中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
1 绪论 | 第10-13页 |
1.1 研究背景 | 第10-11页 |
1.1.1 肝癌及其危害 | 第10页 |
1.1.2 溶血磷脂酸的生物学特性 | 第10页 |
1.1.3 LPA与肝癌细胞运动能力的关系 | 第10-11页 |
1.1.4 LPA与细胞生物力学特性的关系 | 第11页 |
1.2 本文关心的问题 | 第11-12页 |
1.3 本文研究的目的、内容和意义 | 第12-13页 |
1.3.1 本文研究的目的 | 第12页 |
1.3.2 本文研究的内容和意义 | 第12-13页 |
2 LPA对肝癌细胞迁移行为的影响 | 第13-22页 |
2.1 引言 | 第13页 |
2.2 实验材料 | 第13-15页 |
2.2.1 细胞 | 第13页 |
2.2.2 主要仪器、耗材 | 第13-14页 |
2.2.3 主要药品、试剂 | 第14页 |
2.2.4 主要实验试剂的配制 | 第14-15页 |
2.3 实验方法 | 第15-18页 |
2.3.1 细胞培养 | 第15页 |
2.3.2 细胞迁移分析—Transwell法 | 第15-16页 |
2.3.3 细胞增殖分析—细胞计数法 | 第16-17页 |
2.3.4 细胞周期分析—流式细胞术 | 第17-18页 |
2.4 实验结果 | 第18-20页 |
2.4.1 细胞形态学观察 | 第18页 |
2.4.2 LPA对肝癌细胞迁移能力的影响 | 第18-19页 |
2.4.3 LPA对肝癌细胞增殖能力的影响 | 第19-20页 |
2.5 分析讨论 | 第20-21页 |
2.6 本章小结 | 第21-22页 |
3 LPA受体在LPA促肝癌细胞迁移中的作用 | 第22-31页 |
3.1 引言 | 第22-23页 |
3.2 实验材料 | 第23-24页 |
3.2.1 主要仪器、耗材 | 第23-24页 |
3.2.2 主要药品、试剂 | 第24页 |
3.2.3 主要试剂的配制 | 第24页 |
3.3 实验方法 | 第24-26页 |
3.3.1 肝癌细胞中LPAR的表达分析——RT-PCR法 | 第24-26页 |
3.3.2 LPAR1抑制后细胞迁移分析—Transwell法 | 第26页 |
3.4 实验结果 | 第26-27页 |
3.4.1 肝癌细胞中LPAR1-6 的表达 | 第26-27页 |
3.4.2 Ki16425处理能够抑制LPA诱导的细胞迁移 | 第27页 |
3.5 分析讨论 | 第27-29页 |
3.6 本章小结 | 第29-31页 |
4 LPA促肝癌细胞迁移中的相关机理研究 | 第31-48页 |
4.1 引言 | 第31-32页 |
4.2 实验材料 | 第32-34页 |
4.2.1 主要仪器、耗材 | 第32页 |
4.2.2 主要药品、试剂 | 第32-33页 |
4.2.3 主要试剂的配制 | 第33-34页 |
4.3 实验方法 | 第34-39页 |
4.3.1 细胞迁移分析—Transwell法 | 第34-35页 |
4.3.2 细胞中F-actin的变化分析—免疫荧光染色法 | 第35页 |
4.3.3 细胞中F-actin的变化分析—Western Blot | 第35-38页 |
4.3.4 细胞杨氏模量变化分析—AFM | 第38-39页 |
4.4 实验结果 | 第39-45页 |
4.4.1 Y-27632 处理能够抑制LPA诱导的细胞迁移 | 第39-40页 |
4.4.2 F-actin参与了LPA诱导的MHCC97H迁移 | 第40-44页 |
4.4.3 LPA促MHCC97H迁移过程中细胞硬度的变化 | 第44-45页 |
4.5 分析讨论 | 第45-47页 |
4.6 本章小结 | 第47-48页 |
5 结论与展望 | 第48-50页 |
5.1 主要结论 | 第48页 |
5.2 后续研究工作的展望 | 第48-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
附录 | 第57页 |
作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第57页 |