确定 | 第74页 |
| 6.3.2 RNA提取及测序文库的构建 | 第74-75页 |
| 6.3.3 原始测序数据质量分析 | 第75-79页 |
| 6.3.4 基因注释和表达定量分析 | 第79-80页 |
| 6.3.5 差异表达基因的分析 | 第80页 |
| 6.3.6 差异基因聚类分析(Exp-cluster) | 第80-81页 |
| 6.3.7 差异表达基因的GO富集分析 | 第81-82页 |
| 6.3.8 差异表达基因的KEGG代谢途径的富集分析 | 第82-83页 |
| 6.3.9 G蛋白信号途径相关基因的分析 | 第83-85页 |
| 6.3.10 细胞壁相关酶基因的差异表达 | 第85-86页 |
| 6.3.11 产孢调控因子 | 第86页 |
| 6.3.12 疏水蛋白基因 | 第86-87页 |
| 6.4 讨论 | 第87-89页 |
| 第七章 全文总结 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 作者简历 | 第103页 |
