缩略词 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第12-21页 |
1.1 柔嫩艾美耳球虫EtMIC-2 的研究概况 | 第13-14页 |
1.2 细胞介素-2 抗球虫作用的研究进展 | 第14-17页 |
1.2.1 鸡IL-2 蛋白的发现 | 第14页 |
1.2.2 鸡IL-2 基因的生物学特性 | 第14-15页 |
1.2.3 鸡IL-2 抗球虫感染作用 | 第15-16页 |
1.2.4 鸡IL-2 在球虫DNA疫苗的免疫佐剂作用 | 第16-17页 |
1.3 DNA疫苗的研究进展 | 第17-20页 |
1.3.1 DNA疫苗的概念、诞生、现状 | 第17-18页 |
1.3.2 DNA疫苗的接种方法 | 第18页 |
1.3.3 DNA疫苗接种安全性 | 第18-19页 |
1.3.4 DNA疫苗在鸡球虫方面的应用 | 第19-20页 |
1.4 展望 | 第20-21页 |
第二章 鸡IL-2 基因的克隆及生物信息学分析 | 第21-36页 |
2.1 材料 | 第21-22页 |
2.1.1 研究动物 | 第21页 |
2.1.2 主要试剂及其配制 | 第21-22页 |
2.1.3 主要仪器 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-26页 |
2.2.1 鸡脾脏总RNA的提取与IL-2 基因扩增 | 第22-25页 |
2.2.2 鸡IL-2 基因的克隆与鉴定 | 第25-26页 |
2.2.3 肉鸡IL-2 基因序列的测定与分析 | 第26页 |
2.2.4 肉鸡IL-2 基因编码蛋白质生物信息学分析 | 第26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-34页 |
2.3.1 肉鸡脾脏总RNA的提取 | 第26-27页 |
2.3.2 肉鸡IL-2 基因的RT-PCR扩增 | 第27-28页 |
2.3.3 肉鸡IL-2 基因的克隆与鉴定 | 第28页 |
2.3.4 肉鸡IL-2 基因序列的测定及序列分析 | 第28-29页 |
2.3.5 肉鸡IL-2 基因同源性比较及进化树分析 | 第29-30页 |
2.3.6 肉鸡IL-2 基因编码的蛋白生物学信息分析 | 第30-34页 |
2.4 讨论 | 第34-35页 |
2.5 小结 | 第35-36页 |
第三章E.tenella河北株EtMIC-2 基因的克隆、生物信息学分析 | 第36-51页 |
3.1 材料 | 第36-38页 |
3.1.1 研究用球虫卵囊 | 第36页 |
3.1.2 主要试剂与配制 | 第36-37页 |
3.1.3 主要仪器 | 第37-38页 |
3.2 方法 | 第38-41页 |
3.2.1 柔嫩艾美耳球虫总RNA的提取与河北株EtMIC-2 扩增 | 第38-39页 |
3.2.2 河北株EtMIC-2 基因的克隆与鉴定 | 第39-40页 |
3.2.3 河北株EtMIC-2 基因的序列测定与分析 | 第40-41页 |
3.2.4 河北株EtMIC-2 基因的生物学预测 | 第41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-49页 |
3.3.1 河北株EtMIC-2 基因RNA提取 | 第41页 |
3.3.2 河北株EtMIC-2 基因的RT-PCR扩增 | 第41-42页 |
3.3.3 河北株EtMIC-2 基因的克隆与鉴定 | 第42-43页 |
3.3.4 河北株EtMIC-2 基因序列测定及分析 | 第43-45页 |
3.3.5 河北株与其它种株EtMIC-2 基因的同源性比较和进化树分析 | 第45-46页 |
3.3.6 河北株EtMIC-2 基因生物信息学分析 | 第46-49页 |
3.4 讨论 | 第49-50页 |
3.5 小结 | 第50-51页 |
第四章 pcDNA3-EtMIC2IL-2 真核表达载体的构建 | 第51-67页 |
4.1 材料 | 第51-52页 |
4.1.1 菌种、载体、细胞 | 第51-52页 |
4.1.2 主要试剂及配置 | 第52页 |
4.1.3 主要研究仪器 | 第52页 |
4.2 方法 | 第52-59页 |
4.2.1 pcDNA3-IL-2 重组质粒的构建及酶切鉴定 | 第52-54页 |
4.2.2 pcDNA3- EtMIC-2 重组质粒的构建及酶切鉴定 | 第54-56页 |
4.2.3 pcDNA3-EtMIC2IL-2 重组质粒的构建及酶切鉴定 | 第56-58页 |
4.2.4 pcDNA3-EtMIC2IL-2 重组质粒在 293T细胞中的表达及鉴定 | 第58-59页 |
4.3 结果与分析 | 第59-65页 |
4.3.1 pcDNA3-IL-2 的酶切鉴定 | 第59-60页 |
4.3.2 pcDNA3-EtMIC-2 的酶切鉴定 | 第60-61页 |
4.3.3 pcDNA3-EtMIC2IL-2 的酶切鉴定 | 第61页 |
4.3.4 EtMIC2IL-2 重组质粒的测序 | 第61-62页 |
4.3.5 pcDNA3-IL-2 在 293T细胞中表达的PCR鉴定 | 第62-63页 |
4.3.6 pcDNA3-EtMIC-2 在 293T细胞中表达的PCR鉴定 | 第63-64页 |
4.3.7 pcDNA3-EtMIC2IL-2 在 293T细胞中表达的PCR鉴定 | 第64-65页 |
4.4 讨论 | 第65-66页 |
4.5 小结 | 第66-67页 |
第五章 全文总结 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-75页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |