| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-22页 |
| ·羊泰勒虫病的概况 | 第11-15页 |
| ·羊泰勒虫的分类 | 第11页 |
| ·羊泰勒虫生活史 | 第11-12页 |
| ·临床症状及病理变化 | 第12-13页 |
| ·羊泰勒虫宿主多样性 | 第13页 |
| ·流行病学特点 | 第13-14页 |
| ·预防和治疗 | 第14-15页 |
| ·羊泰勒虫蛋白组学的概况 | 第15-16页 |
| ·尤氏泰勒虫TuIP蛋白和Tu88蛋白 | 第15页 |
| ·尤氏泰勒虫OPRT蛋白 | 第15-16页 |
| ·羊泰勒虫表面蛋白P32和T1SP蛋白 | 第16页 |
| ·环形泰勒虫裂殖体TaSP蛋白 | 第16-19页 |
| ·酵母双杂交系统研究进展 | 第19-21页 |
| ·酵母双杂交的原理 | 第19-20页 |
| ·酵母双杂交的特点及应用 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第2章 正常羊淋巴细胞酵母双杂交文库的构建 | 第22-30页 |
| ·材料与方法 | 第22-25页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·正常羊淋巴细胞的制备 | 第22-23页 |
| ·羊淋巴细胞总RNA的提取 | 第23页 |
| ·羊淋巴细胞ds cDNA的合成及纯化 | 第23-24页 |
| ·酵母菌Y187感受态细胞的制备 | 第24页 |
| ·酵母双杂交cDNA文库的构建 | 第24-25页 |
| ·文库质量的评价 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-28页 |
| ·正常羊淋巴细胞总RNA的提取 | 第25-26页 |
| ·双链cDNA的扩增及其纯化 | 第26-27页 |
| ·酵母双杂交文库质量的鉴定 | 第27-28页 |
| ·小结与分析 | 第28-30页 |
| 第3章 酵母双杂交pGBKT7-T1SP诱饵质粒的构建及鉴定 | 第30-37页 |
| ·材料与方法 | 第30-33页 |
| ·菌株 | 第30页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·构建pGBKT7-T1SP诱饵载体 | 第31-32页 |
| ·酵母Y2H株感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·诱饵pGBKT7-T1SP质粒的转化 | 第32页 |
| ·诱饵pGBKT7-T1SP质粒的细胞毒性检测 | 第32页 |
| ·诱饵pGBKT7-T1SP质粒的自启动性检测 | 第32页 |
| ·诱饵pGBKT7-T1SP质粒真核表达反应原性检测 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-35页 |
| ·重组pGBKT7-T1SP质粒的构建 | 第33页 |
| ·重组pGBKT7-T1SP质粒细胞毒性检测 | 第33-34页 |
| ·重组pGBKT7-T1SP质粒自启动性检测 | 第34页 |
| ·重组pGBKT7-T1SP质粒蛋白的反应原性检测 | 第34-35页 |
| ·小结与分析 | 第35-37页 |
| 第4章 酵母双杂交系统筛选与T1SP相互作用的蛋白 | 第37-43页 |
| ·材料与方法 | 第37-39页 |
| ·菌株 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·酵母双杂交系统互作蛋白对照实验 | 第37页 |
| ·用pGBKT7-T1SP菌株从羊淋巴细胞酵母双杂交文库中筛选相互作用蛋白 | 第37-38页 |
| ·阳性克隆测序鉴定 | 第38页 |
| ·回交验证 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-42页 |
| ·对照实验 | 第39页 |
| ·筛选与T1SP蛋白互作的羊淋巴细胞蛋白 | 第39-40页 |
| ·阳性质粒测序结果 | 第40-41页 |
| ·回交验证 | 第41-42页 |
| ·小结与分析 | 第42-43页 |
| 第5章 GST Pull-down法验证S20蛋白与T1SP蛋白的相互作用 | 第43-48页 |
| ·材料与方法 | 第43-45页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·pGEX-4T-1-S20表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·pET-30a-T1SP蛋白的纯化 | 第44页 |
| ·pGEX-4T-1-S20重组蛋白的诱导表达 | 第44页 |
| ·Pull-down法验证互作蛋白 | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-47页 |
| ·pGEX-4T-1-S20重组蛋白的诱导表达 | 第45页 |
| ·Pull-down法验证互作蛋白 | 第45-47页 |
| ·小结与分析 | 第47-48页 |
| 第6章 全文结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 附录 | 第56-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
| 硕士生期间发表论文情况 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
