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微囊藻毒素-LR对鱼类甲状腺激素代谢调控的干扰效应

摘要第9-12页
Abstract第12-15页
缩略语表第16-17页
第一章 文献综述第17-35页
    1.1 微囊藻毒素概论第17-22页
        1.1.1 微囊藻毒素的产生、结构及性质第17-19页
        1.1.2 微囊藻毒素在自然水体中的含量第19页
        1.1.3 微囊藻毒素的毒性效应第19-21页
        1.1.4 微囊藻毒素的致毒机制第21-22页
    1.2 鱼类的甲状腺内分泌系统第22-29页
        1.2.1 鱼类的甲状腺第22页
        1.2.2 鱼类甲状腺激素的合成、转化和代谢第22-24页
        1.2.3 甲状腺激素代谢过程中脱碘酶的功能和作用第24-26页
        1.2.4 环境污染物对鱼类甲状腺内分泌系统的影响第26-29页
    1.3 微囊藻毒素对鱼类的影响第29-31页
    1.4 微囊藻毒素对鱼类甲状腺内分泌系统的影响第31-32页
    1.5 本论文的研究目的、意义和研究内容第32-35页
        1.5.1 研究目的和意义第32-33页
        1.5.2 研究内容第33-35页
第二章 微囊藻毒素-LR对草鱼离体肝细胞(L8824)毒性的研究第35-53页
    2.1 前言第35-36页
    2.2 材料与方法第36-47页
        2.2.1 主要试剂第36-38页
        2.2.2 L8824 细胞的复苏与传代培养第38页
        2.2.3 MC-LR对L8824 细胞的急性毒性暴露第38-39页
        2.2.4 MTT法检测L8824 细胞的活性第39页
        2.2.5 L8824 细胞RNA的提取及反转录第39-41页
        2.2.6 草鱼脱碘酶基因核心片段的克隆第41-44页
            2.2.6.1 引物设计及合成第41-42页
            2.2.6.2 PCR反应体系及条件第42-43页
            2.2.6.3 PCR产物的回收、连接和转化第43-44页
        2.2.7 L8824 细胞脱碘酶基因表达的测定第44-46页
            2.2.7.1 引物设计第44-45页
            2.2.7.2 荧光定量PCR反应体系及条件第45-46页
        2.2.8 L8824 细胞脱碘酶活性的测定第46-47页
            2.2.8.1 L8824 细胞匀浆液的制备第46页
            2.2.8.2 L8824 细胞匀浆液蛋白含量的测定第46页
            2.2.8.3 L8824 细胞匀浆液脱碘酶活性的测定第46-47页
        2.2.9 数据统计分析第47页
    2.3 结果第47-51页
        2.3.1 MC-LR对L8824 细胞活性的影响第47-48页
        2.3.2 MC-LR对L8824 细胞中脱碘酶基因表达的影响第48页
        2.3.3 MC-LR对L8824 细胞中脱碘酶活性的影响第48-51页
    2.4 讨论第51-52页
    小结第52-53页
第三章 微囊藻毒素-LR对斑马鱼甲状腺激素代谢的急性毒性效应第53-84页
    3.1 前言第53-54页
    3.2 材料与方法第54-61页
        3.2.1 主要试剂第54-55页
        3.2.2 斑马鱼的急性毒性暴露第55-57页
            3.2.2.1 斑马鱼的饲养及暴露的条件第55-56页
            3.2.2.2 暴露水体中MC-LR含量的测定第56-57页
        3.2.3 斑马鱼甲状腺激素含量的测定第57-58页
            3.2.3.1 全鱼组织匀浆中蛋白含量的测定第57页
            3.2.3.2 全鱼组织匀浆中甲状腺激素含量的测定第57-58页
        3.2.4 斑马鱼甲状腺系统相关基因表达的测定第58-60页
            3.2.4.1 引物设计第58-59页
            3.2.4.2 RNA的提取及反转录第59页
            3.2.4.3 荧光定量PCR反应体系及条件第59-60页
        3.2.5 斑马鱼脱碘酶活性的测定第60页
            3.2.5.1 斑马鱼组织匀浆液的制备第60页
            3.2.5.2 斑马鱼组织匀浆液蛋白含量的测定第60页
            3.2.5.3 斑马鱼组织匀浆液脱碘酶活性的测定第60页
        3.2.6 数据统计分析第60-61页
    3.3 结果第61-75页
        3.3.1 急性MC-LR暴露对斑马鱼幼鱼甲状腺激素代谢的影响第61-65页
            3.3.1.1 MC-LR对斑马鱼幼鱼T4和T3水平的影响第61-62页
            3.3.1.2 MC-LR对斑马鱼幼鱼甲状腺相关基因表达的影响第62-63页
            3.3.1.3 MC-LR对斑马鱼幼鱼脱碘酶活性的影响第63-65页
        3.3.2 急性MC-LR暴露对斑马鱼雄性成鱼甲状腺激素代谢的影响第65-68页
            3.3.2.1 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼T4和T3水平的影响第65-66页
            3.3.2.2 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼甲状腺相关基因表达的影响第66-67页
            3.3.2.3 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼脱碘酶活性的影响第67-68页
        3.3.3 急性MC-LR暴露对斑马鱼雌性成鱼甲状腺激素代谢的影响第68-75页
            3.3.3.1 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼T4和T3水平的影响第68页
            3.3.3.2 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼甲状腺相关基因表达的影响第68-71页
            3.3.3.3 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼脱碘酶活性的影响第71-75页
    3.4 讨论第75-84页
        3.4.1 急性MC-LR暴露对斑马鱼幼鱼甲状腺激素代谢的影响第75-78页
            小结第78页
        3.4.2 急性MC-LR暴露对斑马鱼成鱼甲状腺激素代谢的影响第78-84页
            3.4.2.1 急性MC-LR暴露对斑马鱼雄性成鱼甲状腺激素代谢的影响第79-81页
            3.4.2.2 急性MC-LR暴露对斑马鱼雌性成鱼甲状腺激素代谢的影响第81-82页
            小结第82-84页
第四章 微囊藻毒素-LR对斑马鱼甲状腺激素代谢的亚急性毒性效应第84-122页
    4.1 前言第84-86页
    4.2 材料与方法第86-92页
        4.2.1 主要试剂第86页
        4.2.2 斑马鱼的亚急性毒性暴露第86-87页
            4.2.2.1 斑马鱼的饲养及暴露的条件第86-87页
            4.2.2.2 暴露水体中MC-LR含量的测定第87页
        4.2.3 斑马鱼甲状腺激素含量的测定第87-88页
            4.2.3.1 全鱼组织匀浆中蛋白含量的测定第87页
            4.2.3.2 全鱼组织匀浆中甲状腺激素含量的测定第87-88页
        4.2.4 斑马鱼甲状腺组织结构切片的观察第88-90页
            4.2.4.1 斑马鱼甲状腺组织的脱钙第88页
            4.2.4.2 斑马鱼甲状腺组织的包埋第88-89页
            4.2.4.3 斑马鱼甲状腺组织的切片第89页
            4.2.4.4 斑马鱼甲状腺组织切片的染色第89-90页
        4.2.5 斑马鱼甲状腺系统相关基因表达的测定第90-91页
            4.2.5.1 引物设计第90页
            4.2.5.2 RNA的提取及反转录第90-91页
            4.2.5.3 荧光定量PCR反应体系及条件第91页
        4.2.6 斑马鱼脱碘酶活性的测定第91页
            4.2.6.1 斑马鱼组织匀浆液的制备第91页
            4.2.6.2 斑马鱼组织匀浆液蛋白含量的测定第91页
            4.2.6.3 斑马鱼组织匀浆液脱碘酶活性的测定第91页
        4.2.7 数据统计分析第91-92页
    4.3 结果第92-114页
        4.3.1 亚急性MC-LR暴露对斑马鱼幼鱼甲状腺激素代谢的影响第92-100页
            4.3.1.1 MC-LR对斑马鱼幼鱼甲状腺激素水平的影响第92页
            4.3.1.2 MC-LR对斑马鱼幼鱼甲状腺组织结构的影响第92-96页
            4.3.1.3 MC-LR对斑马鱼幼鱼甲状腺相关基因表达的影响第96-97页
            4.3.1.4 MC-LR对斑马鱼幼鱼脱碘酶活性的影响第97-100页
        4.3.2 亚急性MC-LR暴露对斑马鱼雄性成鱼甲状腺激素代谢的影响第100-107页
            4.3.2.1 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼甲状腺激素水平的影响第100页
            4.3.2.2 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼甲状腺组织结构的影响第100页
            4.3.2.3 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼甲状腺相关基因表达的影响第100-104页
            4.3.2.4 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼脱碘酶活性的影响第104-107页
        4.3.3 亚急性MC-LR暴露对斑马鱼雌性成鱼甲状腺激素代谢的影响第107-114页
            4.3.3.1 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼甲状腺激素水平的影响第107页
            4.3.3.2 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼甲状腺组织结构的影响第107页
            4.3.3.3 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼甲状腺相关基因表达的影响第107-111页
            4.3.3.4 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼脱碘酶活性的影响第111-114页
    4.4 讨论第114-122页
        4.4.1 亚急性MC-LR暴露对斑马鱼幼鱼甲状腺激素代谢的影响第114-117页
            小结第117页
        4.4.2 亚急性MC-LR暴露对斑马鱼成鱼甲状腺激素代谢的影响第117-122页
            4.4.2.1 MC-LR暴露对斑马鱼雄性成鱼甲状腺激素代谢的影响第118-119页
            4.4.2.2 MC-LR暴露对斑马鱼雌性成鱼甲状腺激素代谢的影响第119-121页
            小结第121-122页
第五章 全文小结及展望第122-125页
    5.1 全文小结第122-123页
    5.2 展望第123-125页
参考文献第125-144页
发表论文及专利情况第144-145页
致谢第145-147页

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