| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-19页 |
| 1. 鸭疫里默氏杆菌研究进展 | 第11-15页 |
| ·病原概述 | 第11-12页 |
| ·血清型 | 第12页 |
| ·抗生素耐药性 | 第12-13页 |
| ·毒力因子研究进展 | 第13-15页 |
| ·外膜蛋白A(OmpA) | 第13页 |
| ·TonB依赖受体1(TonB-dependent receptor 1,TbdR1) | 第13-14页 |
| ·铁载体相互作用蛋白(SIP) | 第14页 |
| ·明胶酶 | 第14-15页 |
| ·其他潜在的毒力相关因子 | 第15页 |
| 2 转座子诱变 | 第15-18页 |
| ·转座子诱变技术简介 | 第15-16页 |
| ·转座子诱变技术的应用 | 第16-17页 |
| ·信号标签诱变(STM)技术 | 第17-18页 |
| 3 小结 | 第18-19页 |
| 1 引言 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-37页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·菌株和质粒 | 第21页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·抗生素 | 第22页 |
| ·酶 | 第22页 |
| ·其他试剂、试剂盒及感受态 | 第22-23页 |
| ·引物 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·鸭疫里默氏杆菌Yb2株转座子随机突变库的构建 | 第23-25页 |
| ·细菌培养 | 第23-24页 |
| ·鸭疫里默氏杆菌Yb2株半数致死量(LD_(50))的测定 | 第24页 |
| ·卡那霉素和红霉素对鸭疫里默氏杆菌Yb2株最小抑菌浓度的测定 | 第24页 |
| ·接合转导 | 第24-25页 |
| ·双重PCR鉴定转座子插入阳性突变株 | 第25页 |
| ·突变库的保存 | 第25页 |
| ·毒力减弱突变株的筛选 | 第25-26页 |
| ·初筛 | 第25-26页 |
| ·复核 | 第26页 |
| ·毒力减弱突变株转座子插入位点鉴定 | 第26-31页 |
| ·突变株基因组的提取 | 第26-27页 |
| ·突变株基因组的酶切 | 第27页 |
| ·乙醇沉淀法提纯酶切产物 | 第27页 |
| ·酶切产物的自连 | 第27-28页 |
| ·反向PCR扩增 | 第28页 |
| ·转座子插入位点分析 | 第28页 |
| ·Southern blot分析转座子的插入次数 | 第28-31页 |
| ·突变株Y2666插入失活基因的功能验证 | 第31-37页 |
| ·突变株Y2666基因互补株的构建 | 第31-35页 |
| ·突变株Y2666与基因互补株cY2666的生物学特性 | 第35-37页 |
| 3. 结果 | 第37-51页 |
| ·鸭疫里默氏杆菌Yb2株的半数致死量 | 第37页 |
| ·卡那霉素和红霉素对鸭疫里默氏杆菌Yb2株最小抑菌浓度的测定 | 第37页 |
| ·随机突变株的鉴定 | 第37-39页 |
| ·双抗培养基筛选 | 第37-38页 |
| ·PCR鉴定 | 第38页 |
| ·接合转导效率的计算 | 第38-39页 |
| ·毒力减弱突变株动物实验筛选结果 | 第39-40页 |
| ·初筛结果 | 第39页 |
| ·复核结果 | 第39-40页 |
| ·毒力减弱突变株转座子插入位点鉴定 | 第40-42页 |
| ·反向PCR结果 | 第40-41页 |
| ·插入位点序列分析结果 | 第41-42页 |
| ·Southern Blot结果 | 第42-43页 |
| ·突变株基因组酶切 | 第42-43页 |
| ·Southern Blot | 第43页 |
| ·突变株Y2666基因互补株的构建 | 第43-47页 |
| ·突变株Y2666转座子插入位点分析 | 第43页 |
| ·突变株Y2666基因互补株的构建 | 第43-47页 |
| ·突变株Y2666与基因互补株cY2666的生物学特性 | 第47-51页 |
| ·菌落形态与镜检观察 | 第47页 |
| ·血清凝集试验 | 第47页 |
| ·生长曲线的绘制 | 第47-48页 |
| ·半数致死量测定 | 第48-49页 |
| ·菌血计数结果 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| ·突变体库亲本株的选择 | 第51页 |
| ·供体菌和受体菌的培养 | 第51页 |
| ·供体菌和受体菌的数量比例 | 第51-52页 |
| ·转座子突变体库的保存与复苏 | 第52页 |
| ·筛选毒力减弱突变株的菌量 | 第52-53页 |
| ·转座子随机突变库的利用潜力 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第60页 |
