符号说明 | 第4-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 引言 | 第14-25页 |
1.1 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的发展及概述 | 第14-16页 |
1.1.1 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的作用机理 | 第15页 |
1.1.2 吡唑醚菌酯的理化性质及应用 | 第15-16页 |
1.1.3 氟嘧菌酯的理化性质及应用 | 第16页 |
1.2 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的生态毒理效应研究 | 第16-17页 |
1.3 斑马鱼在毒理学研究中的应用 | 第17-18页 |
1.4 本试验各项研究指标概述 | 第18-23页 |
1.4.1 急性毒性试验 | 第18-19页 |
1.4.2 活性氧自由基(ROS) | 第19-20页 |
1.4.3 抗氧化酶系(SOD、CAT和POD) | 第20-21页 |
1.4.3.1 超氧化物歧化酶(SOD) | 第20页 |
1.4.3.2 过氧化氢酶(CAT) | 第20-21页 |
1.4.3.3 过氧化物酶(POD) | 第21页 |
1.4.4 谷胱甘肽硫转移酶(GST) | 第21-22页 |
1.4.5 丙二醛(MDA)概述 | 第22页 |
1.4.6 单细胞凝胶电泳(SCGE) | 第22-23页 |
1.5 本文研究内容 | 第23-25页 |
2 材料与方法 | 第25-39页 |
2.1 药品试剂 | 第25-26页 |
2.2 仪器设备 | 第26页 |
2.3 斑马鱼选取及染毒方式 | 第26-28页 |
2.3.1 急性毒性试验 | 第26-27页 |
2.3.2 亚慢性毒性试验及染毒时间 | 第27页 |
2.3.3 染毒方式 | 第27-28页 |
2.4 斑马鱼肝脏细胞内各指标的测定 | 第28-37页 |
2.4.1 斑马鱼肝脏细胞内ROS含量测定 | 第28-29页 |
2.4.1.1 试剂配制 | 第28页 |
2.4.1.2 斑马鱼线粒体悬浮液的制备 | 第28页 |
2.4.1.3 ROS测定方法 | 第28-29页 |
2.4.2 斑马鱼组织匀浆液的制备及蛋白含量的测定 | 第29-30页 |
2.4.2.1 斑马鱼组织匀浆液的制备 | 第29页 |
2.4.2.2 蛋白标准曲线的绘制方法及测定 | 第29-30页 |
2.4.2.3 匀浆液蛋白含量的测定 | 第30页 |
2.4.3 斑马鱼肝脏细胞内SOD活性测定 | 第30-31页 |
2.4.3.1 SOD试剂配制 | 第30-31页 |
2.4.3.2 SOD比活力的测定 | 第31页 |
2.4.3.3 结果与计算 | 第31页 |
2.4.4 斑马鱼肝脏细胞内CAT活性测定 | 第31-32页 |
2.4.4.1 CAT试剂配制 | 第31页 |
2.4.4.2 CAT比活力的测定 | 第31-32页 |
2.4.4.3 结果与计算 | 第32页 |
2.4.5 斑马鱼肝脏细胞内POD活性测定 | 第32-33页 |
2.4.5.1 POD试剂配制 | 第32页 |
2.4.5.2 POD比活力的测定 | 第32页 |
2.4.5.3 结果与计算 | 第32-33页 |
2.4.6 斑马鱼肝脏细胞内GST活性测定 | 第33-34页 |
2.4.6.1 GST试剂配制 | 第33页 |
2.4.6.2 GST活性测定 | 第33页 |
2.4.6.3GST结果与计算 | 第33-34页 |
2.4.7 斑马鱼肝脏细胞内MDA含量测定 | 第34页 |
2.4.7.1 MDA试剂配制 | 第34页 |
2.4.7.2 MDA含量测定 | 第34页 |
2.4.7.3 MDA结果与计算 | 第34页 |
2.4.8 斑马鱼的肝脏细胞DNA损伤的测定 | 第34-37页 |
2.4.8.1 彗星试验试剂的配制 | 第34-35页 |
2.4.8.2 斑马鱼肝脏细胞的制备 | 第35页 |
2.4.8.3 单细胞凝胶电泳试验 | 第35-37页 |
2.5 残留浓度测定 | 第37-38页 |
2.5.1 | 第37页 |
2.5.1.1 吡唑醚菌酯的前处理步骤 | 第37页 |
2.5.1.2 吡唑醚菌酯的气相测定条件 | 第37页 |
2.5.2 | 第37-38页 |
2.5.2.1 氟嘧菌酯的前处理步骤 | 第37页 |
2.5.2.2 氟嘧菌酯的液相测定条件 | 第37-38页 |
2.6 数据处理 | 第38-39页 |
3 结果与分析 | 第39-54页 |
3.0 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼的急性毒性影响 | 第39页 |
3.1 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼ROS含量的影响 | 第39-40页 |
3.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内抗氧化酶的活性的影响 | 第40-43页 |
3.2.1 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内SOD活性的影响 | 第40-42页 |
3.2.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内CAT活性的影响 | 第42-43页 |
3.3 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内POD活性的影响 | 第43-45页 |
3.4 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内GST活性的影响 | 第45-47页 |
3.5 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内MDA含量的影响 | 第47-48页 |
3.6 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼DNA损伤程度的影响 | 第48-50页 |
3.6.1 彗星图像 | 第48-49页 |
3.6.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼的肝脏细胞DNA损伤程度的影响 | 第49-50页 |
3.7 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯在水中的残留分析 | 第50-51页 |
3.8 各指标双因素方差分析 | 第51-54页 |
3.8.1 吡唑醚菌酯暴露下各指标双因素方差分析 | 第51-52页 |
3.8.2 氟嘧菌酯暴露下各指标双因素方差分析 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-61页 |
4.1 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼的氧化胁迫效应 | 第54-56页 |
4.1.1 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内ROS含量的影响 | 第54-55页 |
4.1.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼抗氧化酶的活性的影响 | 第55-56页 |
4.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼GST活性的影响 | 第56-57页 |
4.3 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼MDA含量的影响 | 第57-58页 |
4.4 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞DNA的损伤 | 第58-59页 |
4.5 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯在水中浓度的变化 | 第59页 |
4.6 各个测定指标间的相关性 | 第59-61页 |
5 结论 | 第61-62页 |
6 创新之处 | 第62-63页 |
7 参考文献 | 第63-72页 |
8 致谢 | 第72-73页 |
9 攻读学位期间发表论文情况 | 第73页 |