摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
前言 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-21页 |
1 低蛋白日粮 | 第14页 |
2 蛋白饲料与营养价值 | 第14-15页 |
3 蛋白质在小肠的吸收转运 | 第15页 |
4 赖氨酸及其主要转运载体概况 | 第15-16页 |
5 氨基酸转运载体的调控 | 第16页 |
6 氨基酸介导的信号通路 | 第16-20页 |
6.1 mTOR信号通路 | 第16-17页 |
6.2 氨基酸与mTORC1活化 | 第17-20页 |
6.3 mTOR与蛋白质合成 | 第20页 |
7 研究目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 低蛋白日粮不同蛋白源对断奶仔猪小肠主要赖氨酸转运体表达的影响 | 第21-34页 |
1 材料和方法 | 第21-26页 |
1.1 材料 | 第21-24页 |
1.1.1 试验动物及试验设计 | 第21页 |
1.1.2 试验日粮 | 第21-23页 |
1.1.3 主要试剂 | 第23页 |
1.1.4 溶液配制方法 | 第23-24页 |
1.1.5 主要仪器 | 第24页 |
1.2 方法 | 第24-26页 |
1.2.1 组织取样 | 第24页 |
1.2.2 总RNA提取 | 第24页 |
1.2.3 引物设计 | 第24-25页 |
1.2.4 常规PCR | 第25页 |
1.2.5 荧光定量PCR | 第25-26页 |
1.2.6 统计分析 | 第26页 |
2 结果与分析 | 第26-32页 |
2.1 赖氨酸转运载体对低蛋白日粮不同蛋白源的响应规律测定 | 第26-32页 |
2.1.1 猪肠道总RNA提取 | 第26页 |
2.1.2 引物鉴定 | 第26-27页 |
2.1.3 标准曲线绘制 | 第27-29页 |
2.1.4 不同蛋白源对仔猪小肠CAT-1、b~(0, +)AT和y~+ LAT1 mRNA表达的影响 | 第29-32页 |
2.2 CAT-1、b~(0,+A)T和y~+LAT1 mRNA表达的组织特异性 | 第32页 |
3 讨论 | 第32-33页 |
4 小结 | 第33-34页 |
第三章 不同赖氨酸浓度对体外培养的小肠上皮细胞增值和赖氨酸主要转运载体mRNA表达的影响 | 第34-42页 |
1 材料和方法 | 第34-38页 |
1.1 材料 | 第34-35页 |
1.1.1 细胞株 | 第34页 |
1.1.2 主要仪器 | 第34页 |
1.1.3 主要试剂 | 第34-35页 |
1.1.4 溶液配制 | 第35页 |
1.2 方法 | 第35-38页 |
1.2.1 细胞培养与处理 | 第35-36页 |
1.2.2 细胞增殖检測 | 第36-37页 |
1.2.3 总RNA提取 | 第37页 |
1.2.4 引物设计 | 第37页 |
1.2.5 常规PCR | 第37页 |
1.2.6 荧光定量PCR | 第37页 |
1.2.7 统计分析 | 第37-38页 |
2 结果与分析 | 第38-40页 |
2.1 赖氨酸转运载体对不同浓度赖氨酸响应规律的测定 | 第38-40页 |
2.1.1 细胞总RNA提取 | 第38页 |
2.1.2 引物鉴定 | 第38-39页 |
2.1.3 标准曲线绘制 | 第39页 |
2.1.4 不同浓度赖氨酸对CAT-1、b~(0,+A)T和y~+ LAT1 mRNA表达的影响 | 第39-40页 |
3 讨论 | 第40-41页 |
4 小结 | 第41-42页 |
第四章 赖氨酸水平介导mTOR信号通路相关靶点蛋白基因表达与蛋白表达的调控研究 | 第42-57页 |
1 材料和方法 | 第42-48页 |
1.1 材料 | 第42-44页 |
1.1.1 细胞株 | 第42页 |
1.1.2 主要仪器 | 第42页 |
1.1.3 主要试剂 | 第42-43页 |
1.1.4 溶液配制 | 第43-44页 |
1.2 方法 | 第44-48页 |
1.2.1 细胞培养与处理 | 第44页 |
1.2.2 赖氨酸转运载体基因表达测定 | 第44-45页 |
1.2.3 赖氨酸转运载体蛋白表达测定 | 第45-48页 |
1.2.4 统计分析 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-55页 |
2.1 赖氨酸对mTOR信号通路相关蛋白基因表达的影响 | 第48-52页 |
2.1.1 细胞总RNA提取 | 第48页 |
2.1.2 引物鉴定 | 第48页 |
2.1.3 标准曲线的绘制 | 第48-50页 |
2.1.4 赖氨酸对mTOR、Rag、Rheb、TSC1/2 mRNA表达的影响 | 第50-52页 |
2.2 赖氨酸对mTOR信号通路相关蛋白表达的影响 | 第52-55页 |
2.2.1 赖氨酸对mTOR、Rags和Rheb蛋白表达的影响 | 第52页 |
2.2.2 赖氨酸对P-mTOR/mTOR蛋白表达的影响 | 第52-54页 |
2.2.3 赖氨酸介导的mTOR信号通路相关蛋白表达的相关关系 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-56页 |
4 小结 | 第56-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
附录 | 第64-65页 |
作者简介 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |