| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 材料和方法 | 第12-25页 |
| 1.实验动物 | 第12页 |
| 2.小鼠基因鉴定 | 第12-14页 |
| 2.1 试剂及溶液的配制 | 第12-13页 |
| 2.2 实验仪器 | 第13页 |
| 2.3 小鼠基因鉴定PCR | 第13-14页 |
| 3.免疫荧光实验方法 | 第14-15页 |
| 3.1 试剂及溶液的配制 | 第14-15页 |
| 3.2 实验仪器 | 第15页 |
| 3.3 操作步骤 | 第15页 |
| 4.GHS-R1a基因敲除率检测 | 第15-18页 |
| 4.1 试剂及溶液的配制 | 第15-16页 |
| 4.2 实验仪器 | 第16页 |
| 4.3 提取RNA操作步骤 | 第16-17页 |
| 4.4 RNA逆转录 | 第17页 |
| 4.5 Real-time qRT-PCR鉴定GHS-R1a敲除率 | 第17-18页 |
| 5.离体钙成像技术 | 第18-19页 |
| 5.1 试剂及溶液的配制 | 第18页 |
| 5.2 仪器 | 第18页 |
| 5.3 实验步骤 | 第18-19页 |
| 6.海马神经元原代培养 | 第19-20页 |
| 6.1 试剂及溶液的配制 | 第19页 |
| 6.2 仪器 | 第19页 |
| 6.3 实验步骤 | 第19-20页 |
| 7.慢性反复禁锢模型 | 第20页 |
| 8.行为学测试 | 第20-21页 |
| 8.1 试剂及溶液的配制 | 第20页 |
| 8.2 实验仪器 | 第20-21页 |
| 8.3 行为学范式 | 第21页 |
| 9.过表达 GHS-R1a 的腺相关病毒脑区定位注射 | 第21-24页 |
| 9.1 试剂及溶液的配制 | 第21-22页 |
| 9.2 实验仪器 | 第22页 |
| 9.3 小鼠特定脑区病毒注射 | 第22-23页 |
| 9.4 确认定位注射位置及感染效果 | 第23页 |
| 9.5 病毒介导的hGHS-R1a表达率测定 | 第23-24页 |
| 9.6 行为学实验流程 | 第24页 |
| 9.7.实验分组 | 第24页 |
| 10.统计学处理 | 第24-25页 |
| 实验结果 | 第25-39页 |
| 1.小鼠基因型鉴定 | 第25页 |
| 2.慢性禁锢应激对WT小鼠不同脑区ghrelin及内源性GHS-R1a表达的影响 | 第25-27页 |
| 3. GHS-R1a KO小鼠实验 | 第27-30页 |
| 3.1 GHS-R1a KO小鼠相关脑区内源性GHS-R1a受体的表达 | 第27页 |
| 3.2 WT和GHS-R1a KO小鼠基础焦虑相关行为测试 | 第27-28页 |
| 3.3 慢性禁锢后WT和GHS-R1a KO小鼠的焦虑相关行为测试 | 第28-30页 |
| 4. AAV病毒介导的在体hGHS-R1a过表达实验 | 第30-39页 |
| 4.1 免疫染色验证AAV病毒注射位置及脑区感染情况 | 第31-32页 |
| 4.2 AAV病毒介导的hGHS-R1a在mPFC和BLA的表达量测定 | 第32页 |
| 4.3 AAV病毒介导的hGHS-R1a过表达对培养的海马神经元胞内[Ca~(2+)]影响 | 第32-33页 |
| 4.4 mPFC兴奋性神经元过表达hGHS-R1a对WT小鼠基础焦虑相关行为的影响 | 第33-35页 |
| 4.5 mPFC兴奋性神经元过表达hGHS-R1a对慢性禁锢WT小鼠焦虑相关行为障碍的影响 | 第35-37页 |
| 4.6 BLA兴奋性神经元过表达hGHS-R1a对WT小鼠基础焦虑相关行为的影响 | 第37-38页 |
| 4.7 BLA兴奋性神经元过表达hGHS-R1a对慢性禁锢WT小鼠焦虑相关行为障碍的影响 | 第38-39页 |
| 讨论 | 第39-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 综述 | 第47-61页 |
| 综述参考文献 | 第53-61页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第61-62页 |
| 缩略词表 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
