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柔嫩艾美耳球虫河北株EtMIC-2基因真核表达载体的构建

缩略词第4-5页
摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 引言第12-21页
    1.1 柔嫩艾美耳球虫EtMIC-2 的研究概况第13-14页
    1.2 细胞介素-2 抗球虫作用的研究进展第14-17页
        1.2.1 鸡IL-2 蛋白的发现第14页
        1.2.2 鸡IL-2 基因的生物学特性第14-15页
        1.2.3 鸡IL-2 抗球虫感染作用第15-16页
        1.2.4 鸡IL-2 在球虫DNA疫苗的免疫佐剂作用第16-17页
    1.3 DNA疫苗的研究进展第17-20页
        1.3.1 DNA疫苗的概念、诞生、现状第17-18页
        1.3.2 DNA疫苗的接种方法第18页
        1.3.3 DNA疫苗接种安全性第18-19页
        1.3.4 DNA疫苗在鸡球虫方面的应用第19-20页
    1.4 展望第20-21页
第二章 鸡IL-2 基因的克隆及生物信息学分析第21-36页
    2.1 材料第21-22页
        2.1.1 研究动物第21页
        2.1.2 主要试剂及其配制第21-22页
        2.1.3 主要仪器第22页
    2.2 方法第22-26页
        2.2.1 鸡脾脏总RNA的提取与IL-2 基因扩增第22-25页
        2.2.2 鸡IL-2 基因的克隆与鉴定第25-26页
        2.2.3 肉鸡IL-2 基因序列的测定与分析第26页
        2.2.4 肉鸡IL-2 基因编码蛋白质生物信息学分析第26页
    2.3 结果与分析第26-34页
        2.3.1 肉鸡脾脏总RNA的提取第26-27页
        2.3.2 肉鸡IL-2 基因的RT-PCR扩增第27-28页
        2.3.3 肉鸡IL-2 基因的克隆与鉴定第28页
        2.3.4 肉鸡IL-2 基因序列的测定及序列分析第28-29页
        2.3.5 肉鸡IL-2 基因同源性比较及进化树分析第29-30页
        2.3.6 肉鸡IL-2 基因编码的蛋白生物学信息分析第30-34页
    2.4 讨论第34-35页
    2.5 小结第35-36页
第三章E.tenella河北株EtMIC-2 基因的克隆、生物信息学分析第36-51页
    3.1 材料第36-38页
        3.1.1 研究用球虫卵囊第36页
        3.1.2 主要试剂与配制第36-37页
        3.1.3 主要仪器第37-38页
    3.2 方法第38-41页
        3.2.1 柔嫩艾美耳球虫总RNA的提取与河北株EtMIC-2 扩增第38-39页
        3.2.2 河北株EtMIC-2 基因的克隆与鉴定第39-40页
        3.2.3 河北株EtMIC-2 基因的序列测定与分析第40-41页
        3.2.4 河北株EtMIC-2 基因的生物学预测第41页
    3.3 结果与分析第41-49页
        3.3.1 河北株EtMIC-2 基因RNA提取第41页
        3.3.2 河北株EtMIC-2 基因的RT-PCR扩增第41-42页
        3.3.3 河北株EtMIC-2 基因的克隆与鉴定第42-43页
        3.3.4 河北株EtMIC-2 基因序列测定及分析第43-45页
        3.3.5 河北株与其它种株EtMIC-2 基因的同源性比较和进化树分析第45-46页
        3.3.6 河北株EtMIC-2 基因生物信息学分析第46-49页
    3.4 讨论第49-50页
    3.5 小结第50-51页
第四章 pcDNA3-EtMIC2IL-2 真核表达载体的构建第51-67页
    4.1 材料第51-52页
        4.1.1 菌种、载体、细胞第51-52页
        4.1.2 主要试剂及配置第52页
        4.1.3 主要研究仪器第52页
    4.2 方法第52-59页
        4.2.1 pcDNA3-IL-2 重组质粒的构建及酶切鉴定第52-54页
        4.2.2 pcDNA3- EtMIC-2 重组质粒的构建及酶切鉴定第54-56页
        4.2.3 pcDNA3-EtMIC2IL-2 重组质粒的构建及酶切鉴定第56-58页
        4.2.4 pcDNA3-EtMIC2IL-2 重组质粒在 293T细胞中的表达及鉴定第58-59页
    4.3 结果与分析第59-65页
        4.3.1 pcDNA3-IL-2 的酶切鉴定第59-60页
        4.3.2 pcDNA3-EtMIC-2 的酶切鉴定第60-61页
        4.3.3 pcDNA3-EtMIC2IL-2 的酶切鉴定第61页
        4.3.4 EtMIC2IL-2 重组质粒的测序第61-62页
        4.3.5 pcDNA3-IL-2 在 293T细胞中表达的PCR鉴定第62-63页
        4.3.6 pcDNA3-EtMIC-2 在 293T细胞中表达的PCR鉴定第63-64页
        4.3.7 pcDNA3-EtMIC2IL-2 在 293T细胞中表达的PCR鉴定第64-65页
    4.4 讨论第65-66页
    4.5 小结第66-67页
第五章 全文总结第67-69页
参考文献第69-75页
发表论文和参加科研情况说明第75-76页
致谢第76页

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