附件 | 第2-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 前言 | 第13-19页 |
1.1 包虫病/棘球绦虫 | 第13-14页 |
1.2 泡型包虫病/多房棘球蚴 | 第14-16页 |
1.3 EG95/EM95 | 第16-19页 |
第二章 多房棘球绦虫Em95基因克隆及序列分析 | 第19-26页 |
2.1 材料与方法 | 第19-21页 |
2.1.1 多房棘球蚴、菌种及试剂 | 第19页 |
2.1.2 引物设计与合成 | 第19页 |
2.1.3 多房棘球蚴的获取 | 第19-20页 |
2.1.4 原头蚴总RNA提取与反转录 | 第20页 |
2.1.5 PCR扩增多房棘球蚴Em95基因 | 第20页 |
2.1.6 Em95基因的克隆及测序 | 第20页 |
2.1.7 Em95基因序列分析 | 第20-21页 |
2.2 结果 | 第21-25页 |
2.2.1 多房棘球蚴总RNA的提取 | 第21页 |
2.2.2 多房棘球绦虫Em95基因的克隆 | 第21-22页 |
2.2.3 EM95理化性质 | 第22-23页 |
2.2.4 EM95信号肽及跨膜区预测 | 第23页 |
2.2.5 EM95二级结构分析 | 第23-24页 |
2.2.6 抗原表位预测 | 第24页 |
2.2.7 三级结构预测 | 第24-25页 |
2.3 讨论 | 第25-26页 |
第三章 多房棘球绦虫Em95基因原核表达载体的构建及表达 | 第26-34页 |
3.1 实验材料 | 第26页 |
3.1.1 载体与菌株 | 第26页 |
3.1.2 主要试剂 | 第26页 |
3.1.3 主要仪器 | 第26页 |
3.2 实验方法 | 第26-28页 |
3.2.1 重组质粒的构建及鉴定 | 第26-27页 |
3.2.2 多房棘球蚴EM95的原核表达及表达形式鉴定 | 第27-28页 |
3.2.3 表达条件优化 | 第28页 |
3.2.4 重组EM95蛋白纯化 | 第28页 |
3.3 结果 | 第28-32页 |
3.3.1 Em95基因片段的扩增 | 第28-29页 |
3.3.2 重组质粒阳性鉴定(PCR) | 第29页 |
3.3.3 Em95和tEm95原核表达 | 第29-30页 |
3.3.4 pET30a-tEm95重组蛋白诱导条件的优化 | 第30-31页 |
3.3.5 pET30a-tEm95重组蛋白的纯化 | 第31-32页 |
3.4 讨论 | 第32-34页 |
第四章 重组EM95蛋白免疫小鼠保护力观察及应用 | 第34-41页 |
4.1 材料与方法 | 第34-36页 |
4.1.1 实验动物、多房棘球蚴及样品 | 第34页 |
4.1.2 主要试剂及溶液 | 第34页 |
4.1.3 小鼠的免疫实验 | 第34-35页 |
4.1.4 ELISA检测EM95特异性抗体检测 | 第35页 |
4.1.5 EM95重组蛋白保护效力观察 | 第35页 |
4.1.6 EM95重组蛋白的应用 | 第35-36页 |
4.2 结果 | 第36-39页 |
4.2.1 ELISA检测 | 第36-37页 |
4.2.2 攻虫实验 | 第37页 |
4.2.3 EM95重组蛋白保护力检测 | 第37-38页 |
4.2.4 EM95重组蛋白的应用 | 第38-39页 |
4.3 讨论 | 第39-41页 |
第五章 全文结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
作者简历 | 第48页 |