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小鼠雌性生殖干细胞的分离培养及雷帕霉素对其增殖的影响

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
文献综述第12-20页
    第一章 小鼠雌性生殖干细胞及雷帕霉素对卵巢功能的影响第12-20页
        1.1 干细胞特性第13-14页
        1.2 卵巢雌性生殖干细胞的研究进展第14-18页
            1.2.1 原始生殖细胞(Primordial germ cells, PGCs)第14页
            1.2.2 卵子库理论的争论第14-16页
            1.2.3 雌性生殖干细胞的分离方法第16-17页
            1.2.4 雌性生殖干细胞的检测及特异性标记第17-18页
        1.3 雷帕霉素对卵巢功能的影响第18-19页
        1.4 存在的问题及展望第19-20页
试验研究第20-38页
    第二章 小鼠卵巢源雌性生殖干细胞的分离培养及鉴定第20-32页
        2.1 材料第20页
            2.1.1 实验材料第20页
            2.1.2 主要试剂第20页
            2.1.3 主要仪器与耗材第20页
        2.2 方法第20-25页
            2.2.1 溶液配制第20-21页
            2.2.2 小鼠雌性生殖干细胞的定位第21页
            2.2.3 小鼠雌性生殖干细胞的饲养层的制备第21-22页
            2.2.4 小鼠雌性生殖干细胞的分离第22-23页
            2.2.5 小鼠雌性生殖干细胞的传代(feeder-dependent)第23页
            2.2.6 小鼠雌性生殖干细胞的冻存第23页
            2.2.7 小鼠雌性生殖干细胞的复苏第23-24页
            2.2.8 类胚体的形成第24页
            2.2.9 细胞免疫荧光染色第24页
            2.2.10细胞RNA提取及qRT-PCR检测FGSCs特定基因的表达第24-25页
        2.3 结果第25-30页
            2.3.1 小鼠雌性生殖干细胞的定位第25-26页
            2.3.2 小鼠雌性生殖干细胞的分离培养第26页
            2.3.3 小鼠雌性生殖干细胞的体外培养第26-27页
            2.3.4 小鼠雌性生殖干细胞的碱性磷酸酶表达检测第27页
            2.3.5 小鼠雌性生殖干细胞的定量PCR检测第27-28页
            2.3.6 小鼠雌性生殖干细胞的免疫荧光检测第28-29页
            2.3.7 小鼠雌性生殖干细胞向三胚层分化检测第29-30页
        2.4 讨论第30-31页
        2.5 小结第31-32页
    第三章 雷帕霉素对小鼠卵巢组织和雌性生殖干细胞的影响第32-38页
        3.1 材料与方法第32页
            3.1.1 实验材料第32页
        3.2 方法第32-33页
            3.2.1 主要试剂配制第32页
            3.2.2 实验动物处理第32-33页
            3.2.3 HE染色第33页
            3.2.4 卵巢组织RNA提取及qRT-PCR第33页
            3.2.5 切片免疫荧光染色第33页
        3.3 结果第33-36页
            3.3.1 卵巢HE染色结果第33-34页
            3.3.2 定量PCR检测雷帕霉素对小鼠卵巢组织及雌性生殖干细胞的影响第34-35页
            3.3.3 组织切片免疫荧光染色第35-36页
        3.4 讨论第36-37页
        3.5 小结第37-38页
结论第38页
本研究的创新点与进一步研究的课题第38-39页
参考文献第39-46页
附录第46-50页
致谢第50-51页
作者简介第51页

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