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黄花蒿EβF合成酶基因及麦长管蚜蜕皮素受体基因USP和EcR的克隆和遗传转化

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
英文缩略表第7-8页
目录第8-10页
1 引言第10-21页
    1.1 麦蚜的危害和防治第10-14页
        1.1.1 麦蚜的发生特点第10-11页
        1.1.2 麦蚜对小麦的危害第11-12页
        1.1.3 麦蚜的防治方法第12-14页
    1.2 植物萜类代谢和 EβF第14-15页
        1.2.1 植物萜类代谢概述第14页
        1.2.2 EβF第14-15页
    1.3 RNA 干扰的原理和研究现状第15-17页
        1.3.1 RNAi 的原理第15-16页
        1.3.2 RNAi 的研究现状第16-17页
    1.4 蚜虫蜕皮激素第17-19页
        1.4.1 蜕皮激素概述第17-18页
        1.4.2 蜕皮激素受体的结构和功能第18页
        1.4.3 蜕皮激素与受体的作用方式第18-19页
    1.5 本研究的目的和意义第19-21页
2 黄花蒿 EβF 合成酶转基因小麦研究第21-38页
    2.1 实验材料第21-22页
        2.1.1 植物材料第21页
        2.1.2 载体第21页
        2.1.3 试剂和耗材第21-22页
        2.1.4 培养基第22页
    2.2 实验方法第22-27页
        2.2.1 载体构建第22-23页
        2.2.2 农杆菌的活化和制备第23-24页
        2.2.3 小麦遗传转化第24-27页
        2.2.4 转基因小麦鉴定第27页
    2.3 结果与分析第27-36页
        2.3.1 载体 pClean‐G185‐Ubi‐CTP‐HHH‐Nos 的鉴定第27-28页
        2.3.2 农杆菌活化和检测第28-29页
        2.3.3 小麦遗传转化第29-34页
        2.3.4 转基因植株阳性检测第34-36页
    2.4 讨论第36-38页
        2.4.1 小麦遗传转化的方法和效率第36-37页
        2.4.2 EβF 合成酶基因的选择第37-38页
3 麦长管蚜蜕皮素受体 USP 和 EcR 的 RNAi 研究第38-56页
    3.1 实验材料第38-41页
        3.1.1 植物材料第38页
        3.1.2 蚜虫第38页
        3.1.3 质粒第38页
        3.1.4 常用试剂第38页
        3.1.5 蚜虫营养液第38-41页
    3.2 实验方法第41-46页
        3.2.1 蜕皮素受体基因 EcR 和 USP 的克隆及鉴定第41-43页
        3.2.2 dsRNA 合成第43页
        3.2.3 dsRNA 纯化第43页
        3.2.4 dsRNA 饲喂蚜虫试验第43-44页
        3.2.5 总 RNA 提取第44-45页
        3.2.6 RT‐PCR第45页
        3.2.7 qRT‐PCR第45-46页
    3.3 结果与分析第46-51页
        3.3.1 麦长管蚜 USP 和 EcR 基因的克隆第46-48页
        3.3.2 麦长管蚜 USP 和 EcR dsRNA 合成及纯化第48-49页
        3.3.3 蚜虫死亡率分析第49-50页
        3.3.4 qRT‐PCR 分析第50-51页
    3.4 讨论第51-56页
        3.4.1 蚜虫的接种和饲喂第51-52页
        3.4.2 dsRNA 在蚜虫体内的传递第52-53页
        3.4.3 dsRNA 导入蚜虫体内的方法第53-54页
        3.4.4 EcR 和 USP 介导的信号传导第54-56页
4 结论第56-57页
参考文献第57-65页
附录第65-67页
在读期间发表的学术论文第67-68页
作者简介第68-69页
致谢第69-70页

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