| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 绪论 | 第12-18页 |
| ·研究背景 | 第12-16页 |
| ·鹿茸的生长周期及形态变化 | 第12页 |
| ·鹿茸发生和再生的组织来源 | 第12-13页 |
| ·鹿茸干细胞标记物及其微环境 | 第13-14页 |
| ·调节鹿茸再生的生长因子 | 第14-15页 |
| ·鹿茸干细胞和邻近细胞的相互作用 | 第15页 |
| ·S100A4 蛋白的结构特点 | 第15-16页 |
| ·S100A4 蛋白的目标蛋白及其在肿瘤发生中的作用 | 第16页 |
| ·该实验的研究意义 | 第16-17页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第17-18页 |
| 第2章 梅花鹿鹿茸干细胞 S100A4 基因的克隆 | 第18-22页 |
| ·材料与方法 | 第18-20页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·S100A4 基因的引物设计PCR 扩增目的基因片段 | 第18-19页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第19页 |
| ·胶回收PCR 产物 | 第19-20页 |
| ·实验结果 | 第20-21页 |
| ·PCR 扩增结果 | 第20-21页 |
| ·PCR 产物切胶回收结果图 | 第21页 |
| ·本章小结 | 第21-22页 |
| 第3章 S100A4 基因重组质粒的构建 | 第22-29页 |
| ·材料与方法 | 第22-26页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·S100A4 基因和PGEX-6P-1 载体双酶切 | 第22-23页 |
| ·酶切后的S100A4 基因片段和PGEX-6P-1 片段连接 | 第23页 |
| ·Top10F’感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
| ·将连接产物转化进Top10F’感受态细胞中 | 第24页 |
| ·菌液PCR 鉴定重组子 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的提取 | 第25-26页 |
| ·双酶切鉴定 | 第26页 |
| ·将上述鉴定结果为阳性的菌株进行基因测序 | 第26页 |
| ·实验结果 | 第26-27页 |
| ·菌液PCR 鉴定结果 | 第26-27页 |
| ·双酶切鉴定结果 | 第27页 |
| ·基因测序鉴定 | 第27页 |
| ·本章小结 | 第27-29页 |
| 第4章 S100A4 目的基因的表达、鉴定及纯化 | 第29-40页 |
| ·材料与方法 | 第29-35页 |
| ·主要试剂和材料 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·重组质粒转入表达菌株 | 第29-30页 |
| ·菌液PCR 鉴定 | 第30页 |
| ·BL21（DE3）pLys S 重组菌的IPTG 诱导表达 | 第30页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第30-31页 |
| ·蛋白质Marker 的制备 | 第31-32页 |
| ·菌液上清处理 | 第32页 |
| ·样品处理 | 第32页 |
| ·上样电泳 | 第32-33页 |
| ·固定染色和脱色 | 第33页 |
| ·超声波破碎大肠杆菌 | 第33页 |
| ·超声波破碎后的上清进行SDS-PAGE | 第33页 |
| ·Western blot 鉴定 | 第33-34页 |
| ·扩大培养并纯化蛋白 | 第34-35页 |
| ·实验结果 | 第35-38页 |
| ·对菌体沉淀和培养上清的SDS-PAGE 分析 | 第35-36页 |
| ·超声波破碎大肠杆菌取上清SDS-PAGE | 第36-37页 |
| ·Western blot 鉴定 | 第37-38页 |
| ·S100A4-GST 融合蛋白的纯化 | 第38页 |
| ·本章小结 | 第38-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 附录 | 第45-48页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 大摘要 | 第50-52页 |
