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纤维素酶基因重组野生型乳酸杆菌表达系统的构建

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-34页
   ·纤维素酶研究进展第12-24页
     ·纤维素简介第12-13页
     ·纤维素酶的结构与功能第13-16页
     ·纤维素酶的来源第16-17页
     ·纤维素酶的应用第17-22页
     ·纤维素酶基因工程研究进展第22-24页
   ·乳酸杆菌研究进展第24-31页
     ·乳酸杆菌简介第25-26页
     ·乳酸杆菌的来源第26页
     ·乳酸杆菌基因工程进展第26-28页
     ·乳酸杆菌的应用第28-31页
   ·雏鸡日粮纤维素酶和乳酸杆菌研究进展第31-32页
     ·雏鸡日粮中的粗纤维第31页
     ·雏鸡消化道乳酸杆菌第31-32页
   ·本研究的目的及意义第32-33页
     ·克隆纤维素酶基因使之在乳酸杆菌中表达第32页
     ·将重组乳酸杆菌定植到鸡消化道分泌纤维素酶第32-33页
     ·建立成套的技术体系第33页
   ·本研究的技术路线第33-34页
第二章 纤维素酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达第34-54页
   ·材料与方法第34-43页
     ·材料第34-36页
     ·方法(Sambrook et al. 1989)第36-43页
   ·结果与分析第43-51页
     ·纤维素酶产生菌的筛选第43-44页
     ·葡萄糖标准曲线的绘制第44-45页
     ·菌株的生长曲线和产酶能力分析第45-46页
     ·细菌形态学鉴定第46页
     ·细菌16SrDNA 序列扩增与分析第46-47页
     ·纤维素酶基因的克隆第47-48页
     ·纤维素酶基因序列分析第48-49页
     ·纤维素酶基因的原核表达第49-51页
   ·讨论第51-52页
     ·纤维素分解菌的鉴定第51页
     ·枯草芽孢杆菌纤维素酶基因的克隆第51-52页
     ·纤维素酶基因的表达第52页
   ·小结第52-54页
第三章 鸡肠道乳酸杆菌的筛选与鉴定第54-60页
   ·材料与方法第54-55页
     ·材料第54-55页
     ·方法第55页
   ·结果与分析第55-58页
     ·乳酸杆菌筛选结果第55-56页
     ·鸡消化道乳酸杆菌的鉴定第56-58页
     ·鸡消化道乳酸杆菌的类群第58页
   ·讨论第58-59页
     ·鸡消化道乳酸杆菌分布第58-59页
     ·乳酸杆菌鉴定第59页
   ·小结第59-60页
第四章 整合型表达载体的构建第60-69页
   ·材料与方法第61-65页
     ·材料第61-62页
     ·方法第62-65页
   ·结果与分析第65-67页
     ·质粒pLEM4151 的构建第65-66页
     ·质粒pLEM4152 的构建第66页
     ·质粒pLEM4153 和pLEM4154 的构建第66-67页
   ·讨论第67-68页
     ·整合载体构建第67页
     ·同源序列的克隆第67-68页
     ·启动子的筛选第68页
   ·小结第68-69页
第五章 纤维素酶基因在乳酸杆菌中的整合表达第69-81页
   ·材料与方法第69-73页
     ·材料第69-70页
     ·方法第70-73页
   ·结果与分析第73-78页
     ·整合载体pLEM4153 和pLEM4154 在乳酸杆菌基因组中的整合第73-74页
     ·纤维素酶基因在重组乳酸杆菌中的表达检测第74-78页
   ·讨论第78-79页
     ·整合条件的优化第78-79页
     ·重组乳酸杆菌的检测第79页
     ·表达产物的检测第79页
     ·mRNA 水平检测整合效果第79页
   ·小结第79-81页
第六章 重组乳酸杆菌的黏附及消化道定植试验第81-90页
   ·材料与方法第81-84页
     ·材料第81-82页
     ·方法第82-84页
   ·结果与分析第84-88页
     ·重组乳酸杆菌对小肠上皮细胞的黏附第84-85页
     ·重组乳酸杆菌在鸡肠道的定植第85-86页
     ·不同处理对体增重的影响第86-88页
     ·不同处理对饲料粗纤维消化率的影响第88页
   ·讨论第88-89页
     ·重组乳酸杆菌体外黏附试验第88页
     ·重组乳酸杆菌消化道定植第88-89页
     ·重组菌定植对鸡生长性能和粗纤维消化率的影响第89页
   ·小结第89-90页
第七章 结论第90-92页
   ·研究结论第90页
   ·本研究创新点第90-91页
   ·还需深入研究的内容第91-92页
参考文献第92-109页
附录第109-111页
 附录一第109-111页
  纤维素酶基因Cel15 序列第109页
  纤维素酶基因Cel73 序列第109-111页
缩略词第111-112页
致谢第112-113页
作者简介第113页

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