| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 植物响应低温胁迫的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 低温对植物的影响 | 第11页 |
| 1.1.2 植物的生理生化反应对低温的响应 | 第11-12页 |
| 1.1.3 植物响应低温的CBF/DREB1转录因子 | 第12-14页 |
| 1.2 mi RNA研究概述 | 第14-18页 |
| 1.2.1 mi RNA简介 | 第14-15页 |
| 1.2.2 mi RNA的研究方法 | 第15-18页 |
| 1.3 mi RNA对植物抗寒性的影响 | 第18-19页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-32页 |
| 2.1 试验区自然状况 | 第20页 |
| 2.2 试验材料 | 第20页 |
| 2.3 试验设计与取样 | 第20-21页 |
| 2.4 实验仪器及试剂 | 第21页 |
| 2.5 试验方法 | 第21-31页 |
| 2.5.1 生物信息学数据库和软件 | 第21-22页 |
| 2.5.2 抗寒mi RNAs的表达量的检测 | 第22-25页 |
| 2.5.3 冬小麦抗寒mi RNAs靶基因的预测和验证 | 第25-27页 |
| 2.5.4 Pre-tae-mi R319的克隆及过表达载体的构建 | 第27-29页 |
| 2.5.5 过表达拟南芥植株tae-mi R319及靶基因检测分析 | 第29-31页 |
| 2.6 技术路线 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-43页 |
| 3.1 低温下mi RNA及靶基因表达量变化检测 | 第32-35页 |
| 3.1.1 引物设计 | 第32-33页 |
| 3.1.2 冬小麦小RNA的提取和反转录 | 第33-34页 |
| 3.1.3 冬小麦抗寒相关mi RNA及其靶基因的表达量 | 第34-35页 |
| 3.2 低温下mi RNA靶基因的功能预测及生物学验证 | 第35-38页 |
| 3.2.1 miRNA靶基因功能预测 | 第35-36页 |
| 3.2.2 miR319靶基因生物学验证 | 第36-38页 |
| 3.3 融合Pre-tae-mi R319的过表达载体的构建 | 第38-43页 |
| 3.3.1 pre-tae-mi R319植物表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 3.3.2 转基因植株mi R319及其靶基因表达的研究 | 第40-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| 4.1 mi RNAs及其靶基因与寒胁迫 | 第43页 |
| 4.2 寒胁迫下mi RNAs靶基因的功能 | 第43-44页 |
| 4.3 mi R319与寒胁迫 | 第44-45页 |
| 4.4 下一步工作展望 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第57页 |
