| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩写词表 | 第9-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-27页 |
| 1.1 纤维素和纤维素酶 | 第14-18页 |
| 1.1.1 纤维素 | 第14-15页 |
| 1.1.2 纤维素酶 | 第15-18页 |
| 1.2 三个纤维素酶家族简介 | 第18-21页 |
| 1.2.1 GH5家族简述 | 第18页 |
| 1.2.2 GH9家族简述 | 第18-19页 |
| 1.2.3 GH12家族简述 | 第19-20页 |
| 1.2.4 CBM结构域简述 | 第20-21页 |
| 1.3 产纤维素酶的微生物 | 第21-24页 |
| 1.4 地衣芽孢杆菌 | 第24-25页 |
| 1.5 立题依据 | 第25-27页 |
| 第二章 blcel5A的克隆、表达及性质研究 | 第27-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 实验菌株、质粒和宿主菌种 | 第27页 |
| 2.1.2 培养基与缓冲液 | 第27-28页 |
| 2.1.3 实验试剂与药品 | 第28-29页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-34页 |
| 2.2.1 Bacillus licheniformis ATCC14580菌株基因组的提取 | 第29页 |
| 2.2.2 重组质粒的构建 | 第29-31页 |
| 2.2.3 重组蛋白的表达 | 第31页 |
| 2.2.4 目的蛋白的分离纯化及电泳检测 | 第31-32页 |
| 2.2.5 葡萄糖标准曲线的测定 | 第32页 |
| 2.2.6 蛋白浓度的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.7 重组蛋白酶活性的检测 | 第33页 |
| 2.2.8 重组酶理化性质及动力学常数研究 | 第33-34页 |
| 2.2.9 重组蛋白底物特异性研究 | 第34页 |
| 2.2.10 重组蛋白三维模型的构建 | 第34页 |
| 2.3 Bacillus licheniformis ATCC 14580 基因组分析及提取 | 第34-37页 |
| 2.3.1 Bacillus licheniformis ATCC 14580 基因组的分析 | 第34-37页 |
| 2.3.2 Bacillus licheniformis ATCC 14580 基因组的提取 | 第37页 |
| 2.4 blcel5A基因片段的分析与克隆 | 第37-42页 |
| 2.4.1 blcel5A基因的序列分析 | 第37-40页 |
| 2.4.2 blcel5A片段克隆及重组质粒构建 | 第40-42页 |
| 2.5 BlCel5A蛋白的表达纯化及性质测定 | 第42-52页 |
| 2.5.1 BlCel5A蛋白表达纯化 | 第42-44页 |
| 2.5.2 BlCel5A蛋白最适pH值及pH稳定性的测定 | 第44-45页 |
| 2.5.3 BlCel5A蛋白最适温度及温度稳定性的测定 | 第45-47页 |
| 2.5.4 金属离子对BlCel5A蛋白的影响 | 第47-48页 |
| 2.5.5 化学试剂对BlCel5A蛋白的影响 | 第48-50页 |
| 2.5.6 BlCel5A蛋白动力学常数的测定 | 第50-51页 |
| 2.5.7 BlCel5A蛋白的底物特异性分析 | 第51页 |
| 2.5.8 BlCel5A蛋白的三维模型的构建 | 第51-52页 |
| 2.6 小结 | 第52-54页 |
| 第三章 blcel9A的克隆、表达及性质研究 | 第54-73页 |
| 3.1 实验材料 | 第54页 |
| 3.1.1 实验菌株、质粒和宿主菌种 | 第54页 |
| 3.1.2 培养基与缓冲液 | 第54页 |
| 3.1.3 实验试剂与药品 | 第54页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第54页 |
| 3.2 实验方法 | 第54-56页 |
| 3.2.1 Bacillus licheniformis ATCC14580菌株基因组的提取 | 第54页 |
| 3.2.2 重组质粒的构建 | 第54-55页 |
| 3.2.3 重组蛋白的表达 | 第55页 |
| 3.2.4 目的蛋白的分离纯化及电泳检测 | 第55页 |
| 3.2.5 葡萄糖标准曲线的测定 | 第55页 |
| 3.2.6 蛋白浓度的测定 | 第55页 |
| 3.2.7 重组蛋白酶活性的检测 | 第55页 |
| 3.2.8 重组酶理化性质及动力学常数研究 | 第55页 |
| 3.2.9 重组蛋白底物特异性研究 | 第55-56页 |
| 3.2.10 重组蛋白三维模型的构建 | 第56页 |
| 3.3 Bacillus licheniformis ATCC 14580 基因组分析及提取 | 第56页 |
| 3.4 blcel9A基因片段的分析与克隆 | 第56-60页 |
| 3.4.1 blcel9A基因的序列分析 | 第56-58页 |
| 3.4.2 blcel9A片段克隆及重组质粒构建 | 第58-60页 |
| 3.5 BlCel9A蛋白的表达纯化及性质测定 | 第60-71页 |
| 3.5.1 BlCel9A蛋白表达纯化 | 第60-62页 |
| 3.5.2 BlCel9A蛋白最适pH值及pH稳定性的测定 | 第62-63页 |
| 3.5.3 BlCel9A蛋白最适温度及温度稳定性的测定 | 第63-65页 |
| 3.5.4 金属离子对BlCel9A蛋白的影响 | 第65-66页 |
| 3.5.5 化学试剂对BlCel9A蛋白的影响 | 第66-68页 |
| 3.5.6 BlCel9A蛋白动力学常数的测定 | 第68页 |
| 3.5.7 BlCel9A蛋白的底物特异性分析 | 第68-69页 |
| 3.5.8 BlCel9A蛋白的三维模型的构建 | 第69-71页 |
| 3.6 小结 | 第71-73页 |
| 第四章 blcel12A的克隆、表达及性质研究 | 第73-89页 |
| 4.1 实验材料 | 第73页 |
| 4.1.1 实验菌株、质粒和宿主菌种 | 第73页 |
| 4.1.2 培养基与缓冲液 | 第73页 |
| 4.1.3 实验试剂与药品 | 第73页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第73页 |
| 4.2 实验方法 | 第73-75页 |
| 4.2.1 Bacillus licheniformis ATCC14580菌株基因组的提取 | 第73页 |
| 4.2.2 重组质粒的构建 | 第73-74页 |
| 4.2.3 重组蛋白的表达 | 第74页 |
| 4.2.4 目的蛋白的分离纯化及电泳检测 | 第74页 |
| 4.2.5 葡萄糖标准曲线的测定 | 第74页 |
| 4.2.6 蛋白浓度的测定 | 第74页 |
| 4.2.7 重组蛋白酶活性的检测 | 第74页 |
| 4.2.8 重组酶理化性质及动力学常数研究 | 第74页 |
| 4.2.9 重组蛋白底物特异性研究 | 第74-75页 |
| 4.2.10 重组蛋白三维模型的构建 | 第75页 |
| 4.3 Bacillus licheniformis ATCC 14580 基因组分析及提取 | 第75页 |
| 4.4 blcel12A基因片段的分析与克隆 | 第75-79页 |
| 4.4.1 blcel12A基因的序列分析 | 第75-77页 |
| 4.4.2 blcel12A片段克隆及重组质粒构建 | 第77-79页 |
| 4.5 BlCel12A蛋白的表达纯化及性质测定 | 第79-88页 |
| 4.5.1 BlCel12A蛋白表达纯化 | 第79-80页 |
| 4.5.2 BlCel12A蛋白最适pH值及pH稳定性的测定 | 第80-82页 |
| 4.5.3 BlCel12A蛋白最适温度及温度稳定性的测定 | 第82-83页 |
| 4.5.4 金属离子对BlCel12A蛋白的影响 | 第83-84页 |
| 4.5.5 化学试剂对BlCel12A蛋白的影响 | 第84-86页 |
| 4.5.6 BlCel12A蛋白动力学常数的测定 | 第86页 |
| 4.5.7 BlCel12A蛋白的底物特异性分析 | 第86-87页 |
| 4.5.8 BlCel12A蛋白的三维模型的构建 | 第87-88页 |
| 4.6 小结 | 第88-89页 |
| 总结与展望 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第99页 |
