摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
缩略语表 | 第16-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-35页 |
1.1 微囊藻毒素概论 | 第17-22页 |
1.1.1 微囊藻毒素的产生、结构及性质 | 第17-19页 |
1.1.2 微囊藻毒素在自然水体中的含量 | 第19页 |
1.1.3 微囊藻毒素的毒性效应 | 第19-21页 |
1.1.4 微囊藻毒素的致毒机制 | 第21-22页 |
1.2 鱼类的甲状腺内分泌系统 | 第22-29页 |
1.2.1 鱼类的甲状腺 | 第22页 |
1.2.2 鱼类甲状腺激素的合成、转化和代谢 | 第22-24页 |
1.2.3 甲状腺激素代谢过程中脱碘酶的功能和作用 | 第24-26页 |
1.2.4 环境污染物对鱼类甲状腺内分泌系统的影响 | 第26-29页 |
1.3 微囊藻毒素对鱼类的影响 | 第29-31页 |
1.4 微囊藻毒素对鱼类甲状腺内分泌系统的影响 | 第31-32页 |
1.5 本论文的研究目的、意义和研究内容 | 第32-35页 |
1.5.1 研究目的和意义 | 第32-33页 |
1.5.2 研究内容 | 第33-35页 |
第二章 微囊藻毒素-LR对草鱼离体肝细胞(L8824)毒性的研究 | 第35-53页 |
2.1 前言 | 第35-36页 |
2.2 材料与方法 | 第36-47页 |
2.2.1 主要试剂 | 第36-38页 |
2.2.2 L8824 细胞的复苏与传代培养 | 第38页 |
2.2.3 MC-LR对L8824 细胞的急性毒性暴露 | 第38-39页 |
2.2.4 MTT法检测L8824 细胞的活性 | 第39页 |
2.2.5 L8824 细胞RNA的提取及反转录 | 第39-41页 |
2.2.6 草鱼脱碘酶基因核心片段的克隆 | 第41-44页 |
2.2.6.1 引物设计及合成 | 第41-42页 |
2.2.6.2 PCR反应体系及条件 | 第42-43页 |
2.2.6.3 PCR产物的回收、连接和转化 | 第43-44页 |
2.2.7 L8824 细胞脱碘酶基因表达的测定 | 第44-46页 |
2.2.7.1 引物设计 | 第44-45页 |
2.2.7.2 荧光定量PCR反应体系及条件 | 第45-46页 |
2.2.8 L8824 细胞脱碘酶活性的测定 | 第46-47页 |
2.2.8.1 L8824 细胞匀浆液的制备 | 第46页 |
2.2.8.2 L8824 细胞匀浆液蛋白含量的测定 | 第46页 |
2.2.8.3 L8824 细胞匀浆液脱碘酶活性的测定 | 第46-47页 |
2.2.9 数据统计分析 | 第47页 |
2.3 结果 | 第47-51页 |
2.3.1 MC-LR对L8824 细胞活性的影响 | 第47-48页 |
2.3.2 MC-LR对L8824 细胞中脱碘酶基因表达的影响 | 第48页 |
2.3.3 MC-LR对L8824 细胞中脱碘酶活性的影响 | 第48-51页 |
2.4 讨论 | 第51-52页 |
小结 | 第52-53页 |
第三章 微囊藻毒素-LR对斑马鱼甲状腺激素代谢的急性毒性效应 | 第53-84页 |
3.1 前言 | 第53-54页 |
3.2 材料与方法 | 第54-61页 |
3.2.1 主要试剂 | 第54-55页 |
3.2.2 斑马鱼的急性毒性暴露 | 第55-57页 |
3.2.2.1 斑马鱼的饲养及暴露的条件 | 第55-56页 |
3.2.2.2 暴露水体中MC-LR含量的测定 | 第56-57页 |
3.2.3 斑马鱼甲状腺激素含量的测定 | 第57-58页 |
3.2.3.1 全鱼组织匀浆中蛋白含量的测定 | 第57页 |
3.2.3.2 全鱼组织匀浆中甲状腺激素含量的测定 | 第57-58页 |
3.2.4 斑马鱼甲状腺系统相关基因表达的测定 | 第58-60页 |
3.2.4.1 引物设计 | 第58-59页 |
3.2.4.2 RNA的提取及反转录 | 第59页 |
3.2.4.3 荧光定量PCR反应体系及条件 | 第59-60页 |
3.2.5 斑马鱼脱碘酶活性的测定 | 第60页 |
3.2.5.1 斑马鱼组织匀浆液的制备 | 第60页 |
3.2.5.2 斑马鱼组织匀浆液蛋白含量的测定 | 第60页 |
3.2.5.3 斑马鱼组织匀浆液脱碘酶活性的测定 | 第60页 |
3.2.6 数据统计分析 | 第60-61页 |
3.3 结果 | 第61-75页 |
3.3.1 急性MC-LR暴露对斑马鱼幼鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第61-65页 |
3.3.1.1 MC-LR对斑马鱼幼鱼T4和T3水平的影响 | 第61-62页 |
3.3.1.2 MC-LR对斑马鱼幼鱼甲状腺相关基因表达的影响 | 第62-63页 |
3.3.1.3 MC-LR对斑马鱼幼鱼脱碘酶活性的影响 | 第63-65页 |
3.3.2 急性MC-LR暴露对斑马鱼雄性成鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第65-68页 |
3.3.2.1 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼T4和T3水平的影响 | 第65-66页 |
3.3.2.2 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼甲状腺相关基因表达的影响 | 第66-67页 |
3.3.2.3 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼脱碘酶活性的影响 | 第67-68页 |
3.3.3 急性MC-LR暴露对斑马鱼雌性成鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第68-75页 |
3.3.3.1 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼T4和T3水平的影响 | 第68页 |
3.3.3.2 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼甲状腺相关基因表达的影响 | 第68-71页 |
3.3.3.3 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼脱碘酶活性的影响 | 第71-75页 |
3.4 讨论 | 第75-84页 |
3.4.1 急性MC-LR暴露对斑马鱼幼鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第75-78页 |
小结 | 第78页 |
3.4.2 急性MC-LR暴露对斑马鱼成鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第78-84页 |
3.4.2.1 急性MC-LR暴露对斑马鱼雄性成鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第79-81页 |
3.4.2.2 急性MC-LR暴露对斑马鱼雌性成鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第81-82页 |
小结 | 第82-84页 |
第四章 微囊藻毒素-LR对斑马鱼甲状腺激素代谢的亚急性毒性效应 | 第84-122页 |
4.1 前言 | 第84-86页 |
4.2 材料与方法 | 第86-92页 |
4.2.1 主要试剂 | 第86页 |
4.2.2 斑马鱼的亚急性毒性暴露 | 第86-87页 |
4.2.2.1 斑马鱼的饲养及暴露的条件 | 第86-87页 |
4.2.2.2 暴露水体中MC-LR含量的测定 | 第87页 |
4.2.3 斑马鱼甲状腺激素含量的测定 | 第87-88页 |
4.2.3.1 全鱼组织匀浆中蛋白含量的测定 | 第87页 |
4.2.3.2 全鱼组织匀浆中甲状腺激素含量的测定 | 第87-88页 |
4.2.4 斑马鱼甲状腺组织结构切片的观察 | 第88-90页 |
4.2.4.1 斑马鱼甲状腺组织的脱钙 | 第88页 |
4.2.4.2 斑马鱼甲状腺组织的包埋 | 第88-89页 |
4.2.4.3 斑马鱼甲状腺组织的切片 | 第89页 |
4.2.4.4 斑马鱼甲状腺组织切片的染色 | 第89-90页 |
4.2.5 斑马鱼甲状腺系统相关基因表达的测定 | 第90-91页 |
4.2.5.1 引物设计 | 第90页 |
4.2.5.2 RNA的提取及反转录 | 第90-91页 |
4.2.5.3 荧光定量PCR反应体系及条件 | 第91页 |
4.2.6 斑马鱼脱碘酶活性的测定 | 第91页 |
4.2.6.1 斑马鱼组织匀浆液的制备 | 第91页 |
4.2.6.2 斑马鱼组织匀浆液蛋白含量的测定 | 第91页 |
4.2.6.3 斑马鱼组织匀浆液脱碘酶活性的测定 | 第91页 |
4.2.7 数据统计分析 | 第91-92页 |
4.3 结果 | 第92-114页 |
4.3.1 亚急性MC-LR暴露对斑马鱼幼鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第92-100页 |
4.3.1.1 MC-LR对斑马鱼幼鱼甲状腺激素水平的影响 | 第92页 |
4.3.1.2 MC-LR对斑马鱼幼鱼甲状腺组织结构的影响 | 第92-96页 |
4.3.1.3 MC-LR对斑马鱼幼鱼甲状腺相关基因表达的影响 | 第96-97页 |
4.3.1.4 MC-LR对斑马鱼幼鱼脱碘酶活性的影响 | 第97-100页 |
4.3.2 亚急性MC-LR暴露对斑马鱼雄性成鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第100-107页 |
4.3.2.1 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼甲状腺激素水平的影响 | 第100页 |
4.3.2.2 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼甲状腺组织结构的影响 | 第100页 |
4.3.2.3 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼甲状腺相关基因表达的影响 | 第100-104页 |
4.3.2.4 MC-LR对斑马鱼雄性成鱼脱碘酶活性的影响 | 第104-107页 |
4.3.3 亚急性MC-LR暴露对斑马鱼雌性成鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第107-114页 |
4.3.3.1 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼甲状腺激素水平的影响 | 第107页 |
4.3.3.2 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼甲状腺组织结构的影响 | 第107页 |
4.3.3.3 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼甲状腺相关基因表达的影响 | 第107-111页 |
4.3.3.4 MC-LR对斑马鱼雌性成鱼脱碘酶活性的影响 | 第111-114页 |
4.4 讨论 | 第114-122页 |
4.4.1 亚急性MC-LR暴露对斑马鱼幼鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第114-117页 |
小结 | 第117页 |
4.4.2 亚急性MC-LR暴露对斑马鱼成鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第117-122页 |
4.4.2.1 MC-LR暴露对斑马鱼雄性成鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第118-119页 |
4.4.2.2 MC-LR暴露对斑马鱼雌性成鱼甲状腺激素代谢的影响 | 第119-121页 |
小结 | 第121-122页 |
第五章 全文小结及展望 | 第122-125页 |
5.1 全文小结 | 第122-123页 |
5.2 展望 | 第123-125页 |
参考文献 | 第125-144页 |
发表论文及专利情况 | 第144-145页 |
致谢 | 第145-147页 |