| 第一章 前言 | 第10-45页 |
| 第一节 蛋白质酪氨酸磷酸化概述 | 第10-17页 |
| 1 蛋白质酪氨酸磷酸化的意义 | 第10-11页 |
| 2 蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTP) | 第11-17页 |
| 2.1 PTP 的发现阶段 | 第11-12页 |
| 2.2 PTP 家族及其结构特点 | 第12-13页 |
| 2.3 PTP 与疾病的关系 | 第13-15页 |
| 2.4 PTP 作为治疗靶点的前景 | 第15-17页 |
| 第二节 结肠癌概述 | 第17-25页 |
| 1 结肠癌发病的诱因和症状 | 第17-18页 |
| 2 与结肠癌转移相关的基因和蛋白质 | 第18-25页 |
| 2.1 IV 型胶原与结肠癌 | 第19-20页 |
| 2.2 CD44 与结肠癌 | 第20-21页 |
| 2.3 Smad4 与结肠癌 | 第21-22页 |
| 2.4 MADR2 和 DCC 与结肠癌 | 第22-23页 |
| 2.5 PTEN | 第23-24页 |
| 2.6 PRL-3 与结肠癌 | 第24-25页 |
| 第三节 酪氨酸磷酸酶 PRL-3 的概述 | 第25-29页 |
| 1 PRL-3 的发现 | 第25页 |
| 2 PRLs 家族及其结构特点 | 第25-28页 |
| 3 PRL-3 与结肠癌转移的关系 | 第28页 |
| 4 PRL-3 作为治疗靶点的前景 | 第28-29页 |
| 第四节 大蒜素 | 第29-33页 |
| 1 近代研究发现大蒜有六大保健功效 | 第29页 |
| 2 现代研究证实大蒜的医疗活性主要成分 | 第29-30页 |
| 3 大蒜抑制肿瘤作用 | 第30页 |
| 4 大蒜防治肿瘤机理 | 第30-33页 |
| 第五节 本论文的设想、研究目的和理论意义 | 第33-36页 |
| 1 本论文的设想 | 第33-35页 |
| 2 研究目的和理论意义 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-45页 |
| 第二章 PRLs 的分子克隆、表达、纯化和表征 | 第45-73页 |
| 第一节 PRLs 的分子克隆 | 第47-57页 |
| 1 实验材料 | 第47-48页 |
| 2 实验方法 | 第48-54页 |
| 2.1 PCR 克隆PRLs cDNA | 第48-49页 |
| 2.2 PRLs cDNA 回收 | 第49-50页 |
| 2.3 PRLs cDNA 与pBluescript II KS 质粒连接得到pKS-PRLs | 第50页 |
| 2.4 用氯化钙制备和转化大肠杆菌(DH5a)感受态细胞 | 第50-52页 |
| 2.5 提取pKS-PRLs 质粒 | 第52-53页 |
| 2.6 构建pGex-2T-PRLs 质粒 | 第53-54页 |
| 3 结果与讨论 | 第54-57页 |
| 第二节 PRLs 的表达和纯化 | 第57-65页 |
| 1 实验材料 | 第57-58页 |
| 2 实验方法 | 第58-62页 |
| 2.1 重组工程菌的培养和PRLs 的纯化 | 第58-59页 |
| 2.2 蛋白浓度测定 | 第59-60页 |
| 2.3 酶活力分析 | 第60页 |
| 2.4 纯度鉴定 | 第60-62页 |
| 3 结果与讨论 | 第62-65页 |
| 第三节 PRLs 的表征 | 第65-71页 |
| 1 实验材料 | 第65页 |
| 2 实验方法 | 第65-67页 |
| 2.1 温度对PRLs 酶活力的影响试验 | 第65页 |
| 2.2 pH 对 PRLs 酶活力的影响试验 | 第65-66页 |
| 2.3 离子强度对PRLs 酶活力的影响试验 | 第66页 |
| 2.4 PRLs 酶动力学常数的表征 | 第66-67页 |
| 2.5 不同金属阳离子对PRLs 酶的影响 | 第67页 |
| 3 结果与讨论 | 第67-71页 |
| 本章小结 | 第71页 |
| 参考文献 | 第71-73页 |
| 第三章 PRLs 多克隆抗体的制备和结肠癌细胞、结肠癌组织与正常结肠组织中 PRLs 表达的分析 | 第73-88页 |
| 第一节 制备 PRLs 多克隆抗体 | 第75-77页 |
| 1 实验材料 | 第75页 |
| 2 实验方法 | 第75-76页 |
| 2.1 PRLs 多克隆抗体的制备 | 第75页 |
| 2.2 PRLs 多克隆抗体的纯化 | 第75-76页 |
| 2.3 CLEIA(化学发光免疫法)检测 PRLs 抗体效价 | 第76页 |
| 3 结果与讨论 | 第76-77页 |
| 第二节 分析结肠癌细胞、组织和正常结肠组织中的PRLs 的表达 | 第77-86页 |
| 1 实验材料 | 第77-78页 |
| 2 实验方法 | 第78-82页 |
| 2.1 使用纯化的抗 PRLs 的多克隆抗体,应用 Western blotting 技术分析结肠癌细胞SW480 和SW620 中的PRLs 的表达 | 第78-81页 |
| 2.2 使用纯化的抗 PRLs 的多克隆抗体,应用免疫组化技术分析结肠癌组织中的PRLs 酶的表达和在结肠组织中的定位 | 第81-82页 |
| 3 结果与讨论 | 第82-86页 |
| 本章小结 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-88页 |
| 第四章 PRLs 对结肠癌细胞扩散、粘附和增殖的影响 | 第88-105页 |
| 第一节 PRLs 的分子克隆、细胞培养和转染 | 第89-97页 |
| 1 实验材料 | 第89-90页 |
| 2 实验方法 | 第90-95页 |
| 2.1 用PCR 技术定点突变制备pKS-PRLsm(C1045) | 第90-92页 |
| 2.2 回收pKS-PRLsm | 第92页 |
| 2.3 用BamHI | 第92-93页 |
| 2.4 转染和筛选高表达PRLs 和PRLsm 的SW480 和SW620 细胞株 | 第93-94页 |
| 2.5 使用纯化的抗PRLs 的多克隆抗体,应用Western blotting 技术分析转染后SW480 和SW-620 中的PRLs 酶的表达 | 第94-95页 |
| 3 结果与讨论 | 第95-97页 |
| 第二节 转染PRLs 对SW480 和 SW620 细胞的扩散、粘附和增殖的影响 | 第97-104页 |
| 1 实验材料 | 第97-98页 |
| 2 实验方法 | 第98-99页 |
| 2.1 转染PRLs 的结肠癌细胞SW480 和SW620 的培养 | 第98页 |
| 2.2 PRLs 对SW480 和SW620 细胞扩散影响的试验 | 第98页 |
| 2.3 PRLs 对SW480 和SW620 细胞粘附影响的试验 | 第98-99页 |
| 2.4 PRLs 对SW480 和SW620 细胞增殖影响的试验 | 第99页 |
| 3 结果与讨论 | 第99-104页 |
| 本章小结 | 第104页 |
| 参考文献 | 第104-105页 |
| 第五章 大蒜提取液抑制人结肠癌细胞SW480 和SW620 的增殖和扩散 | 第105-112页 |
| 1 实验材料 | 第106-107页 |
| 2 实验方法 | 第107-108页 |
| 2.1 大蒜提取液对SW480 和SW620 细胞扩散影响的试验 | 第107页 |
| 2.2 大蒜提取液对SW480 和SW620 细胞粘附影响的试验 | 第107-108页 |
| 2.3 大蒜提取液对 SW480 和 SW620 细胞增殖影响的试验 | 第108页 |
| 3 结果与讨论 | 第108-111页 |
| 本章小结 | 第111页 |
| 参考文献 | 第111-112页 |
| 第六章 总结 | 第112-117页 |
| 攻博期间发表的学术论文及其他成果 | 第117-118页 |
| 中文摘要 | 第118-122页 |
| 英文摘要 | 第122-128页 |
| 致谢 | 第128页 |
