摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第9-11页 |
第一章 聚乙烯亚胺构建的纳米基因载体的研究进展 | 第11-17页 |
1.1 PEI在基因载体中的应用 | 第12-13页 |
1.1.1 聚乙烯亚胺的靶向性 | 第12页 |
1.1.2 低相对分子质量聚乙烯亚胺的应用 | 第12-13页 |
1.2 泊洛沙姆嵌段共聚物在基因载体的应用 | 第13-14页 |
1.2.1 聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物溶液中胶束的形成与凝胶行为的关系 | 第13页 |
1.2.2 聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物凝胶温度的调节剂与凝胶行为的关系 | 第13-14页 |
1.2.3 共聚物各给药新剂型 | 第14页 |
1.2.4 共聚物应用 | 第14页 |
1.3 功能肽在基因载体的应用 | 第14-15页 |
1.4 结语 | 第15-17页 |
第二章 P407-PEI-K12的合成与表征 | 第17-24页 |
2.1 材料与仪器 | 第18页 |
2.1.1 材料 | 第18页 |
2.1.2 仪器 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-20页 |
2.2.1 tLyP1NLS肽的构建 | 第18-19页 |
2.2.2 泊洛沙姆P407羟基的活化 | 第19页 |
2.2.3 P407-PEI的合成 | 第19页 |
2.2.4 功能肽K12对P407-PEI的修饰 | 第19-20页 |
2.3 结果与讨论 | 第20-23页 |
2.3.1 tLyP1NLS肽的构建 | 第20-21页 |
2.3.2 P407-PEI-K12的合成 | 第21-23页 |
2.4 结论 | 第23-24页 |
第三章 P407-PEI-K12理化性质 | 第24-37页 |
3.1 试剂与仪器 | 第24-25页 |
3.1.1 试剂 | 第24页 |
3.1.2 仪器 | 第24-25页 |
3.2 实验方法 | 第25-29页 |
3.2.1 P407-PEI-K12缓冲能力考查 | 第25页 |
3.2.2 P407-PEI-K12水解能力的考查 | 第25页 |
3.2.3 P407-PEI-K12/DNA复合物形态观察 | 第25-26页 |
3.2.4 P407-PEI-K12/DNA复合物Zeta电位和粒径 | 第26页 |
3.2.5 凝胶电泳阻滞分析 | 第26-27页 |
3.2.6 抗DNase I降解的能力 | 第27页 |
3.2.7 抗血清解离能力 | 第27-28页 |
3.2.8 抗肝素钠解离能力 | 第28页 |
3.2.9 细胞毒性 | 第28-29页 |
3.3 结果与讨论 | 第29-35页 |
3.3.1 P407-PEI-K12缓冲能力考查 | 第29-30页 |
3.3.2 P407-PEI-K12水解能力考查 | 第30-31页 |
3.3.3 P407-PEI-K12/DNA形态观察 | 第31页 |
3.3.4 P407-PEI-K12/DNAZeta电位和粒径 | 第31-33页 |
3.3.5 凝胶电泳阻滞分析 | 第33页 |
3.3.6 抗DNase I降解能力 | 第33-34页 |
3.3.7 抗血清解离能力 | 第34页 |
3.3.8 抗肝素钠解离能力 | 第34-35页 |
3.3.9 细胞毒性 | 第35页 |
3.4 结论 | 第35-37页 |
第四章 P407-PEI-K12的体外转染 | 第37-51页 |
4.1 试剂与仪器 | 第37-38页 |
4.1.1 试剂 | 第37-38页 |
4.1.2 仪器 | 第38页 |
4.2 实验方法 | 第38-42页 |
4.2.1 绿色荧光蛋白报告基因体外转染 | 第38页 |
4.2.2 虫荧光素酶报告基因体外转染 | 第38-39页 |
4.2.3 游离泊洛沙姆P407的添加对体外转染的影响 | 第39-40页 |
4.2.4 泊洛沙姆P407温敏凝胶的制备 | 第40页 |
4.2.5 凝胶溶蚀速率的测定 | 第40-41页 |
4.2.6 含DNA复合物的缓释水凝胶制备及其溶蚀速率检测 | 第41页 |
4.2.7 含DNA复合物的缓释水凝胶体外转染 | 第41-42页 |
4.3 结果与讨论 | 第42-48页 |
4.3.1 绿色荧光蛋白报告基因体外转染 | 第42-43页 |
4.3.2 虫荧光素酶报告基因体外转染 | 第43-45页 |
4.3.3 凝胶特性与外观 | 第45-46页 |
4.3.4 凝胶溶蚀与时间的相关性研究 | 第46-47页 |
4.3.5 含聚合物/DNA复合物凝胶的溶蚀速率检测 | 第47页 |
4.3.6 含DNA复合物的缓释水凝胶体外转染 | 第47-48页 |
4.4 结论 | 第48-51页 |
全文总结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
致谢 | 第56页 |