摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第12-20页 |
1. 衰老和抗衰老 | 第12-13页 |
2. Nrf2/ARE信号通路 | 第13-18页 |
2.1 Nrf2:Keap1的结构和功能 | 第13-14页 |
2.2 Nrf2参与防御氧化应激疾病中的作用 | 第14-16页 |
2.2.1 超氧化物歧化酶 | 第15页 |
2.2.2 过氧化氢酶 | 第15-16页 |
2.2.3 谷胱甘肽过氧化物酶 | 第16页 |
2.2.4 单胺氧化物酶 | 第16页 |
2.3 天然提取物的抗氧化作用研究 | 第16-17页 |
2.4 羊栖菜多糖的研究 | 第17-18页 |
3. 论文选题的依据、目的及意义 | 第18页 |
4. 本论文研究的内容 | 第18-20页 |
第二章 实验材料 | 第20-26页 |
1. 实验材料 | 第20-23页 |
1.1 实验仪器 | 第20-21页 |
1.2 实验试剂和试剂盒 | 第21-22页 |
1.3 PCR用到引物信息 | 第22-23页 |
2 试剂配制 | 第23-26页 |
2.1 溶液配制 | 第23-25页 |
2.2 软件及统计学分析 | 第25-26页 |
第三章 实验方法 | 第26-35页 |
3.1 羊栖菜多糖提取步骤 | 第26页 |
3.2 测定羊栖菜多糖清除自由基能力 | 第26-28页 |
3.2.1 羊栖菜多糖对DPPH清除自由基测定提取步骤 | 第26-27页 |
3.2.2 羊栖菜多糖对羟清除自由基测定提取步骤 | 第27-28页 |
3.3 测定羊栖菜多糖的理化性质 | 第28-30页 |
3.3.1 测定羊栖菜多糖的单糖组成 | 第28页 |
3.3.2 苯酚硫酸法测定羊栖菜多糖的总糖含量 | 第28页 |
3.3.3 间羟基联苯法测定羊栖菜多糖的糖醛酸含量 | 第28-29页 |
3.3.4 考马斯亮蓝测定羊栖菜多糖的蛋白含量 | 第29页 |
3.3.5 离子色谱法测定羊栖菜多糖的硫酸根含量 | 第29页 |
3.3.6 羊栖菜多糖的分子量测定 | 第29-30页 |
3.3.7 羊栖菜多糖的FT-IR分析 | 第30页 |
3.4 实验动物处理步骤 | 第30页 |
3.5 测定实验动物衰老指标的变化 | 第30-32页 |
3.5.1 测定小鼠肝组织总抗氧化能力(T-AOC)的变化 | 第30-31页 |
3.5.2 测定小鼠肝组织总抗氧化能力(T-SOD)的变化 | 第31页 |
3.5.3 测定小鼠肝组织过氧化氢(CAT)的变化 | 第31页 |
3.5.4 测定小鼠肝组织单胺氧化酶(MAO)的变化 | 第31-32页 |
3.5.5 测定小鼠肝组织丙二醛(MDA)的变化 | 第32页 |
3.6 提取小鼠肝组织总RNA | 第32页 |
3.7 RT-PCR | 第32-33页 |
3.8 提取小鼠肝组织总蛋白 | 第33-34页 |
3.9 Western blot | 第34-35页 |
第四章 实验结果与分析 | 第35-48页 |
4.1 羊栖菜多糖清除自由基能力的比较 | 第35-36页 |
4.1.1 羊栖菜多糖对羟自由基清除作用 | 第35-36页 |
4.1.2 羊栖菜多糖对DPPH自由基清除作用 | 第36页 |
4.2 羊栖菜多糖的理化性质分析 | 第36-39页 |
4.2.1 羊栖菜多糖红外图谱分析 | 第38页 |
4.2.2 小结 | 第38-39页 |
4.3 自然衰老动物模型筛选 | 第39-43页 |
4.3.1 测定不同月龄小鼠抗氧化能力的变化 | 第39页 |
4.3.2 测定不同月龄小鼠Nrf2和Keap1表达的变化 | 第39-40页 |
4.3.3 测定不同月龄小鼠Nrf2和Keap1的蛋白水平变化 | 第40-41页 |
4.3.4 小结 | 第41页 |
4.3.5 测定不同月龄小鼠抗氧化基因表达的变化 | 第41-42页 |
4.3.6 小结 | 第42-43页 |
4.4 羊栖菜多糖对自然衰老小鼠的影响 | 第43-48页 |
4.4.1 测定羊栖菜多糖对自然衰老小鼠抗氧化能力的影响 | 第43页 |
4.4.2 小结 | 第43页 |
4.4.3 测定羊栖菜多糖对自然衰老小鼠Nrf2和Keap1表达的影响 | 第43-45页 |
4.4.4 测定羊栖菜多糖对自然衰老小鼠Nrf2和Keap1蛋白水平的变化 | 第45-46页 |
4.4.5 小结 | 第46页 |
4.4.6 测定羊栖菜多糖处理后小鼠抗氧化基因转录水平的变化 | 第46-47页 |
4.4.7 小结 | 第47-48页 |
第五章 讨论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
附录A | 第55-57页 |
不同月龄小鼠Nrf2、Keap1和抗氧化基因表达的变化 | 第55-56页 |
羊栖菜多糖对Nrf2、Keap1和抗氧化基因表达的影响 | 第56-57页 |
附录B 中英文对照及英文缩写词表 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
在校期间成果及发表论文情况 | 第59页 |