摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-34页 |
·纤维素酶研究进展 | 第12-24页 |
·纤维素简介 | 第12-13页 |
·纤维素酶的结构与功能 | 第13-16页 |
·纤维素酶的来源 | 第16-17页 |
·纤维素酶的应用 | 第17-22页 |
·纤维素酶基因工程研究进展 | 第22-24页 |
·乳酸杆菌研究进展 | 第24-31页 |
·乳酸杆菌简介 | 第25-26页 |
·乳酸杆菌的来源 | 第26页 |
·乳酸杆菌基因工程进展 | 第26-28页 |
·乳酸杆菌的应用 | 第28-31页 |
·雏鸡日粮纤维素酶和乳酸杆菌研究进展 | 第31-32页 |
·雏鸡日粮中的粗纤维 | 第31页 |
·雏鸡消化道乳酸杆菌 | 第31-32页 |
·本研究的目的及意义 | 第32-33页 |
·克隆纤维素酶基因使之在乳酸杆菌中表达 | 第32页 |
·将重组乳酸杆菌定植到鸡消化道分泌纤维素酶 | 第32-33页 |
·建立成套的技术体系 | 第33页 |
·本研究的技术路线 | 第33-34页 |
第二章 纤维素酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 | 第34-54页 |
·材料与方法 | 第34-43页 |
·材料 | 第34-36页 |
·方法(Sambrook et al. 1989) | 第36-43页 |
·结果与分析 | 第43-51页 |
·纤维素酶产生菌的筛选 | 第43-44页 |
·葡萄糖标准曲线的绘制 | 第44-45页 |
·菌株的生长曲线和产酶能力分析 | 第45-46页 |
·细菌形态学鉴定 | 第46页 |
·细菌16SrDNA 序列扩增与分析 | 第46-47页 |
·纤维素酶基因的克隆 | 第47-48页 |
·纤维素酶基因序列分析 | 第48-49页 |
·纤维素酶基因的原核表达 | 第49-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
·纤维素分解菌的鉴定 | 第51页 |
·枯草芽孢杆菌纤维素酶基因的克隆 | 第51-52页 |
·纤维素酶基因的表达 | 第52页 |
·小结 | 第52-54页 |
第三章 鸡肠道乳酸杆菌的筛选与鉴定 | 第54-60页 |
·材料与方法 | 第54-55页 |
·材料 | 第54-55页 |
·方法 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-58页 |
·乳酸杆菌筛选结果 | 第55-56页 |
·鸡消化道乳酸杆菌的鉴定 | 第56-58页 |
·鸡消化道乳酸杆菌的类群 | 第58页 |
·讨论 | 第58-59页 |
·鸡消化道乳酸杆菌分布 | 第58-59页 |
·乳酸杆菌鉴定 | 第59页 |
·小结 | 第59-60页 |
第四章 整合型表达载体的构建 | 第60-69页 |
·材料与方法 | 第61-65页 |
·材料 | 第61-62页 |
·方法 | 第62-65页 |
·结果与分析 | 第65-67页 |
·质粒pLEM4151 的构建 | 第65-66页 |
·质粒pLEM4152 的构建 | 第66页 |
·质粒pLEM4153 和pLEM4154 的构建 | 第66-67页 |
·讨论 | 第67-68页 |
·整合载体构建 | 第67页 |
·同源序列的克隆 | 第67-68页 |
·启动子的筛选 | 第68页 |
·小结 | 第68-69页 |
第五章 纤维素酶基因在乳酸杆菌中的整合表达 | 第69-81页 |
·材料与方法 | 第69-73页 |
·材料 | 第69-70页 |
·方法 | 第70-73页 |
·结果与分析 | 第73-78页 |
·整合载体pLEM4153 和pLEM4154 在乳酸杆菌基因组中的整合 | 第73-74页 |
·纤维素酶基因在重组乳酸杆菌中的表达检测 | 第74-78页 |
·讨论 | 第78-79页 |
·整合条件的优化 | 第78-79页 |
·重组乳酸杆菌的检测 | 第79页 |
·表达产物的检测 | 第79页 |
·mRNA 水平检测整合效果 | 第79页 |
·小结 | 第79-81页 |
第六章 重组乳酸杆菌的黏附及消化道定植试验 | 第81-90页 |
·材料与方法 | 第81-84页 |
·材料 | 第81-82页 |
·方法 | 第82-84页 |
·结果与分析 | 第84-88页 |
·重组乳酸杆菌对小肠上皮细胞的黏附 | 第84-85页 |
·重组乳酸杆菌在鸡肠道的定植 | 第85-86页 |
·不同处理对体增重的影响 | 第86-88页 |
·不同处理对饲料粗纤维消化率的影响 | 第88页 |
·讨论 | 第88-89页 |
·重组乳酸杆菌体外黏附试验 | 第88页 |
·重组乳酸杆菌消化道定植 | 第88-89页 |
·重组菌定植对鸡生长性能和粗纤维消化率的影响 | 第89页 |
·小结 | 第89-90页 |
第七章 结论 | 第90-92页 |
·研究结论 | 第90页 |
·本研究创新点 | 第90-91页 |
·还需深入研究的内容 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-109页 |
附录 | 第109-111页 |
附录一 | 第109-111页 |
纤维素酶基因Cel15 序列 | 第109页 |
纤维素酶基因Cel73 序列 | 第109-111页 |
缩略词 | 第111-112页 |
致谢 | 第112-113页 |
作者简介 | 第113页 |