摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
英文缩略词表 | 第13-15页 |
前言 | 第15-19页 |
第一部分 葱的提取方法的筛选 | 第19-28页 |
1 前言 | 第19页 |
2 实验材料 | 第19-21页 |
·实验仪器 | 第19-20页 |
·细胞株 | 第20页 |
·药物与试剂 | 第20页 |
·主要溶液配制 | 第20-21页 |
3 实验方法 | 第21-23页 |
·葱不同方法提取物的制备 | 第21-22页 |
·超临界流体萃取制备葱的提取物 | 第21页 |
·水蒸气蒸馏法制备葱的提取物 | 第21页 |
·石油醚浸提法制备葱的提取物 | 第21页 |
·80%乙醇回流提取法制备葱的提取物 | 第21页 |
·50%乙醇回流提取法制备葱的提取物 | 第21-22页 |
·水煮法制备葱的提取物 | 第22页 |
·PC12 细胞的培养 | 第22页 |
·给予细胞药物的配制 | 第22页 |
·不同提取物对谷氨酸损伤PC12 细胞的考察 | 第22-23页 |
4 统计学方法 | 第23页 |
5 结果 | 第23-26页 |
·不同提取方法的不同浓度药液对谷氨酸损伤PC12 细胞的作用 | 第23-26页 |
·超临界流体萃取法提取物对PC12 细胞的作用 | 第23页 |
·水蒸气蒸馏法提取物对PC12 细胞的作用 | 第23-24页 |
·石油醚浸提法提取物对PC12 细胞的作用 | 第24页 |
·80%乙醇提取法提取物对PC12 细胞的作用 | 第24-25页 |
·50%乙醇提取法提取物对PC12 细胞的作用 | 第25-26页 |
·水煮法提取物对PC12 细胞的作用 | 第26页 |
6 结论 | 第26页 |
7 讨论 | 第26-28页 |
第二部分 脑缺血模型大鼠灌胃给予葱的提取物后脑脊液中化学成分的分析 | 第28-33页 |
1 前言 | 第28页 |
2 实验材料 | 第28-29页 |
·实验仪器 | 第28-29页 |
·药物与试剂 | 第29页 |
·实验动物 | 第29页 |
3 方法和结果 | 第29-32页 |
·葱 50%乙醇提取液的制备 | 第29页 |
·脑缺血模型大鼠的制备 | 第29-30页 |
·神经行为学评分 | 第30页 |
·假手术组及脑缺血组大鼠空白脑脊液和含药脑脊液样品的制备 | 第30页 |
·葱提取物的分析样品处理 | 第30-31页 |
·假手术组及脑缺血组大鼠脑脊液的预处理 | 第31页 |
·各样品的GC-MS检测 | 第31-32页 |
·GC-MS检测条件 | 第31页 |
·GC-MS检测结果 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32页 |
5 结论 | 第32-33页 |
第三部分 葱提取液含药脑脊液药效学及机制研究 | 第33-50页 |
1 前言 | 第33页 |
2 实验材料 | 第33-35页 |
·实验仪器 | 第33-34页 |
·主要试剂的配制 | 第34页 |
·药物与试剂 | 第34页 |
·实验动物 | 第34-35页 |
·药物的配制 | 第35页 |
3 实验方法 | 第35-40页 |
·PC12 细胞的冻存、复苏、培养、传代和细胞计数 | 第35-36页 |
·实验分组 | 第36页 |
·倒置显微镜观察PC12 细胞形态 | 第36页 |
·细胞存活率检测(MTT法) | 第36-37页 |
·乳酸脱氢酶活性检测(LDH法) | 第37页 |
·Annexin V-FITC/Propidium iodide (PI)双染检测细胞凋亡 | 第37-38页 |
·Western-Blotting 法检测凋亡蛋白的表达 | 第38-40页 |
·相关溶液的配制 | 第38页 |
·细胞总蛋白提取 | 第38-39页 |
·Western blotting检 测Bax、Bcl-2、caspase-3 和caspase-9 蛋白的表达 | 第39-40页 |
4 统计方法与处理 | 第40页 |
5 结果 | 第40-48页 |
·细胞形态学变化(倒置显微镜观察) | 第40-42页 |
·葱的含药脑脊液对谷氨酸损伤的PC12 细胞增值活力的影响(MTT法) | 第42页 |
·葱的含药脑脊液对损伤PC12 细胞LDH活性的影响 | 第42-44页 |
·葱的含药脑脊液对谷氨酸损伤的PC12 细胞抗凋亡作用(AV/PI法) | 第44-45页 |
·葱的含药脑脊液对谷氨酸损伤的PC12 细胞的Bax、Bcl-2蛋白表达的影响 | 第45-47页 |
·含药脑脊液对谷氨酸损伤的PC12 细胞的caspase-3 和caspase-9 蛋白表达的影响 | 第47-48页 |
6 讨论 | 第48-49页 |
7 结论 | 第49-50页 |
讨论 | 第50-51页 |
附图 | 第51-54页 |
技术线路图 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
综述 | 第60-69页 |
参考文献 | 第66-69页 |
个人简历 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |