| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语/符号说明 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-23页 |
| 研究现状、成果 | 第14-21页 |
| 研究目的、方法 | 第21-23页 |
| 一、microRNA的筛选及小鼠糖尿病肾病模型的构建 | 第23-39页 |
| 1.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 1.1.1 患者信息 | 第23页 |
| 1.1.2 实验动物 | 第23页 |
| 1.1.3 实验细胞 | 第23页 |
| 1.1.4 主要试剂和药物 | 第23-24页 |
| 1.1.5 主要仪器设备 | 第24页 |
| 1.2 实验方法 | 第24-27页 |
| 1.2.1 糖尿病肾病细胞模型的构建 | 第24-25页 |
| 1.2.2 miRNA芯片 | 第25页 |
| 1.2.3 细胞RNA的提取 | 第25-26页 |
| 1.2.4 血清标本收集 | 第26页 |
| 1.2.5 血清循环RNA的提取 | 第26页 |
| 1.2.6 qRT-PCR | 第26-27页 |
| 1.2.7 C57BL/6 小鼠糖尿病肾病模型的构建 | 第27页 |
| 1.2.8 统计学方法 | 第27页 |
| 1.3 实验结果 | 第27-34页 |
| 1.3.1 高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2 中差异性表达microRNA的筛选?14 | 第27-29页 |
| 1.3.2 miR3773p在高糖处理的HK-2 细胞中高表达 | 第29-30页 |
| 1.3.3 miR3773p在糖尿病肾病患者血清中低表达 | 第30-31页 |
| 1.3.4 小鼠糖尿病肾病模型的构建 | 第31-34页 |
| 1.4 讨论 | 第34-38页 |
| 1.5 小结 | 第38-39页 |
| 二、miR3773p对肾小管上皮细胞HK-2 的活性影响及其机制研究 | 第39-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-41页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第39页 |
| 2.1.2 实验细胞 | 第39页 |
| 2.1.3 主要试剂和药物 | 第39-40页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-46页 |
| 2.2.1 HK-2 细胞株的处理 | 第41页 |
| 2.2.2 MTT检测HK-2 的细胞活力 | 第41-42页 |
| 2.2.3 AnnexinV-APC/PI双标法检测细胞凋亡 | 第42-43页 |
| 2.2.4 western blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达 | 第43-45页 |
| 2.2.5 TUNEL检测糖尿病小鼠肾小管上皮细胞的凋亡 | 第45-46页 |
| 2.2.6 免疫组化检测糖尿病小鼠肾小管上皮细胞相关蛋白的表达 | 第46页 |
| 2.2.7 统计学方法 | 第46页 |
| 2.3 实验结果 | 第46-50页 |
| 2.3.1 miR3773p对HK-2 细胞活力的影响 | 第46-47页 |
| 2.3.2 miR3773p对HK-2 细胞凋亡的影响 | 第47页 |
| 2.3.3 miR3773p对HK-2 细胞凋亡相关蛋白的影响 | 第47-48页 |
| 2.3.4 miR3773p对糖尿病肾病小鼠肾小管上皮细胞增殖的影响 | 第48-49页 |
| 2.3.5 miR3773p对糖尿病肾病小鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响 | 第49页 |
| 2.3.6 miR-377-3p 对糖尿病肾病小鼠肾小管上皮细胞凋亡相关蛋白的影响 | 第49-50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-54页 |
| 2.5 结论 | 第54-56页 |
| 三、miR3773p靶定SGK3的验证 | 第56-68页 |
| 3.1 实验材料 | 第56-58页 |
| 3.1.1 实验细胞 | 第56页 |
| 3.1.2 主要试剂和药物 | 第56-57页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第57-58页 |
| 3.2 实验方法 | 第58-63页 |
| 3.2.1 HK-2 细胞株的处理 | 第58页 |
| 3.2.2 细胞RNA的提取 | 第58-59页 |
| 3.2.3 qRT-PCR | 第59-60页 |
| 3.2.4 双荧光素酶报告系统 | 第60-61页 |
| 3.2.5 western blot检测SGK3的表达 | 第61-63页 |
| 3.2.6 统计学方法 | 第63页 |
| 3.3 实验结果 | 第63-65页 |
| 3.3.1 生物信息学预测miR3773p的潜在靶基因 | 第63-64页 |
| 3.3.2 双荧光报告系统验证miR3773p与SGK3的靶定关系 | 第64页 |
| 3.3.3 高糖处理的HK-2 细胞中miR3773p对SGK3 mRNA水平的影响 | 第64-65页 |
| 3.3.4 高糖处理的HK-2 细胞中miR3773p对SGK3蛋白水平的影响 | 第65页 |
| 3.4 讨论 | 第65-67页 |
| 3.5 结论 | 第67-68页 |
| 四、SGK3对肾小管上皮细胞活性的影响及其机制研究 | 第68-77页 |
| 4.1 实验材料 | 第68-69页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第68页 |
| 4.1.2 实验细胞 | 第68页 |
| 4.1.3 主要试剂和药物 | 第68-69页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第69页 |
| 4.2 实验方法 | 第69-71页 |
| 4.2.1 HK-2 细胞株的处理 | 第69-70页 |
| 4.2.2 MTT检测HK-2 的细胞活力 | 第70页 |
| 4.2.3 AnnexinV-APC/PI双标法检测细胞凋亡 | 第70页 |
| 4.2.4 TUNEL检测糖尿病小鼠肾小管上皮细胞凋亡 | 第70页 |
| 4.2.5 免疫组化检测糖尿病小鼠肾小管上皮细胞凋亡相关蛋白的表达 | 第70-71页 |
| 4.2.6 western blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达 | 第71页 |
| 4.2.7 统计学方法 | 第71页 |
| 4.3 实验结果 | 第71-75页 |
| 4.3.1 SGK3对HK-2 细胞活力的影响 | 第71-72页 |
| 4.3.2 SGK3对HK-2 细胞凋亡的影响 | 第72页 |
| 4.3.3 SGK3对HK-2 细胞凋亡相关蛋白的影响 | 第72-73页 |
| 4.3.4 SGK3对糖尿病肾病小鼠肾小管上皮细胞增殖的影响 | 第73页 |
| 4.3.5 SGK3对糖尿病肾病小鼠肾小管上皮细胞凋亡相关蛋白的影响 | 第73-74页 |
| 4.3.6 miR3773p调控糖尿病肾病相关的PI3K/AKT信号通路 | 第74-75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-76页 |
| 4.5 小结 | 第76-77页 |
| 全文结论 | 第77-79页 |
| 论文创新点 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-94页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第94-95页 |
| 综述 micoRNA与糖尿病肾病研究进展概述 | 第95-113页 |
| 综述参考文献 | 第102-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 个人简介 | 第114页 |
