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多房棘球蚴Em95基因克隆、原核表达及应用

附件第2-6页
摘要第6-7页
Abstract第7页
英文缩略表第12-13页
第一章 前言第13-19页
    1.1 包虫病/棘球绦虫第13-14页
    1.2 泡型包虫病/多房棘球蚴第14-16页
    1.3 EG95/EM95第16-19页
第二章 多房棘球绦虫Em95基因克隆及序列分析第19-26页
    2.1 材料与方法第19-21页
        2.1.1 多房棘球蚴、菌种及试剂第19页
        2.1.2 引物设计与合成第19页
        2.1.3 多房棘球蚴的获取第19-20页
        2.1.4 原头蚴总RNA提取与反转录第20页
        2.1.5 PCR扩增多房棘球蚴Em95基因第20页
        2.1.6 Em95基因的克隆及测序第20页
        2.1.7 Em95基因序列分析第20-21页
    2.2 结果第21-25页
        2.2.1 多房棘球蚴总RNA的提取第21页
        2.2.2 多房棘球绦虫Em95基因的克隆第21-22页
        2.2.3 EM95理化性质第22-23页
        2.2.4 EM95信号肽及跨膜区预测第23页
        2.2.5 EM95二级结构分析第23-24页
        2.2.6 抗原表位预测第24页
        2.2.7 三级结构预测第24-25页
    2.3 讨论第25-26页
第三章 多房棘球绦虫Em95基因原核表达载体的构建及表达第26-34页
    3.1 实验材料第26页
        3.1.1 载体与菌株第26页
        3.1.2 主要试剂第26页
        3.1.3 主要仪器第26页
    3.2 实验方法第26-28页
        3.2.1 重组质粒的构建及鉴定第26-27页
        3.2.2 多房棘球蚴EM95的原核表达及表达形式鉴定第27-28页
        3.2.3 表达条件优化第28页
        3.2.4 重组EM95蛋白纯化第28页
    3.3 结果第28-32页
        3.3.1 Em95基因片段的扩增第28-29页
        3.3.2 重组质粒阳性鉴定(PCR)第29页
        3.3.3 Em95和tEm95原核表达第29-30页
        3.3.4 pET30a-tEm95重组蛋白诱导条件的优化第30-31页
        3.3.5 pET30a-tEm95重组蛋白的纯化第31-32页
    3.4 讨论第32-34页
第四章 重组EM95蛋白免疫小鼠保护力观察及应用第34-41页
    4.1 材料与方法第34-36页
        4.1.1 实验动物、多房棘球蚴及样品第34页
        4.1.2 主要试剂及溶液第34页
        4.1.3 小鼠的免疫实验第34-35页
        4.1.4 ELISA检测EM95特异性抗体检测第35页
        4.1.5 EM95重组蛋白保护效力观察第35页
        4.1.6 EM95重组蛋白的应用第35-36页
    4.2 结果第36-39页
        4.2.1 ELISA检测第36-37页
        4.2.2 攻虫实验第37页
        4.2.3 EM95重组蛋白保护力检测第37-38页
        4.2.4 EM95重组蛋白的应用第38-39页
    4.3 讨论第39-41页
第五章 全文结论第41-42页
参考文献第42-47页
致谢第47-48页
作者简历第48页

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