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2014-2015年吉林省出入境8类食品中微生物污染状况分析及LM ddPCR方法的建立

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
第1章 绪论第14-27页
    1.1 食源性疾病概念及危害第15-17页
        1.1.1 出入境食品安全概况第16页
        1.1.2 微生物性食品中毒流行病调查现状第16-17页
    1.2 食源性致病菌第17-21页
        1.2.1 单核细胞增生性李斯特氏菌第17-18页
        1.2.2 沙门氏菌第18页
        1.2.3 金黄色葡萄球菌第18-19页
        1.2.4 大肠埃希氏菌O157:H7第19-20页
        1.2.5 志贺氏菌第20页
        1.2.6 阪崎肠杆菌第20-21页
    1.3 微生物检测和鉴定方法第21-27页
        1.3.1 显色培养基法第21页
        1.3.2 酶联免疫荧光分析法(ELISA)第21-22页
        1.3.3 快速检测纸片法第22-23页
        1.3.4 全自动微生物自动鉴定系统第23-24页
        1.3.5 聚合酶链式反应法(PCR法)第24页
        1.3.6 实时荧光定量PCR技术第24-25页
        1.3.7 微滴式数字PCR技术第25-27页
第2章 微生物污染状况检测第27-45页
    2.1 材料第27-28页
        2.1.1 样品来源及种类第27页
        2.1.2 主要实验器材第27-28页
        2.1.3 主要实验试剂第28页
    2.2 方法第28-37页
        2.2.1 菌落总数的检测第29-30页
        2.2.2 大肠菌群的检测第30-31页
        2.2.3 沙门氏菌的检测第31-32页
        2.2.4 金黄色葡萄球菌的检测第32-33页
        2.2.5 单增李斯特氏菌的检测第33-34页
        2.2.6 阪崎肠杆菌的检测第34-35页
        2.2.7 大肠埃希氏菌O157:H7第35-36页
        2.2.8 志贺氏菌第36-37页
        2.2.9 霉菌及酵母菌第37页
    2.3 数据分析第37-38页
    2.4 结果第38-43页
        2.4.1 受检样品的基本情况第38页
        2.4.2 受检样品微生物检测情况第38-42页
        2.4.3 不同年度食品微生物总体检测结果比较情况第42-43页
    2.5 讨论第43-45页
第3章 单增李斯特氏菌微滴式数字PCR方法的建立第45-65页
    3.1 材料第45-47页
        3.1.1 主要实验器材第45页
        3.1.2 主要实验试剂第45-46页
        3.1.3 主要菌株第46页
        3.1.4 试剂配制第46-47页
    3.2 方法第47-53页
        3.2.1 增菌第47页
        3.2.2 PCR法第47-49页
        3.2.3 Real-time PCR(RT-PCR)法第49-51页
        3.2.4 微滴式数字PCR(dd-PCR)法第51-53页
    3.3 结果第53-62页
        3.3.1 菌落培养第53-54页
        3.3.2 DNA模板的制备第54-55页
        3.3.3 引物Hly A合适退火温度第55-56页
        3.3.4 单增李斯特氏菌PCR法特异性实验第56-57页
        3.3.5 单增李斯特氏菌PCR法敏感性实验第57页
        3.3.6 单增李斯特氏菌RT-PCR法的特异性实验第57页
        3.3.7 单增李斯特氏菌RT-PCR法敏感性实验第57-58页
        3.3.8 单增李斯特氏菌ddPCR法特异性实验第58-60页
        3.3.9 单增李斯特氏菌ddPCR法敏感性实验第60-62页
    3.4 讨论第62-65页
        3.4.1 dd PCR法第62-63页
        3.4.2 PCR法第63页
        3.4.3 PCR法、RT-PCR法和ddPCR法的比较第63-65页
第4章 结论第65-66页
参考文献第66-74页
致谢第74页

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