| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 引言 | 第8-18页 |
| 1. 昆虫的先天免疫研究 | 第8-10页 |
| 2. PDV在昆虫免疫抑制中的作用 | 第10-11页 |
| 3. NF-κB信号通路 | 第11-13页 |
| 3.1. NF-κB | 第11-12页 |
| 3.2 Vankyrin | 第12-13页 |
| 3.3 Relish | 第13页 |
| 3.4 Dorsal | 第13页 |
| 3.5 Cactus | 第13页 |
| 4. NF-κB信号通路在细胞凋亡中的研究 | 第13-14页 |
| 4.1 NF-κB信号通路在昆虫细胞凋亡中的研究概况 | 第14页 |
| 5. eIF4F翻译启始因子的组成以及在免疫抑制中的作用 | 第14-16页 |
| 6. 本研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 材料与方法 | 第18-40页 |
| 1. 材料 | 第18-22页 |
| 1.1 斜纹夜蛾Spodoptera litura | 第18页 |
| 1.2 双斑侧沟茧蜂Microplitis bicoloratus | 第18页 |
| 1.3 昆虫细胞 | 第18页 |
| 1.4 质粒和受体菌株 | 第18页 |
| 1.5 限制性内切酶及其他酶类 | 第18页 |
| 1.6 试剂盒及抗体 | 第18-19页 |
| 1.7 其他主要试剂 | 第19-20页 |
| 1.8 培养基 | 第20页 |
| 1.9 缓冲液 | 第20-21页 |
| 1.10 主要设备 | 第21-22页 |
| 2. 方法 | 第22-40页 |
| 2.1 目的基因的克隆 | 第22-25页 |
| 2.2 pMD19-T-Vankyrin101载体的构建 | 第25-27页 |
| 2.3 质粒的提取(普通用) | 第27-29页 |
| 2.4 原核表达质粒构建流程示意图 | 第29-31页 |
| 2.5 真核表达质粒构建流程示意图 | 第31-32页 |
| 2.6 质粒的提取(转染用) | 第32-33页 |
| 2.7 转染 | 第33页 |
| 2.8 Western blot | 第33-34页 |
| 2.9 免疫荧光 | 第34-35页 |
| 2.10 PDV病毒的DNA提取 | 第35-36页 |
| 2.11 PDV的扩增 | 第36页 |
| 2.12 PDV感染Spli221 | 第36页 |
| 2.13 Real-time RT-PCR | 第36-40页 |
| 结果 | 第40-68页 |
| 1. 寄主的NF-κB和PDV病毒IκB-like基因在寄生后血淋巴的转录水平 | 第40-49页 |
| 1.1 转录组数据分析 | 第40页 |
| 1.2 NF-κB家族进化树和保守结构域 | 第40-42页 |
| 1.3 寄生对NF-κB转录的影响 | 第42-47页 |
| 1.4 PDV病毒粒子对寄主NF-κB和病毒IκB-like的转录影响 | 第47-49页 |
| 2. Vankyrin101的克隆表达以及功能研究 | 第49-56页 |
| 2.1 Vankyrin101原核表达载体构建 | 第49-52页 |
| 2.2 Vankyrin101真核表达载体构建 | 第52-55页 |
| 2.3 Vankyrin101的蛋白定位 | 第55-56页 |
| 3. 双斑侧沟茧蜂病毒调控寄主翻译起始因子eIF4F | 第56-68页 |
| 3.1 翻译起始因子eIF4F转录组数据分析 | 第56-57页 |
| 3.2 寄主下调翻译起始因子eIF4F的转录 | 第57-59页 |
| 3.3 PDV病毒粒子下调翻译起始因子eIF4F转录 | 第59-60页 |
| 3.4 eIF4F复合体成员的蛋白表达 | 第60-62页 |
| 3.5 elF4A的组织分布及表达 | 第62-64页 |
| 3.6 eIF4A与ATPaseβ的相互关系 | 第64-68页 |
| 讨论 | 第68-72页 |
| 结论 | 第72-74页 |
| 1. PDV病毒IκB-like基因与寄主的NF-κB信号通路的免疫反应相关 | 第72页 |
| 2. Vankyrin101可以破坏细胞骨架,导致细胞凋亡 | 第72页 |
| 3. PDV病毒可以下调eIF4F基因的在转录和翻译表达 | 第72页 |
| 4. eIF4A在脂肪体和卵巢中的表达量最高,表明eIF4A与免疫反应和斜纹夜蛾的生殖相关 | 第72页 |
| 5. eIF4A与ATPaseβ在免疫反应过程中存在紧密联系 | 第72-73页 |
| 6. 对下一步工作的建议 | 第73-74页 |
| 附录1 Vankyrin101的pET32a和pIZT/V5-His的引物设计 | 第74-77页 |
| 附录2 eIF4F基因序列 | 第77-81页 |
| 附录3 斜纹夜蛾部分组织解剖图 | 第81-84页 |
| 附录4 SpliInx2和SpliInx3组织表达 | 第84-85页 |
| 研究的不足与展望 | 第85-86页 |
| 研究的创新之处 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-93页 |
| 在读期间发表文章及获奖情况 | 第93-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
