摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
第1章 绪论 | 第14-27页 |
1.1 食源性疾病概念及危害 | 第15-17页 |
1.1.1 出入境食品安全概况 | 第16页 |
1.1.2 微生物性食品中毒流行病调查现状 | 第16-17页 |
1.2 食源性致病菌 | 第17-21页 |
1.2.1 单核细胞增生性李斯特氏菌 | 第17-18页 |
1.2.2 沙门氏菌 | 第18页 |
1.2.3 金黄色葡萄球菌 | 第18-19页 |
1.2.4 大肠埃希氏菌O157:H7 | 第19-20页 |
1.2.5 志贺氏菌 | 第20页 |
1.2.6 阪崎肠杆菌 | 第20-21页 |
1.3 微生物检测和鉴定方法 | 第21-27页 |
1.3.1 显色培养基法 | 第21页 |
1.3.2 酶联免疫荧光分析法(ELISA) | 第21-22页 |
1.3.3 快速检测纸片法 | 第22-23页 |
1.3.4 全自动微生物自动鉴定系统 | 第23-24页 |
1.3.5 聚合酶链式反应法(PCR法) | 第24页 |
1.3.6 实时荧光定量PCR技术 | 第24-25页 |
1.3.7 微滴式数字PCR技术 | 第25-27页 |
第2章 微生物污染状况检测 | 第27-45页 |
2.1 材料 | 第27-28页 |
2.1.1 样品来源及种类 | 第27页 |
2.1.2 主要实验器材 | 第27-28页 |
2.1.3 主要实验试剂 | 第28页 |
2.2 方法 | 第28-37页 |
2.2.1 菌落总数的检测 | 第29-30页 |
2.2.2 大肠菌群的检测 | 第30-31页 |
2.2.3 沙门氏菌的检测 | 第31-32页 |
2.2.4 金黄色葡萄球菌的检测 | 第32-33页 |
2.2.5 单增李斯特氏菌的检测 | 第33-34页 |
2.2.6 阪崎肠杆菌的检测 | 第34-35页 |
2.2.7 大肠埃希氏菌O157:H7 | 第35-36页 |
2.2.8 志贺氏菌 | 第36-37页 |
2.2.9 霉菌及酵母菌 | 第37页 |
2.3 数据分析 | 第37-38页 |
2.4 结果 | 第38-43页 |
2.4.1 受检样品的基本情况 | 第38页 |
2.4.2 受检样品微生物检测情况 | 第38-42页 |
2.4.3 不同年度食品微生物总体检测结果比较情况 | 第42-43页 |
2.5 讨论 | 第43-45页 |
第3章 单增李斯特氏菌微滴式数字PCR方法的建立 | 第45-65页 |
3.1 材料 | 第45-47页 |
3.1.1 主要实验器材 | 第45页 |
3.1.2 主要实验试剂 | 第45-46页 |
3.1.3 主要菌株 | 第46页 |
3.1.4 试剂配制 | 第46-47页 |
3.2 方法 | 第47-53页 |
3.2.1 增菌 | 第47页 |
3.2.2 PCR法 | 第47-49页 |
3.2.3 Real-time PCR(RT-PCR)法 | 第49-51页 |
3.2.4 微滴式数字PCR(dd-PCR)法 | 第51-53页 |
3.3 结果 | 第53-62页 |
3.3.1 菌落培养 | 第53-54页 |
3.3.2 DNA模板的制备 | 第54-55页 |
3.3.3 引物Hly A合适退火温度 | 第55-56页 |
3.3.4 单增李斯特氏菌PCR法特异性实验 | 第56-57页 |
3.3.5 单增李斯特氏菌PCR法敏感性实验 | 第57页 |
3.3.6 单增李斯特氏菌RT-PCR法的特异性实验 | 第57页 |
3.3.7 单增李斯特氏菌RT-PCR法敏感性实验 | 第57-58页 |
3.3.8 单增李斯特氏菌ddPCR法特异性实验 | 第58-60页 |
3.3.9 单增李斯特氏菌ddPCR法敏感性实验 | 第60-62页 |
3.4 讨论 | 第62-65页 |
3.4.1 dd PCR法 | 第62-63页 |
3.4.2 PCR法 | 第63页 |
3.4.3 PCR法、RT-PCR法和ddPCR法的比较 | 第63-65页 |
第4章 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
致谢 | 第74页 |