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吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼的氧化胁迫及DNA损伤

符号说明第4-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 引言第14-25页
    1.1 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的发展及概述第14-16页
        1.1.1 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的作用机理第15页
        1.1.2 吡唑醚菌酯的理化性质及应用第15-16页
        1.1.3 氟嘧菌酯的理化性质及应用第16页
    1.2 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的生态毒理效应研究第16-17页
    1.3 斑马鱼在毒理学研究中的应用第17-18页
    1.4 本试验各项研究指标概述第18-23页
        1.4.1 急性毒性试验第18-19页
        1.4.2 活性氧自由基(ROS)第19-20页
        1.4.3 抗氧化酶系(SOD、CAT和POD)第20-21页
            1.4.3.1 超氧化物歧化酶(SOD)第20页
            1.4.3.2 过氧化氢酶(CAT)第20-21页
            1.4.3.3 过氧化物酶(POD)第21页
        1.4.4 谷胱甘肽硫转移酶(GST)第21-22页
        1.4.5 丙二醛(MDA)概述第22页
        1.4.6 单细胞凝胶电泳(SCGE)第22-23页
    1.5 本文研究内容第23-25页
2 材料与方法第25-39页
    2.1 药品试剂第25-26页
    2.2 仪器设备第26页
    2.3 斑马鱼选取及染毒方式第26-28页
        2.3.1 急性毒性试验第26-27页
        2.3.2 亚慢性毒性试验及染毒时间第27页
        2.3.3 染毒方式第27-28页
    2.4 斑马鱼肝脏细胞内各指标的测定第28-37页
        2.4.1 斑马鱼肝脏细胞内ROS含量测定第28-29页
            2.4.1.1 试剂配制第28页
            2.4.1.2 斑马鱼线粒体悬浮液的制备第28页
            2.4.1.3 ROS测定方法第28-29页
        2.4.2 斑马鱼组织匀浆液的制备及蛋白含量的测定第29-30页
            2.4.2.1 斑马鱼组织匀浆液的制备第29页
            2.4.2.2 蛋白标准曲线的绘制方法及测定第29-30页
            2.4.2.3 匀浆液蛋白含量的测定第30页
        2.4.3 斑马鱼肝脏细胞内SOD活性测定第30-31页
            2.4.3.1 SOD试剂配制第30-31页
            2.4.3.2 SOD比活力的测定第31页
            2.4.3.3 结果与计算第31页
        2.4.4 斑马鱼肝脏细胞内CAT活性测定第31-32页
            2.4.4.1 CAT试剂配制第31页
            2.4.4.2 CAT比活力的测定第31-32页
            2.4.4.3 结果与计算第32页
        2.4.5 斑马鱼肝脏细胞内POD活性测定第32-33页
            2.4.5.1 POD试剂配制第32页
            2.4.5.2 POD比活力的测定第32页
            2.4.5.3 结果与计算第32-33页
        2.4.6 斑马鱼肝脏细胞内GST活性测定第33-34页
            2.4.6.1 GST试剂配制第33页
            2.4.6.2 GST活性测定第33页
            2.4.6.3GST结果与计算第33-34页
        2.4.7 斑马鱼肝脏细胞内MDA含量测定第34页
            2.4.7.1 MDA试剂配制第34页
            2.4.7.2 MDA含量测定第34页
            2.4.7.3 MDA结果与计算第34页
        2.4.8 斑马鱼的肝脏细胞DNA损伤的测定第34-37页
            2.4.8.1 彗星试验试剂的配制第34-35页
            2.4.8.2 斑马鱼肝脏细胞的制备第35页
            2.4.8.3 单细胞凝胶电泳试验第35-37页
    2.5 残留浓度测定第37-38页
        2.5.1第37页
            2.5.1.1 吡唑醚菌酯的前处理步骤第37页
            2.5.1.2 吡唑醚菌酯的气相测定条件第37页
        2.5.2第37-38页
            2.5.2.1 氟嘧菌酯的前处理步骤第37页
            2.5.2.2 氟嘧菌酯的液相测定条件第37-38页
    2.6 数据处理第38-39页
3 结果与分析第39-54页
    3.0 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼的急性毒性影响第39页
    3.1 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼ROS含量的影响第39-40页
    3.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内抗氧化酶的活性的影响第40-43页
        3.2.1 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内SOD活性的影响第40-42页
        3.2.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内CAT活性的影响第42-43页
    3.3 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内POD活性的影响第43-45页
    3.4 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内GST活性的影响第45-47页
    3.5 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内MDA含量的影响第47-48页
    3.6 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼DNA损伤程度的影响第48-50页
        3.6.1 彗星图像第48-49页
        3.6.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼的肝脏细胞DNA损伤程度的影响第49-50页
    3.7 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯在水中的残留分析第50-51页
    3.8 各指标双因素方差分析第51-54页
        3.8.1 吡唑醚菌酯暴露下各指标双因素方差分析第51-52页
        3.8.2 氟嘧菌酯暴露下各指标双因素方差分析第52-54页
4 讨论第54-61页
    4.1 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼的氧化胁迫效应第54-56页
        4.1.1 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞内ROS含量的影响第54-55页
        4.1.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼抗氧化酶的活性的影响第55-56页
    4.2 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼GST活性的影响第56-57页
    4.3 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼MDA含量的影响第57-58页
    4.4 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯对斑马鱼肝脏细胞DNA的损伤第58-59页
    4.5 吡唑醚菌酯和氟嘧菌酯在水中浓度的变化第59页
    4.6 各个测定指标间的相关性第59-61页
5 结论第61-62页
6 创新之处第62-63页
7 参考文献第63-72页
8 致谢第72-73页
9 攻读学位期间发表论文情况第73页

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