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苯并[a]芘对栉孔扇贝分子毒理学机制的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-14页
1 综述第14-39页
   ·近海污染状况第14-16页
   ·近海POPs污染监测第16-21页
     ·近海POPs污染监测方法第16-17页
     ·近海POPs生物监测计划第17-21页
   ·贝类毒理学研究进展第21-37页
     ·贝类标准化毒性试验第21-22页
     ·贝类生物标志物的研究第22-26页
     ·分子毒理机制的研究进展第26-37页
   ·论文的立题依据、内容和研究意义第37-39页
2 栉孔扇贝解毒代谢相关基因克隆与表达分析第39-85页
   ·引言第39页
   ·材料和方法第39-52页
     ·实验动物第39页
     ·主要化学试剂与实验仪器第39-40页
     ·组织RNA提取第40-41页
     ·总RNA样品中基因组DNA的消除第41-42页
     ·反转录合成cDNA第42页
     ·简并引物的设计与目的基因片段的克隆第42-44页
     ·琼脂糖凝胶电泳纯化PCR产物第44-45页
     ·感受态细胞的制备、连接及转化第45-46页
     ·RACE PCR扩增全长cDNA序列第46-50页
     ·生物信息学分析第50页
     ·半定量法检测组织中目的基因的表达第50-52页
     ·数据处理第52页
   ·结果第52-77页
     ·栉孔扇贝芳烃受体基因ChfAhR的克隆与序列分析第52-60页
     ·栉孔扇贝细胞色素CYP4基因ChfCYP4的克隆与表达分析第60-67页
     ·栉孔扇贝谷胱甘肽硫转移酶基因ChfGSTpi的克隆与表达分析第67-73页
     ·栉孔扇贝外源物质抗性蛋白Pgp基因的克隆与表达分析第73-77页
   ·讨论第77-83页
   ·结论第83-85页
3 栉孔扇贝在苯并[a]芘胁迫下累积、解毒代谢酶基因表达和DNA损伤的研究第85-114页
   ·引言第85页
   ·材料与方法第85-96页
     ·实验材料第85页
     ·主要化学试剂与实验仪器第85-86页
     ·苯并[a]芘染毒实验设计第86-88页
     ·水样和扇贝组织中BaP含量的测定第88-89页
     ·实时荧光定量RT-PCR法检测目的基因的表达第89-93页
     ·DNA加合物与8-羟基脱氧鸟苷的测定第93-95页
     ·数据处理第95-96页
   ·结果第96-107页
     ·水样中BaP的浓度第96页
     ·栉孔扇贝消化盲囊和软体部中BaP的累积规律第96-100页
     ·BaP对ChfAhR、ChfCYP4和ChfGSTpi基因表达的影响第100-102页
     ·栉孔扇贝消化盲囊中BaP-DNA加合物和8-OHdG的含量第102-103页
     ·栉孔扇贝BaP累积量、DNA损伤指标与基因表达量的相关性分析第103-104页
     ·BaP累积量与GSTpi表达量的回归分析第104-105页
     ·DNA加合物、8OHdG含量与ChfCYP4、ChfGSTpi表达量的回归分析第105-106页
     ·BaP累积量与DNA损伤指标含量的回归分析第106-107页
   ·讨论第107-112页
   ·结论第112-114页
4 解毒代谢酶在栉孔扇贝细胞DNA损伤中作用机制的研究第114-125页
   ·引言第114页
   ·材料与方法第114-117页
     ·栉孔扇贝消化盲囊细胞的原代培养第114-115页
     ·细胞活力检测第115页
     ·苯并[a]芘细胞染毒实验设计第115-117页
     ·细胞DNA提取第117页
     ·DNA加合物与8-羟基脱氧鸟苷的测定第117页
     ·数据分析第117页
   ·结果第117-119页
   ·讨论第119-121页
   ·结论第121-125页
参考文献第125-137页
附件 淡水贝类毒理学研究第137-152页
 1 底质对淡水贝类氨毒性试验影响的研究第138-143页
 2 利用稚贝对TRISTATE矿区SPRING河重金属污染的评价研究第143-152页
致谢第152-153页
个人简历第153页
发表的学术论文第153-154页

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