| 中文摘要 | 第4-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 前言 | 第10-14页 |
| 材料与方法 | 第14-62页 |
| 1.实验材料 | 第14-24页 |
| 2.实验方法 | 第24-62页 |
| 2.1 标本的收集 | 第24页 |
| 2.2 单个核细胞的分离与纯化 | 第24-25页 |
| 2.3 造血干／祖细胞在不同培养条件下的诱导培养和收集 | 第25页 |
| 2.4 体外诱导培养过程中红细胞成熟过程的观察和检测 | 第25-27页 |
| 2.5 细胞总RNA的纯化 | 第27-28页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR检测不同时间点细胞内珠蛋白表达水平变化 | 第28-33页 |
| 2.7 cDNA的合成差异显示逆转录PCR(DDRT-PCR)分析 | 第33-36页 |
| 2.8 差异PCR产物的回收、再扩增和纯化 | 第36-38页 |
| 2.9 差异cDNA的克隆和测序 | 第38页 |
| 2.10 差异cDNA及蛋白质序列的同源性分析 | 第38页 |
| 2.11 实时荧光定量PCR确定差异片段 | 第38页 |
| 2.12 相关可能候选基因全长的获得 | 第38-45页 |
| 2.13 Northem blot检测候选基因表达谱 | 第45-51页 |
| 2.14 候选基因功能的初步研究 | 第51-62页 |
| 2.14.1 候选基因真核表达载体的构建及质粒DNA制备 | 第51-54页 |
| 2.14.2 候选基因稳定表达株的构建与鉴定 | 第54-55页 |
| 2.14.3 候选基因过表达对珠蛋白基因表达的影响 | 第55-57页 |
| 2.14.4 UCB1512,U和CU11110的亚细胞定位 | 第57-58页 |
| 2.14.5 永久表达细胞株的建立 | 第58-62页 |
| 实验结果 | 第62-143页 |
| 1.单个核细胞的分离与体外扩增 | 第62页 |
| 2.红细胞不同培养体系下诱导成熟的观察比较 | 第62-67页 |
| 3.红细胞成熟过程中珠蛋白表达水平的动态变化 | 第67-88页 |
| 4.差异显示逆转录PCR(DDRT-PCR)分析 | 第88-91页 |
| 5.差异cDNA片段的再扩增 | 第91-92页 |
| 6.差异cDNA片段的克隆测序及同源性分析 | 第92-98页 |
| 7.实时荧光定量PCR验证差异片段 | 第98-107页 |
| 8.差异cDNA片段代表的候选基因全长的克隆及功能分析 | 第107-128页 |
| 9.相关候选基因序列表达谱Northern杂交结果 | 第128-133页 |
| 10.候选基因真核表达载体构建及亚细胞定位 | 第133-136页 |
| 11.相关候选基因稳定表达株的构建与鉴定及功能的初步研究 | 第136-143页 |
| 讨论 | 第143-155页 |
| 小结 | 第155-157页 |
| 参考文献 | 第157-163页 |
| 文献综述 | 第163-197页 |
| 附录 | 第197-198页 |
| 致谢 | 第198页 |
