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猪不同发育阶段抗体谱分析及猪瘟病毒抗体基因的初步筛选

中文摘要第4-5页
abstract第5-6页
引言第12-13页
第一篇 文献综述第13-19页
    1. 中和抗体的概述第13-14页
    2. 猪免疫球蛋白第14-17页
        2.1 猪免疫球蛋白基本结构第14页
        2.2 猪免疫球蛋白的重排机制第14-15页
        2.3 猪免疫球蛋白编码基因第15-17页
    3. 猪瘟的简介第17-19页
第二篇 研究内容第19-54页
    第1章 猪不同发育阶段Ig谱的分析第19-37页
        1.1 材料第19-21页
            1.1.1 实验动物第19页
            1.1.2 实验材料与试剂第19-20页
            1.1.3 实验设备第20-21页
        1.2 实验方法第21-29页
            1.2.1 血液样品的采集第21页
            1.2.2 分离猪外周血单核细胞第21页
            1.2.3 猪外周血单核细胞总RNA的提取第21-22页
            1.2.4 猪外周血单核细胞cDNA的制备第22-23页
            1.2.5 Ig基因引物的设计和合成第23-24页
            1.2.6 IGH,IGK和IGL基因的扩增第24-25页
            1.2.7 IGH,IGK和IGL基因的克隆和测序第25-26页
            1.2.8 IGHV-D-J组成特征第26-29页
        1.3 结果第29-34页
            1.3.1 猪IGH基因分布第29-30页
            1.3.2 猪IGK基因分布第30-31页
            1.3.3 猪IGL基因分布第31-32页
            1.3.4 IGHV-D-J组成特征第32-34页
        1.4 讨论第34-36页
        1.5 小结第36-37页
    第2章 猪瘟病毒抗体基因的初步筛选第37-54页
        2.1 实验动物第37页
        2.2 材料第37-38页
            2.2.1 主要试剂第37页
            2.2.2 实验设备第37-38页
        2.3 实验方法第38-46页
            2.3.1 猪血清中的猪瘟病毒抗体检测第38页
            2.3.2 中和试验第38页
            2.3.3 分离猪外周血单核细胞第38页
            2.3.4 猪瘟病毒中和表位的合成第38-39页
            2.3.5 流式细胞分选术分选猪瘟病毒抗体分泌细胞第39页
            2.3.6 利用Smart-seq2获得单细胞RNA-seq第39-41页
            2.3.7 单细胞RNA-seq质量检测第41-42页
            2.3.8 Ig抗体基因的获得第42页
            2.3.9 Ig基因克隆和测序分析第42页
            2.3.10 猪瘟病毒抗体基因重组载体构建第42-44页
            2.3.11 抗体基因的真核表达第44-46页
        2.4 实验结果第46-52页
            2.4.1 猪瘟病毒抗体效价检测第46页
            2.4.2 猪血清中猪瘟病毒抗体的中和效价检测第46-47页
            2.4.3 流式细胞术分选猪瘟病毒抗体分泌细胞第47-48页
            2.4.4 单细胞cDNA质量检测第48页
            2.4.5 单细胞的重链-轻链的基因扩增第48-49页
            2.4.6 重组表达载体EF1α-IGH-WPRE、EF1α-IGK-WPRE的构建与鉴定第49-51页
            2.4.7 高频的配对IGH-IGK重组蛋白的表达第51-52页
        2.5 讨论第52-53页
        2.6 小结第53-54页
结论第54-55页
参考文献第55-61页
导师简介第61-62页
作者简介及攻读硕士学位期间发表的学术论文及其他成果第62-63页
致谢第63页

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