| 摘要 | 第3-6页 |
| abstract | 第6-9页 |
| 第1章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 精子中的RNA | 第12-13页 |
| 1.2 精子RNA的功能 | 第13-15页 |
| 1.3 LncRNA概论 | 第15-17页 |
| 1.4 弱精症概况 | 第17-18页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 第2章 材料与方法 | 第19-28页 |
| 2.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.1 实验样本 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-28页 |
| 2.2.1 Percoll密度梯度离心法纯化人精子 | 第19页 |
| 2.2.2 精子纯化 | 第19-20页 |
| 2.2.3 精子总RNA提取 | 第20-21页 |
| 2.2.4 RNA反转录 | 第21页 |
| 2.2.5 PCR | 第21-23页 |
| 2.2.6 荧光定量PCR（QPCR） | 第23页 |
| 2.2.7 文库制备与深度测序 | 第23页 |
| 2.2.8 生物信息学分析 | 第23-24页 |
| 2.2.9 FISH（荧光原位杂交技术） | 第24页 |
| 2.2.10 所用引物信息 | 第24-26页 |
| 2.2.11 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.12 主要仪器 | 第27页 |
| 2.2.13 数据分析 | 第27-28页 |
| 第3章 实验结果 | 第28-56页 |
| 3.1 人成熟精子RNA的纯度鉴定和大小分布 | 第28-31页 |
| 3.1.1 人成熟精子纯化 | 第28页 |
| 3.1.2 人成熟精子RNA的纯度鉴定 | 第28-29页 |
| 3.1.3 人成熟精子RNA的完整性检测 | 第29-31页 |
| 3.2 人成熟精子中lncRNA的表征 | 第31-36页 |
| 3.2.1 测序数据统计 | 第31-32页 |
| 3.2.2 mapping率 | 第32-34页 |
| 3.2.3 转录本的编码能力预测 | 第34-35页 |
| 3.2.4 样品间相关性检查 | 第35-36页 |
| 3.3 人成熟精子lncRNA的表达谱 | 第36-38页 |
| 3.4 人成熟精子中lncRNA的初步验证 | 第38-39页 |
| 3.5 人成熟精子中组织特异性和保守性lncRNA的分析 | 第39-41页 |
| 3.6 正常精子样本和弱精样本之间差异表达基因的富集分析 | 第41-51页 |
| 3.7 弱精症相关分子标志物lncRNA的初步筛选 | 第51-53页 |
| 3.8 弱精症相关分子标志物lncRNA的临床大样本验证 | 第53-56页 |
| 第4章 讨论 | 第56-59页 |
| 第5章 结论与展望 | 第59-61页 |
| 5.1 结论 | 第59页 |
| 5.2 进一步工作的方向 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 附录 | 第66-69页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第69-70页 |
| 综述 | 第70-78页 |
| 参考文献 | 第76-78页 |
