| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-21页 |
| ·Wap65 分子结构及组织分布 | 第11-14页 |
| ·分子结构 | 第11-13页 |
| ·组织分布 | 第13-14页 |
| ·Wap65s 表达与环境温度的相关性 | 第14-15页 |
| ·Wap65s 表达与环境盐度的相关性 | 第15页 |
| ·Wap65s 表达与病原感染的相关性 | 第15-18页 |
| ·Wap65s 表达与细菌感染的相关性 | 第16-17页 |
| ·Wap65-2 蛋白表达与寄生虫吸附间的相关性 | 第17-18页 |
| ·Wap65s 表达与重金属胁迫的相关性 | 第18-19页 |
| ·小结 | 第19-21页 |
| 2 鮸鱼Wap65-2 基因序列分析 | 第21-38页 |
| ·材料与方法 | 第21-28页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·实验试剂 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-28页 |
| ·哈维氏弧菌感染后鮸鱼肝Wap65-2 基因mRNA 表达变化 | 第28-31页 |
| ·哈维氏弧菌菌悬液制备 | 第29页 |
| ·细菌感染并取样 | 第29-30页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-35页 |
| ·总 RNA 抽提和cDNA 文库构建 | 第31页 |
| ·Wap65-2 基因cDNA 序列 | 第31-32页 |
| ·Wap65-2 基因的氨基酸及系统进化分析 | 第32-34页 |
| ·哈维氏弧菌感染后鮸鱼肝Wap65-2 基因的mRNA 表达差异 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-38页 |
| 3 鮸鱼Wap65-2 的表达及抗血清制备 | 第38-50页 |
| ·外源基因的原核表达载体构建 | 第38-41页 |
| ·获得含有目的基因的克隆 | 第38-39页 |
| ·E.Z.N.A.Plasmid Mini Kit I 试剂盒(OMEGA)法纯化质粒 | 第39页 |
| ·对纯化的质粒以及原核表达载体进行双酶切 | 第39-40页 |
| ·切胶纯化 | 第40页 |
| ·连接 | 第40页 |
| ·转化 | 第40-41页 |
| ·外源基因的原核表达 | 第41-42页 |
| ·纯化目的质粒 | 第41页 |
| ·转化 | 第41页 |
| ·诱导 | 第41页 |
| ·检测 | 第41-42页 |
| ·染色与脱色 | 第42页 |
| ·抗血清的制备 | 第42-43页 |
| ·纯化目的蛋白 | 第42-43页 |
| ·制备抗血清 | 第43页 |
| ·Western blot | 第43-45页 |
| ·实验结果 | 第45-48页 |
| ·Wap65-2 基因载体构建及酶切鉴定 | 第45-46页 |
| ·原核表达载体的构建及酶切鉴定 | 第46-47页 |
| ·鮸鱼Wap65-2 基因的原核表达及抗血清检测 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 4 结论 | 第50-52页 |
| ·研究成果 | 第50页 |
| ·克隆了鮸鱼Wap65-2 基因 | 第50页 |
| ·Wap65-2 原核表达并制备抗血清 | 第50页 |
| ·展望 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 在学研究成果 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
