摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-25页 |
1.1 MYB转录因子 | 第14-18页 |
1.1.1 MYB转录因子的发现 | 第14-15页 |
1.1.2 植物中的MYB转录因子的结构特征与分类 | 第15-17页 |
1.1.3 植物MYB转录因子的生物学功能 | 第17-18页 |
1.1.3.1 调控植物细胞的形态与模式建成 | 第17页 |
1.1.3.2 响应外界环境与激素信号等刺激 | 第17页 |
1.1.3.3 调节植物苯丙烷类次生代谢 | 第17-18页 |
1.2 转录增强子VP16和转录抑制子EAR的研究应用 | 第18-20页 |
1.2.1 转录增强子VP16的研究利用 | 第18-19页 |
1.2.2 转录抑制子EAR的研究应用 | 第19-20页 |
1.2.3 VP16和EAR的工作原理 | 第20页 |
1.3 Gateway克隆技术 | 第20-23页 |
1.3.1 Gateway克隆技术的反应过程 | 第20-21页 |
1.3.2 Gateway技术的应用 | 第21-22页 |
1.3.3 Gateway技术的优缺点 | 第22-23页 |
1.4 根癌农杆菌介导的水稻转化 | 第23-24页 |
1.4.1 根癌农杆菌的生物学特性 | 第23页 |
1.4.2 根癌农杆菌Ti质粒介导的基因转化的分子机制 | 第23-24页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
第二章 材料和方法 | 第25-37页 |
2.1 材料 | 第25-28页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第25页 |
2.1.3 酶与试剂盒 | 第25页 |
2.1.4 实验所需试剂及培养基的配置 | 第25-28页 |
2.1.5 实验所需的引物序列 | 第28页 |
2.2 实验方法 | 第28-37页 |
2.2.1 植物材料的培养及其RNA的提取 | 第28-29页 |
2.2.1.1 水稻幼苗培养 | 第28页 |
2.2.1.2 水稻幼苗总RNA提取 | 第28-29页 |
2.2.2 水稻TF865基因CDS序列的克隆 | 第29-32页 |
2.2.2.1 水稻cDNA的合成 | 第29页 |
2.2.2.2 PCR扩增TF865基因CDS片段 | 第29-30页 |
2.2.2.3 PCR产物的凝胶回收纯化 | 第30页 |
2.2.2.4 TF865基因DNA片段的连接 | 第30-31页 |
2.2.2.5 大肠杆菌转化 | 第31页 |
2.2.2.6 大肠杆菌阳性克隆的筛选与鉴定 | 第31-32页 |
2.2.3 植物表达载体的构建 | 第32-33页 |
2.2.3.1 LR反应连接 | 第32页 |
2.2.3.2 连接产物转化大肠杆菌 | 第32-33页 |
2.2.3.3 植物表达载体阳性克隆的筛选与鉴定 | 第33页 |
2.2.4 植物表达载体电击转化根癌农杆菌 | 第33-34页 |
2.2.4.1 根癌农杆菌感受态细胞的制备(EHA105) | 第33页 |
2.2.4.2 根癌农杆菌电击转化 | 第33-34页 |
2.2.4.3 表达载体农杆菌阳性克隆的筛选与鉴定 | 第34页 |
2.2.5 根癌农杆菌介导水稻遗传转化 | 第34-37页 |
2.2.5.1 根癌农杆菌介导水稻遗传转化 | 第34页 |
2.2.5.2 转基因水稻植株的分子生物学检测 | 第34-36页 |
2.2.5.3 转基因水稻植株的表达谱测序 | 第36-37页 |
第三章 结果与分析 | 第37-56页 |
3.1 水稻幼苗的培养及RNA提取 | 第37页 |
3.2 水稻TF865基因功能序列区的克隆 | 第37-42页 |
3.2.1.PCR扩增TF865基因功能序列区 | 第37-38页 |
3.2.2 目的基因的中间载体阳性克隆的鉴定 | 第38页 |
3.2.3 目的基因的表达载体阳性克隆的鉴定 | 第38-39页 |
3.2.4 电转化将植物表达载体转化到根癌农杆菌中 | 第39页 |
3.2.5 根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第39-40页 |
3.2.6 转基因再生水稻植株的分子生物学鉴定 | 第40-42页 |
3.2.6.1 转基因再生水稻植株基因组DNA的PCR鉴定 | 第40-41页 |
3.2.6.2 转基因再生植株TF865基因相对表达量检测 | 第41-42页 |
3.2.6.3 转基因再生水稻植株蛋白水平的鉴定 | 第42页 |
3.3 水稻TF865基因的生物信息学分析 | 第42-44页 |
3.3.1 水稻TF865基因的基本信息 | 第42-43页 |
3.3.2 TF865基因同源基因进化分析以及结构预测 | 第43-44页 |
3.4 TF865转基因植株表型统计分析及功能初步探究 | 第44-53页 |
3.4.1 TF865合成型转录因子影响水稻株高 | 第44-45页 |
3.4.2 转TF865基因植株幼苗期及成熟期茎秆表型 | 第45-46页 |
3.4.3 TF865合成型因子影响节间细胞长度 | 第46-47页 |
3.4.4 TF865合成型转录因子影响产量 | 第47-48页 |
3.4.5 TF865合成型转录因子影响根系与叶片 | 第48-49页 |
3.4.6 TF865基因组织特异性表达检测 | 第49-50页 |
3.4.7 转TF865基因植株表达谱测序结果 | 第50-53页 |
3.4.7.1 差异表达基因统计结果 | 第50-52页 |
3.4.7.2 差异表达基因的GO统计 | 第52-53页 |
3.5 讨论 | 第53-56页 |
3.5.1 TF865基因转录活性探讨 | 第53-54页 |
3.5.2 水稻产量变化探讨 | 第54页 |
3.5.3 转TF865基因植株表达谱测序结果探讨 | 第54-56页 |
第四章 全文结论 | 第56-58页 |
4.1 全文结论 | 第56-57页 |
4.2 未来的研究目标与方向 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-62页 |
附录 | 第62-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
作者简历 | 第66页 |