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hsa-miR-181a在急性淋巴细胞白血病中的表达及功能的研究

英文缩略词第6-7页
中文摘要第7-9页
英文摘要第9-10页
前言第11-13页
第一部分 hsa-miR-181a在人ALL中的表达及临床意义第13-26页
    1 材料第13-14页
        1.1 细胞株及培养条件第13页
        1.2 临床标本的收集与分组第13-14页
        1.3 主要试剂第14页
        1.4 主要仪器第14页
    2 方法第14-18页
        2.1 细胞复苏、培养与传代第14-15页
        2.2 临床标本骨髓单个核细胞的分离第15-16页
        2.3 细胞总RNA抽提(TRIzol法)第16页
        2.4 cDNA第一链合成第16页
        2.5 Taqman探 针荧光定量PCR检 测hsa-mi R-181a的 表达水平第16-17页
        2.6 ALL患者随访与临床生物学特性的分析第17-18页
    3 统计学分析第18-19页
    结果第19-24页
        1 hsa-miR-181a在四种急性淋巴细胞白血病细胞株中的表达第19页
        2 hsa-miR-181a在ALL患者和正常骨髓单个核细胞表达情况第19-21页
        3 hsa-mi R-181a 与 ALL 患者临床生物学特性的分析第21-24页
    讨论第24-25页
    小结第25-26页
第二部分 过表达hsa-miR-181a稳定细胞株的建立第26-35页
    1 材料第26页
        1.1 细胞株第26页
        1.2 质粒第26页
        1.3 主要试剂第26页
        1.4 主要仪器第26页
    2 方法第26-28页
        2.1 293T细胞准备第26-27页
        2.2 慢病毒包装第27页
        2.3 病毒上清收集和浓缩第27页
        2.4 病毒滴度检测第27-28页
        2.5 病毒感染人急性淋巴细胞白血病细胞第28页
        2.6 hsa-miR-181a过表达效率检测第28页
    3 统计学分析第28-29页
    结果第29-33页
        1 慢病毒重组阳性穿梭质粒的鉴定及测序第29-31页
        2 慢病毒包装及滴度测定第31页
        3 Nalm-6 细胞慢病毒感染效率检测第31-32页
        4 hsa-miR-181a过表达效率检测第32-33页
    讨论第33-34页
    小结第34-35页
第三部分hsa-miR-181a对Nalm-6 细胞增殖和凋亡的影响第35-46页
    1 材料第35-36页
        1.1 细胞系及培养条件第35页
        1.2 主要试剂第35-36页
        1.3 主要仪器第36页
    2 方法第36-39页
        2.1 生物信息学方法筛选靶基因第36页
        2.2 CCK-8 法检测hsa-miR-181a对Nalm-6 细胞增殖的影响第36-37页
        2.3 Real-time PCR检测过表达hsa-mi R-181a前后凋亡相关靶基因Bcl-2 表达的改变第37页
        2.4 Western Blot检测过表达hsa-mi R-181a前后细胞凋亡靶蛋白Bcl-2 的改变第37-39页
        2.5 Western Blot检测过表达hsa-miR-181a前后凋亡相关蛋白表达的改变第39页
    3 统计学分析第39-40页
    结果第40-43页
        1 生物信息学方法筛选靶基因第40页
        2 过表达hsa-miR-181a抑制Nalm-6 细胞增殖第40-41页
        3 过表达hsa-miR-181a促进Nalm-6 细胞caspase-3 和caspase-9的活化第41-43页
    讨论第43-45页
    小结第45-46页
结论第46-47页
参考文献第47-50页
综述第50-61页
    参考文献第57-61页
致谢第61页

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